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电泳软件分析为什么不能选ddd

发布时间: 2022-05-09 04:10:47

① 这个琼脂糖凝胶电泳图怎么分析呢

Marker是分不同大小的,依据不同目的条带大小用的,你用的Marker的最大大小的条带都比你的基因组条带小,所以换Marker喽。
你私信问我的为什么会有红色,我的回答是:
我感觉这是你的成像系统的设定问题。我用过处理照片的软件Lightroom,如果照片中有超亮的区域,在修改照片的时候会显示这种红色,以表示过度曝光了。

② 论文PCR电泳结果用什么软件编辑

这个有个很好用的免费软件ImageJ,是NIH编的,做这个分析最好了。
有很多凝胶成像仪都自带可以分析电泳条带灰度的软件,操作也很简单。
从血液中提取核酸,不能用肝素作抗凝剂,否则会影响后续的PCR反应,建议使用ACD抗凝剂,具体配方可网上网络,只需柠檬酸、柠檬酸钠和NaAc

③ 用imagej 分析完电泳图谱以后怎么用分析

ImagJ是一款简单的图像处理与分析软件,可以用来进行WB定量分析。
一、利用ImagJ对WB条带进行灰度分析
1、File——》open 打开WB片子
2、把图片转化成灰度图片
image——》type——》8-bit
3、消除背景影响
process——》subtract background 选择50基本可以
4、设置定量参数
analyze——》set measurements,点击面积,平均密度和灰度值及Integrated Density
5、设置单位
analyze——》set scale ,在“unit of length”的方框里输入“pixels”
6、把图片转换成亮带,Edit——》invert
7、选择Freehand
Selection,尽量把条带圈起来,点击键盘m,出来IntDen灰度值
8、复制数据IntDen进行分析
二、利用ImagJ对WB条带进行密度分析
1、File——》open 打开WB片子
2、如条带不正,需修正
image——》transform——》rotate
调节angle值,直到条带水平为止
3、选中矩形选项,圈中第一个条带,然后 analyze——》gels——》select first
lane(快捷键ctrl+1),然后移动第一个条带上的矩形到第二个条带上,analyze——》gels——》select second
lane(快捷键 ctrl+2),最后analyze——》gels——》plotlanes
4、选中直线工具,将开口的波峰关闭
5、选中魔棒工具,点击波峰可以显示波峰下面积,即条带的密度值
6、以第一个数值为基数,其他数值与第一个数值的比值为相对密度

④ 求助 谁会用软件分析PCR电泳条带的 我想定量分析一下

这个有个很好用的免费软件 Image J,是NIH编的,做这个分析最好了
可以到这里下载 http://rsbweb.nih.gov/ij/download.html

⑤ SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 上下槽电极缓冲液用过一次后,是否可混合再用为什么

不能。原因如下:

电泳的过程中,电极缓冲液中的水分会被蒸发,导致里面的离子浓度升高。加之电解过程中是对里面水的电解,也引起水的减少。离子强度过大,会影响到蛋白质的活性,使电泳速度减慢,条带不清晰。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳与滤纸相比较,有以下优点。醋酸纤维素薄膜对蛋白质样品吸附极少,无“拖尾”现象,染色后背景能完全脱色,各种蛋白质染色带分离清晰,因而提高了测定的精确性。





(5)电泳软件分析为什么不能选ddd扩展阅读:

聚丙烯酰胺凝胶电泳不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带,如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质,蛋白质样品电泳后,就应只分离出一条区带。

从而能达到分离不同分子量蛋白的目的。主要用在检定蛋白混合物中的目的蛋白含量,或是电泳后用于WB分析。

⑥ 请问在做完western blot 后,用图像分析软件得到光密度值,接下来怎么做统计分析,要详细的步骤

Western Blot原理
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
N E.h+l/g#c"b%B-[&Aâ?ѻ?ϭwww.genecool.com 推荐书籍:《分子克隆》、《抗体技术实验指南》、Antibodies(a laboratory manual, wrote by Ed Harlow ,david lane)、《蛋白电泳实验技术》、《蛋白质技术手册》等。
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

网上关于这个实验的内容还是比较多的,推荐可以去这里看看,应该还算不错
http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8199&page=1#pid31696

⑦ 在其他地方看到有用bandscan软件来分析PCR条带亮度的说法。用于分析RNA表达量,请问可以用这个吗

楚谊守笼址帆婆甜泰岛

⑧ 影响毛细管电泳分离的主要因素有哪些

影响毛细管电泳分离的主要因素

缓冲液

缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。

缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高,离子强度增加,双电层厚度减小,Zeta电势降低,电渗流减小,样品在毛细管中停留时间变长,有利于迁移时间短的组分的分离,分析效率提高。同时,随着电解液浓度的提高,电解液的电导将大大高于样品溶液的电导而使样品在毛细管柱上产生堆积的效果,增强样品的富集现象,增加样品的容量,从而提高分析灵敏度。但是,电解液浓度太高,电流增大,由于热效应而使样品组分蜂形扩展,分离效果反而变差。此外,离子还可以通过与管壁作用以及影响溶液的粘度、介电常数等来影响电渗,离子强度过高或过低都对提高分离效率不利。

pH值

缓冲体系pH的选择依样品的性质和分离效率而定,是决定分离成败的一大关键。不同样品需要不同的pH分离条件,控制缓冲体系的pH值,一般只能改变电渗流的大小。pH能影响样品的解离能力,样品在极性强的介质中离解度增大,电泳速度也随之增大,从而影响分离选择性和分离灵敏度。pH还会影响毛细管内壁硅醇基的质子化程度和溶质的化学稳定性,pH在4-10之间,硅醇基的解离

度随pH的升高而升高,电渗流也随之升高。因此,pH为分离条件优化时不可忽视的因素。

分离电压

在CE中,分离电压也是控制电渗的一个重要参数。高电压是实现CE快速、高效的前提,电压升高,样品的迁移加大,分析时间缩短,但毛细管中焦耳热增大,基线稳定性降低,灵敏度降低;分离电压越低,分离效果越好,分析时间延长,峰形变宽,导致分离效率降低。因此,相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间,但电压过高又会使谱带变宽而降低分离效率。电解质浓度相同时,非水介质中的电流值和焦耳热均比水相介质中小得多,因而在非水介质中允许使用更高的分离电压。

温度

温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。

添加剂

在电解质溶液中加入添加剂,例如中性盐、两性离子、表面活性剂以及有机溶剂等,会引起电渗流的显着变化。表面活性剂常用作电渗流的改性剂,通过改变浓度来控制电渗流的大小和方向,但当表面活性剂的浓度高于临界胶束浓度时,将形成胶束。加入有机溶剂会降低离子强度,Zeta电势增大,溶液粘度降低,改变管壁内表面电荷分布,使电渗流降低。在电泳分析中,缓冲液一般用水配制,但用水一有机混合溶剂常常能有效改善分离度或分离选择性。

毛细管电泳处理软件界面

进样

CE的常规进样方式有两种:流体力学和电迁移进样。电迁移进样是在电场作用下,依靠样品离子的电迁移和(或)电渗流将样品注入,故会产生电歧视现象,会降低分析的准确性和可靠性,但此法尤其适用于粘度大的缓冲液和CGE情况。流体力学进样是普适方法,可以通过虹吸、在进样端加压或检测器端抽空等方法来实现,但选择性差,样品及其背景同时被引入毛细管,对后续分离可能产生影响。通过进样时间也可以来改善分离效果,进样时间过短,峰面积太小,分析误差大。进样时间过大,样品超载,进样区带扩散,会引起峰之间的重叠,与提高分离电压一样,分离效果变差。

另外,毛细管电泳技术的高分离性能以及消耗试剂少等特点使其分析领域得到了广泛的应用,但是其常规分析的灵敏度不能适应痕量分析的要求,限制了它的应用和推广。样品前处理技术可以提高样品通量或将痕量分析物进行预富集,去除样品基质,将其与毛细管电泳技术联用不仅可以提高分析的灵敏度,同时也消除了大部分可能的基质干扰,是一种比较理想的富集分离检测技术。常用的有CE一流动注射联用技术、固相萃取-CE联用技术、固相微萃取-CE联用技术、液相微萃取-CE联用技术、微透析-CE联用技术和膜萃取-CE联用技术。

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