生物临时保藏为什么保存时间不长

⑴ 设计一个如何获得微生物的纯培养的实验

具体看你要培养什么类型的微生物呢？
大致就分以下几步吧1.培养基的配制2.菌种的接种操作3,菌种的保藏
以细菌培养为例，实验操作
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
⑴制备流程：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
⑵实验注意事项
①全程要求无菌操作：无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染。
②50℃左右开始倒平板：培养基用高压灭菌锅灭菌后，需冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。操作时使锥形瓶的瓶口通过火焰灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
③冷却后倒置的原因：平板冷凝后，培养皿盖上会凝结小水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高。将平板倒置，即可以使培养皿表面的水分更好的挥发，又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
④在倒平板过程中，不能将培养基溅在培养皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
2、纯化大肠杆菌的接种方法（即微生物的接种方法）
微生物最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
⑴平板划线法
①原理
连续划线：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。由于划线后，线条末端细菌数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
②特点
操作简单，但是单菌落不易形成。
③操作注意事项
A、第一次划线及每次划线之前接种环都需要灼烧灭菌，划线操作结束时仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的不同。
Ⅰ 第一次灼烧目的：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。
Ⅱ 每次划线前灼烧：杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种来自上次划线末端。
Ⅲ 划线结束灼烧：杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
B、灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高，杀死菌种。
C、划线时最后一个区域不要与第一个区域相连。
⑵稀释涂布平板法
①原理
将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养皿表面形成单个菌落。
②特点
操作复杂，但是但菌落容易分离
③操作注意事项
A、将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。且待酒精燃尽后，冷却8～10s后，方能进行涂布。
B、操作中一定要注意防火！不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。
C、在所用操作过程中都应在火焰附近进行。应从操作的各个细节上保证“无菌”。如：对涂布器等接种器皿进行消毒和灭菌、酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。
3、结果分析与评价
⑴培养基制备成功的标准
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则实验失败需要重新制备。
⑵接种操作成功的标准
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌的菌落特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，实验失败，需要分析原因，再次制备。
⑶及时细致地观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微变化。可用图表来记录菌落的颜色、大小、形状、数目等。
4、要点：菌种的保藏
⑴目的
菌种放在低温环境中保藏的目的是降低新陈代谢速率，延缓菌种衰老。
⑵方法
①临时保藏法：适用于频繁使用的菌种。
方法：将菌种接种到固体斜面培养基上，在适宜的温度下培养。当菌落长成以后，将试管置于4℃的冰箱中保藏。
缺点：保存时间不长，菌种容易被污染或产生变异。
②甘油冷冻管藏法：适用于需要长期保存的菌种。
方法：在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保藏。

⑵ 临时保藏法和甘油管藏法是什么意思

临时保藏法：将菌种接种到固体斜面培养基上，然后在适宜的温度下进行培养，当菌落长成之后，将试管放置于冰箱中（4°C）进行保藏即可。甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。

甘油管冷冻保藏法是将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液。取1ml灭菌甘油放入与菌液充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。-20℃保存时间较短。或采用体积比为8：2的甘油-生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。

注意事项

无论采用何种保藏方法，首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏，最好保藏它们的休眠体，如分生孢子、芽孢等。其次，应根据微生物生理、生化特点，人为地创造环境条件，使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。这些人工造成的环境主要是干燥、低温和缺氧，另外，避光、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂也能有效提高保藏效果。

⑶ 菌种保藏的常用方法及特点

（1）斜面低温保藏。是一种最常用、最简便的菌种保藏方法。首先将需要保藏的菌种接到斜面培养基上，在适宜的温度条下培养，当菌丝健壮地长满斜面时，即将此试管菌种取出，放置于4 ℃的冰箱中保藏。特点：
①简单易行，适用于各类菇类菌种保藏，是目前生产及科研普遍采用的一种方法；②保藏时间短，需6个月转接一次，转管次数多菌丝变异的可能性大；③如改用橡皮塞并用石蜡扣，可保藏1年～3年。
（2）液体石蜡保藏。液体石蜡保藏也称为矿油保藏，即用矿油覆盖试管斜面试管保藏的方法。矿油是指无色、透明、黏稠、性质稳定、不易被微生物分解的石蜡油和液体石蜡，将其覆盖在斜面菌种之上，可以隔绝空气，防治培养基水分蒸发，抑制微生物的代谢活动，推迟细胞老化，从而达到长期保藏菌种的目的。特点：
①方法简便易行，保藏条件不严格，保藏时间长，可作为长期保藏菌种的方法；②菌种必须垂直放，放置不方便。
（3）滤纸保藏。滤纸保藏是一种以无菌滤纸作为食用菌孢子吸附载体长期保藏菌种的方法，又称滤纸孢子保藏法。特点：技术要求高，设备费用大，菌种不易衰老退化，菌种保藏时间长很少变异。
（4）自然基质保藏。自然基质保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含营养的自然生长的基质作培养基来保藏菌种的方法。自然基质很多，食用菌常用的自然基质有发酵的粪草、木屑及枝条基质等，取材方便，制作方法简便，保藏时间也较长。使用时，只需取一块、一粒或一条培养物放在新鲜的培养基上，并在适温下培养即可。特点：方法简便易行，保藏时间长。

⑷ 菌种保藏

菌种保藏方法大全

基本原理
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。

低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。

保藏方法大致可分为以下几种：

1．传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4—6℃冰箱内保存。

2．液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3．载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5．冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。

有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

三、器材

细菌、酵母菌，放线菌和霉菌；

肉膏蛋白胨斜面培养基，灭菌脱脂牛乳，灭菌水，化学纯的液体石蜡，甘油，五氧化二磷，河沙，瘦黄土或红土，冰块、食盐，干冰，95％酒精，10％盐酸，无水氯化钙；

灭菌吸管，灭菌滴管，灭菌培养皿，管形安瓿管，泪滴形安瓿管（长颈球形底），40目与 100目筛子，油纸，滤纸条（0．5×1．2cm），干燥器，真空泵，真空压力表，喷灯，L形五通管，冰箱，低温冰箱（-30℃），液氮冷冻保藏器。
四、操作步骤、各保藏法的应用范围及优缺点

下列各法可根据实验室具体条件与需要选做。

1．斜面低温保藏法

将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。

保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。

此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而影响微生物的性状；污染杂菌的机会亦较多。
2．液体石蜡保藏法

（1）将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。

（2）将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。

（3）用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm为准（图Ⅶ-12），使菌种与空气隔绝。

（4）将试管直立，置低温或室温下保存（有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长）。
此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1—2年，一般无芽孢细菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌，在37℃温箱内，亦可保藏3个月之久。此法的优点是制作简单，不需特殊设备，且不需经常移种。缺点是保存时必须直立放置，所占位置较大，同时也不便携带。从液体石蜡下面取培养物移种后，接种环在火焰上烧灼时，培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅，应特别注意。
3．滤纸保藏法

（1）将滤纸剪成0．5×1．2cm的小条，装入0．6×8cm的安瓿管中，每管1—2张，塞以棉塞，1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌30分钟。

（2）将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

（3）取灭菌脱脂牛乳1—2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。

（4）用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。

（5）将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。

（6）将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。

（7）需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14—17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。

4．沙土保藏法

（1）取河沙加入10％稀盐酸，加热煮沸30分钟，以去除其中的有机质。

（2）倒去酸水，用自来水冲洗至中性。

（3）烘干，用40目筛子过筛，以去掉粗颗粒，备用。

（4）另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，加自来水浸泡洗涤数次，直至中性。

（5）烘干，碾碎，通过100目筛子过筛，以去除粗颗粒。

（6）按一份黄土、三份沙的比例（或根据需要而用其他比例，甚至可全部用沙或全部用土）掺合均匀，装入10×100mm的小试管或安瓿管中，每管装1g左右，塞上棉塞，进行灭菌，烘干。

（7）抽样进行无菌检查，每10支沙土管抽一支，将沙土倒入肉汤培养基中，37℃培养48小时，若仍有杂菌，则需全部重新灭菌，再作无菌试验，直至证明无菌，方可备用。

（8）选择培养成熟的（一般指孢子层生长丰满的，营养细胞用此法效果不好）优良菌种，以无菌水洗下，制成孢子悬液。

（9）于每支沙土管中加入约0．5ml（一般以刚刚使沙土润湿为宜）孢子悬液，以接种针拌匀。

（10）放入真空干燥器内，用真空泵抽干水分，抽干时间越短越好，务使在12小时内抽干。

（11）每10支抽取一支，用接种环取出少数沙粒，接种于斜面培养基上，进行培养，观察生长情况和有无杂菌生长，如出现杂菌或菌落数很少或根本不长，则说明制作的沙土管有问题，尚须进一步抽样检查。

（12）若经检查没有问题，用火焰熔封管口，放冰箱或室内干燥处保存。每半年检查一次活力和杂菌情况。

（13）需要使用菌种，复活培养时，取沙土少许移入液体培养基内，置温箱中培养。

此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌、放线菌，因此在抗生素工业生产中应用最广，效果亦好，可保存2年左右，但应用于营养细胞效果不佳。
5．液氮冷冻保藏法

（1）准备安瓿管用于液氮保藏的安瓿管，要求能耐受温度突然变化而不致破裂，因此，需要采用硼硅酸盐玻璃制造的安瓿管，安瓿管的大小通常使用75×10mm的，或能容1．2mm液体的。

（2）加保护剂与灭菌保存细菌、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时，则将空安瓿管塞上棉塞，1．05kg/cm2，121．3℃灭菌15分钟：若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10％的甘油蒸馏水溶液或10％二甲亚砜蒸馏水溶液，加入量以能浸没以后加入的菌落圆块为限，而后再用1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌15分钟。

（3）接入菌种将菌种用10％的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液，装入已灭菌的安瓿管；霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器，从平板内切取菌落圆块，放入含有保护剂的安瓿管内，然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。

（4）冻结再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速冻结至-30℃。若细胞急剧冷冻，则在细胞内会形成冰的结晶，因而降低存活率。
（5）保藏经冻结至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器（图Ⅶ-14）的小圆筒内，然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃，液态氮内为-196℃。

（6）恢复培养保藏的菌种需要用时，将安瓿管取出，立即放入38—40℃的水浴中进行急剧解冻，直到全部融化为止。再打开安瓿管，将内容物移入适宜的培养基上培养。

此法除适宜于一般微生物的保藏外，对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏，而且性状不变异。缺点是需要特殊设备。

6．冷冻干燥保藏法

（1）准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形状可用长颈球形底的，亦称泪滴型安瓿管（图Ⅶ-15），大小要求外径6—7．5mm，长105mm，球部直径9—11mm，壁厚0．6—1．2mm。也可用没有球部的管状安瓿管。塞好棉塞，1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌30分钟，备用。

（2）准备菌种，用冷冻干燥法保藏的菌种，其保藏期可达数年至十数年，为了在许多年后不出差错，故所用菌种要特别注意其纯度，即不能有杂菌污染，然后在最适培养基中用最适温度培养，使培养出良好的培养物。细菌和酵母的菌龄要求超过对数生长期，若用对数生长期的菌种进行保藏，其存活率反而降低。一般，细菌要求24—48小时的培养物；酵母需培养3天；形成孢子的微生物则宜保存孢子；放线菌与丝状真菌则培养7—10天。

（3）制备菌悬液与分装以细菌斜面为例，用脱脂牛乳2ml左右加入斜面试管中，制成浓菌液，每支安瓿管分装0．2ml。
（4）冷冻冷冻干燥器有成套的装置出售，价值昂贵，此处介绍的是简易方法与装置，可达到同样的目的。

将分装好的安瓿管放低温冰箱中冷冻，无低温冰箱可用冷冻剂如干冰（固体CO2>）酒精液或干冰丙酮液，温度可达-70℃。将安瓿管插入冷冻剂，只需冷冻4—5分钟，即可使悬液结冰。

（5）真空干燥为在真空干燥时使样品保持冻结状态，需准备冷冻槽，槽内放碎冰块与食盐，混合均匀，可冷至-15℃。装置仪器如图Ⅶ-16，安瓿管放入冷冻槽中的干燥瓶内。

抽气一般若在30分钟内能达到93．3Pa（0．7mmHg）真空度时，则干燥物不致熔化，以后再继续抽气，几小时内，肉眼可观察到被干燥物已趋干燥，一般抽到真空度26．7Pa（0．2mmHg），保持压力6—8小时即可。

（6）封口抽真空干燥后，取出安瓿管，接在封口用的玻璃管上，可用L形五通管（图Ⅶ-17）继续抽气，约10分钟即可达到26．7Pa（0．2mmHg）。于真空状态下，以煤气喷灯的细火焰在安瓿管颈中央进行封口。封口以后，保存于冰箱或室温暗处。

此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，即使对一些很难保存的致病菌，如脑膜炎球菌与淋病球菌等亦能保存。适用于菌种长期保存，一般可保存数年至十余年，但设备和操作都比较复杂。

⑸ 微生物的实验室培养（高中生物）

奇怪，高中生物我以前怎么没学这些。还好我是研究微生物方向的。我就一字字打给你吧，希望你有用没用看它个50%以上吧，别让我白忙就行。以下回答绝对权威，表述有些未采用专用术语。

针对你所问的三个大范围的问题，我只能简单的介绍一下。
1、培养基就是微生物生长繁殖的物质和环境基础，培养基含有氮源，碳源，水，生长因子等等。可以分成固体培养基，液体培养基，天然培养基，合成培养基，选择培养基等等。不同培养基的功能不同，有的是活化微生物用的，有的是选择微生物用的，有的则是保藏微生物用的。根据具体的目的和微生物的种类，选择不同的培养基。而且选择的培养基所用的营养成分的比例根据具体需要而定。至于保藏的方法，有短时保藏，也有长时间冻藏的，保藏方法也有很多，你所说的临时保藏就是斜面试管4摄氏度保藏法，它是将微生物划线于斜面试管培养基上，而后4摄氏度低温保藏。是需要培养基的。甘油保藏法也有几种不同的操作方法，有的是【无菌水+细菌】和甘油以不同比例混合成10%-40%不等的甘油浓度保藏液，有的则是【培养基（液体培养基）+细菌】和甘油按比例混合成10%-40%不等的甘油保藏液，而后于-20摄氏度条件下冻藏，保藏期通常数年。所以也是需要培养基的。这也是众多培养基中的一小部分而已。第一个问题先告一段落吧。
2、有点晕，第二个问题更复杂。你所说的稀释涂布平板法主要是用于细菌的分离和纯化步骤上，由于菌悬液浓度过高时，接种于培养基上会出现密密麻麻的菌落，菌落之间相互重叠，也就失去了分离纯化的意义。菌悬液浓度太低的话可能你涂布到平板上的菌悬液中没有了你需要的细菌。也无法分离出目的细菌。
对于你说的一步到位，是多少浓度合适呢？你不知道，所以就只能10倍，100倍，1000倍，10000倍的稀释下去，然后每个浓度的菌悬液都涂布相应的平板，这样，就可以保证会有一种浓度比较合适，能够分离纯化出你要的细菌。当然了，如果你一次性稀释的恰到好处，也是可以的，能分离到纯的单菌落没人敢否认你，不过就是这样的成功率不高，或者说很难。这种方法也是挺麻烦的，不过稀释也是很简单的操作。不知道这样说你能否明白？
3、第三个问题稍微好叙述些。原理：单纯的水在-20摄氏度会结成冰晶，破坏细胞壁和细胞膜，使细菌死亡。甘油则不会形成冰晶，可以保持细胞壁和细胞膜的完整性。同时由于100%的甘油不能将细菌均匀混合，太黏了也不太会流动，所以要稀释成10%-40%浓度的甘油，我们实验室一般使用20%终浓度的甘油进行保种，注意是终浓度20%，不是浓度为20%。如果浓度低于15%或10%，同样会有冰晶，会破坏细胞壁和膜。另一个面，细菌毕竟是细菌，不是高等生物，它们的抗逆性很强，-20摄氏度不会杀死它们，只是抑制了它们的活性，因而它们停止了生长，进入一种类似休眠的状态，但条件合适时，它们会继续繁殖。当然经过甘油-20摄氏度低温保藏的菌种在使用之前是要经过活化的，注意了，这就是我前面所说的活化培养基，它是一种营养环境，目的是让处于休眠的细菌醒过来，恢复活力。这再另一方面回答了你培养基有什么用的问题。它还有活化细菌的作用。别说-20摄氏度不会冻死细菌，有些细菌在100度的温度下都能存活的，当然这样的细菌是嗜极细菌就是了。

说了这么多，也不知道你有没认真看完，是否看明白了。别让我辛辛苦苦打这么多字你就随便瞄几眼。～～～～还有就是如果看明白了，也希望你把分给我吧，最近问了些基因克隆方面的问题，分用了不少，所以现在正在挣分数。。。谢谢。

⑹ 为什么水中保鲜不能把生物保存千万年

生物进化的基础是DNA的变异，生物进化的动力是生态环境的改变。
某些生物在数千万年中都没有改变，原因是对环境变化的适应能力强，或在几千万年时间内其生存环境变化不大。如水生动物变化就小，是因为水中的环境相对比较稳定。

⑺ 培养基的青霉素可以分离青霉

（1）抗生素有杀灭细菌的作用，而对酵母菌等真菌没有伤害，所以在分离酵母菌时，可在选择培养基中添加抗生素来抑制细菌的生长．获得纯净酵母菌的关键是防止杂菌污染．
（2）若所得菌种暂时不使用，可用固体斜面培养基进行临时保藏，由于菌种容易发生污染并变异，所以保存时间不能太长．为了防止污染环境，使用后的培养基要先用高压蒸汽灭菌法灭菌后才能丢弃．
（3）果酒发酵的适宜温度是18℃-25℃，可用酸性的重铬酸钾来检测发酵液中是否有酒精产生．在发酵过程中，葡萄皮中的色素进入到发酵液中，所以酿出的葡萄酒为红色的．
故答案为：（1）选择 青霉素（或抗生素） 防止外来杂菌的入侵
（2）菌种容易被污染或产生变异 高压蒸汽灭菌
（3）18℃-25℃酸性的重铬酸钾 葡萄皮中的色素进入到发酵液中

⑻ 为什么在临时保藏过程中，每3∼6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上

临时培养的培养基随保存时间的延长而失去其营养价值，菌在其上就不能存活而死亡。在存放的过程中主要是培养基水分的散失，以及细菌利用其中能源导致能源缺乏。随着冷冻时间的延长菌体也会受到伤害，所以要定期复壮一下，以保持菌体的生物活性、。

⑼ 跪求：微生物保存方法，各种保存方法的保存时间

1斜面低温保藏法：有芽孢细菌存半年，无则一个月。2液体石蜡保藏：两年。3沙土保藏：十年。4麸皮保藏：一年。5悬液保藏：一到两年。6冷冻真空干燥法：五到十五年。7液氮超低温法：十到二十年。8低温保藏法：一年。9甘油保藏法：半年