为什么反相色谱保留时间变短
发布时间: 2024-11-26 10:48:48
Ⅰ 反相色谱柱怎么调整洗脱梯度让保留时间前移
1、提高有机相浓度:增加有机溶剂在洗脱梯度中的比例,可以降低样品在柱子上的保留时间。因此,可以逐渐提高有机相溶液浓度,观察峰的形态和相对保留时间变化,找到最佳的流动相参数。
2、增加洗脱梯度的斜率:增加洗脱梯度的斜率可以加速在柱子上的通过速度,从而缩短保留时间。需要注意,斜率也不能过大,否则容易导致色谱峰的扭曲或分离不完全。
3、改变pH值:反相色谱柱的保留时间受样品的酸碱性质影响较大,因此,适当调整样品溶液的pH值可以改变样品离子性质,从而影响其在柱子上的保留时间。
Ⅱ 液相色谱法中,反向键和色谱法,降低流动相的极性,洗出物的保留时间是变短了还是变长了为什么
变短了。
首先你说的应该是“反相键合色谱法”。
其次,洗脱原理类似抢东西,谁的力量大谁能够抢到手,而在液相色谱中即是流动相与固定键合相抢被洗脱物质,是一个溶解-吸附-再解吸-溶解的重复过程。
洗出物溶于流动相中的同时还会与固定键合相作用(其作用力类似范德华力之类的),因此当流动相极性变大有机相比例增加时,洗出物与流动相之间的作用力增加,将随流动相走得更快,因此出峰时间更短。
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