高效液相色谱为什么保留时间最短

① 影响高效液相色谱组分保留时间因素

色谱柱类型，这是最关键的因素，关系到分离效率的好坏，也关乎各个组分的保留时间；
流动相组成，改变流动相组成，就可以改变流动相的极性(正相、反相色谱)或者流动相的离子比例（离子色谱），从而有效改善不同组分的保留时间；
流动相流速，一般在保证分离度的前提下，流动相流速越快，保留时间越短；
流动相中含盐量，对于某些有机碱或者有机酸来说，调变流动相中含盐量可以有效改变分离效率，从而改变保留时间；
流动相温度，温度越高，保留时间提前。

② 高效液相做含测，保留时间差别大

是不是同一个样品不同时间做出来的保留时间差别较大？
保留时间影响因素比较多，如果已经确定pH值影响不大，可以从以下几个方面进行考虑：
1.流动相的比例，最好保证有机相的比例一致，保存及超声脱气的时候用封口膜封一下，减少有机相挥发，也不要放置太长时间
2.柱温是否恒定，柱温在一定程度上会影响保留值，最好设为定值，不要设为不控制
3.色谱柱有没有更换，不同厂家的同一类型色谱柱由于填充技术、制备工艺的不同，在同样色谱条件下对同一组分的保留情况会有所不同，即使是同一厂家的也会有这种情况
4.液相系统是否更换，不同的色谱仪的管路长短不同，会使走样时柱压不同，柱压也会影响出峰时间和峰形，原理类似于加压过柱
5.如果是梯度洗脱，要保证平衡时间足够长，否则也会引起保留值改变

③ 操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些

影响液相色谱保留时间的因素：
1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子，分离度和保留时间往往都会有点差别，所以在操作的时候：a、可以适当调整流动相的比列，如甲醇—水（90:10），如分离效果与保留时间延长，可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成，甲醇就可以换成乙腈，看具体的实际操作而定。
2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别，主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同，但保留时间一般不会相差太大，可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时，一般就调整到室温或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、进样量。进样量大，保留时间往往会延长。
5、输液系统的压力，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，保留时间将会缩短。
具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察，经过调整后才可以的到较好的色谱条件。