为什么高效液相色谱保留时间过短
Ⅰ 操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些
影响液相色谱保留时间的因素：
1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子，分离度和保留时间往往都会有点差别，所以在操作的时候：a、可以适当调整流动相的比列，如甲醇—水（90:10），如分离效果与保留时间延长，可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成，甲醇就可以换成乙腈，看具体的实际操作而定。
2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别，主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同，但保留时间一般不会相差太大，可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时，一般就调整到室温或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、进样量。进样量大，保留时间往往会延长。
5、输液系统的压力，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，保留时间将会缩短。
具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察，经过调整后才可以的到较好的色谱条件。
Ⅱ 高效液相做含测，保留时间差别大
是不是同一个样品不同时间做出来的保留时间差别较大？
保留时间影响因素比较多，如果已经确定pH值影响不大，可以从以下几个方面进行考虑：
1.流动相的比例，最好保证有机相的比例一致，保存及超声脱气的时候用封口膜封一下，减少有机相挥发，也不要放置太长时间
2.柱温是否恒定，柱温在一定程度上会影响保留值，最好设为定值，不要设为不控制
3.色谱柱有没有更换，不同厂家的同一类型色谱柱由于填充技术、制备工艺的不同，在同样色谱条件下对同一组分的保留情况会有所不同，即使是同一厂家的也会有这种情况
4.液相系统是否更换，不同的色谱仪的管路长短不同，会使走样时柱压不同，柱压也会影响出峰时间和峰形，原理类似于加压过柱
5.如果是梯度洗脱，要保证平衡时间足够长，否则也会引起保留值改变
Ⅲ 在做高效液相色谱中，为什么同样的样品，物质的出峰时间差这么多呢，第一次是16min，第二次是26min
要看你液相的条件前后是否一致。最主要的是流动相是否前后相同，流动相的不同最容易导致保留时间变化；另外要看一下流动相流速，柱温等···
Ⅳ 高效液相色谱的出峰时间为什么会推迟测的是同一个样品，白天测比晚上测出峰时间推迟了。
压力不会使出峰时间延后，出峰时间延后说明保留时间增长，与流动相的极性、柱温有关系。柱温不变，正相条件下，可能是流动相极性变弱了；反相条件下，可能是流动相极性变强了。流动相不变的前提下，看柱温是不是偏低。
应该是流动相或者柱子的问题.流动相比例的变化可以排除,因为比例变化,A,B两峰都会变化.
B峰不变化,A峰变化.应该是体系中有A物质敏感的微小变化.例如PH,极性等.
我觉得是流动相比例变了，最好的验证方法是流动相配制在一个瓶子
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Ⅳ 液相色谱的保留时间总是不稳定，该怎么解决
1、首先考虑是否有堵塞，查看各放溶剂瓶的过滤头是否有脏，脏了后清洗，玻璃的30%稀硝酸泡，不锈钢的可以超声处理。
2、purge阀打开，看看单通道5ml/min流速，用水压力多大，如果超过10bar就要更换purge阀的滤芯了，不过到5bar就比较脏了。
3、清洗下主动阀的滤芯。
4、如果这些都处理了，还是不行，那估计是比例阀的问题了。
压力不稳，出峰时间前后飘，觉得进气泡或者崩头污染的可能性比较大，用脱气过的异丙醇多冲一会试试。
有两种可能,一是流动相里有汽泡,二是检测器里残留有汽泡.
压力不稳这个就不正常，看是是不是有泄漏的地方，或者单向阀，比例阀有问题
纯水和甲醇确实会使保留时间不太稳定的原因是 脱气没有完全，气泡进入单向阀。所以引起了柱压不稳。导致的是基线不稳和流速变化。所以造成了Rt前后不一致。
我认为主要是气泡，用注射器吸满甲醇，拆开单向阀进，出螺母，从入口出打入甲醇，然后出口出会有气泡冒出。即可。
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Ⅵ 液相色谱峰保留时间后移
若干的可能性，逐个排除：
如果是保留时间越来越短，可能是色谱柱不耐低pH，固定相有水解，应更换色谱柱，如：Agilent StableBond等；
如果是保留时间越来越长，可能是系统未平衡——先用纯乙腈冲柱，再用流动相充分平衡；
如果是保留时间不稳定，且使用的LC是低压多元泵，可能是比例阀闭锁不全，导致其他通道的强洗脱流动相（如乙腈）进入流路——将其他通道换为水，并充分替换；
如果是保留时间越来越长，可能是压力降低——有泄漏，或流路有气泡。