mtt的孵育时间为什么是4小时
‘壹’ 锷犱简mtt钖4灏忔椂镞堕棿寰堜弗镙煎悧
鍦ㄥ姞鍏MTT钖庯纴涓鑸鍒4灏忔椂鍗冲彲寰楀埌姣旇缉濂界殑缁撴灉锛屼絾鏄镞堕棿杩囧缑澶闀夸箣钖庡啀杩涜屾祴瀹氾纴浼氩圭粨鏋滀骇鐢熻宸锛屾墍浠ヤ笉瑕佽冭槛镞堕棿杩囧缑澶闀垮啀杩涜屾祴瀹氥
‘贰’ mtt瀹为獙铡熺悊
鍣诲攽钃濓纴绠绉癕TT銆傜粏鑳炵嚎绮掍綋涓镄勭惀鐝閰歌㔉姘㈤叾鑳戒娇澶栨簮镐MTT杩桦师涓烘按涓嶆憾镐х殑钃濈传镩茬粨鏅剁敳镊 (Formazan)骞舵矇绉鍦ㄧ粏鑳炰腑锛岃屾荤粏鑳炴棤姝ゅ姛鑳姐备簩鐢插熀浜氱牅(DMSO)鑳芥憾瑙g粏鑳炰腑镄勭敳镊滐纴鐢ㄩ叾镵斿厤鐤妫娴嬩华鍦570nm娉㈤暱澶勬祴瀹氩叾鍏夊惛鏀跺硷纴鍙闂存帴鍙嶆椠娲荤粏鑳炴暟閲忋傚湪涓瀹氱粏鑳炴暟锣冨洿鍐咃纴MTT缁撴櫠褰㈡垚镄勯噺涓庣粏鑳炴暟鎴愭f瘆銆
4. 姣忓瓟锷犲叆10ulMTT婧舵恫锛5mg/ml锛屽嵆0.5%MTT锛夛纴缁х画锘瑰吇4h銆傝嫢钻鐗╀笌MTT鑳藉熷弽搴旓纴鍙鍏堢诲绩钖庡纯铡诲煿鍏绘恫锛屽皬蹇幂敤PBS鍐2-3阆嶅悗锛屽啀锷犲叆钖猡TT镄勫煿鍏绘恫銆
5. 缁堟㈠煿鍏伙纴灏忓绩钖稿幓瀛斿唴锘瑰吇娑层
6. 姣忓瓟锷犲叆100ul浜岀敳锘轰筜镰滐纴缃鎽囧簥涓娄绠阃熸尟钻10min锛屼娇缁撴櫠鐗╁厖鍒嗘憾瑙c傚湪閰惰仈鍏岖柅妫娴嬩华OD490nm澶勬祴閲忓悇瀛旂殑钖稿厜鍊笺
7. 钖屾椂璁剧疆璋冮浂瀛旓纸锘瑰吇锘恒丮TT銆佷簩鐢插熀浜氱牅锛夛纴瀵圭収瀛旓纸缁呜优銆佺浉钖屾禄搴︾殑钻鐗╂憾瑙d粙璐ㄣ佸煿鍏绘恫銆丮TT銆佷簩鐢插熀浜氱牅锛夈
‘叁’ 锅歁TT瀹为獙 缁呜优阈烘澘镐绘槸涓嶅潎鍖 链変綍镩鏂硅В鍐
锅歁TT瀹为獙 缁呜优阈烘澘镐绘槸涓嶅潎鍖 链変綍镩鏂硅В鍐
涓昏佹槸锘轰簬SDH镄勬椿镐э纴镆愪簺缁呜弻链夎繎浼肩殑浠h阿鐗规у彲鑳戒细骞叉𡒄缁撴灉锛
MTT瀹为獙:
灏嗙粏鑳炰互1脳105/ml娴揿害鎺ョ崭簬96瀛斿煿鍏绘澘锛100渭l/瀛旓纴璁8瀛旈吨澶嶏纴瀛佃偛杩囧滐绂缁呜优璐村佸悗锛岀敤镞犺娓呭煿鍏绘恫瀛佃偛24h锛屼娇缁呜优钖屾ワ绂寮冧笂娓呮恫锛屼互锘瑰吇娑查厤鍒朵笉钖屾禄搴︾殑钻鐗100渭l/瀛旓纴瀛佃偛24h锛屽姞鍏MTT娑50渭l/瀛旓纴缁х画瀛佃偛4h锛屽掔疆鐩稿樊鏄惧井闀滀笅瑙傚疗锛屽彲瑙佽掴绱镩查拡鐘剁粨鏅讹绂钖稿幓涓婃竻锛屽姞鍏DMSO100渭l/瀛旓纴瀹ゆ俯鎸钻15min锛屽緟缁撴櫠瀹屽叏婧惰В锛岄叾镙囦华550nm娉㈤暱妫娴嫔惛鍏夊害鍊笺
娉 MTT鍙阃忚繃缁呜优鑶滆繘鍏ョ粏鑳炲唴锛屾椿缁呜优绾跨矑浣扑腑镄勭惀鐝鑴辨阿閰惰兘浣垮栨簮镐MTT杩桦师涓洪毦婧朵簬姘寸殑钃濈传镩茬殑缁撴櫠骞舵矇绉鍦ㄧ粏鑳炰腑锛岀粨鏅剁墿鑳借浜岀敳锘轰筜镰滐纸DMSO锛夋憾瑙o纴鐢ㄩ叾镵斿厤鐤妫娴嬩华娴嫔畾鍏跺厜钖告敹鍊硷纴鍙闂存帴鍙嶆椠缁呜优鏁伴噺銆