为什么液相色谱保留时间改变

⑴ 液相色谱的保留时间总是不稳定，该怎么解决

1、首先考虑是否有堵塞，查看各放溶剂瓶的过滤头是否有脏，脏了后清洗，玻璃的30%稀硝酸泡，不锈钢的可以超声处理。
2、purge阀打开，看看单通道5ml/min流速，用水压力多大，如果超过10bar就要更换purge阀的滤芯了，不过到5bar就比较脏了。
3、清洗下主动阀的滤芯。
4、如果这些都处理了，还是不行，那估计是比例阀的问题了。

压力不稳，出峰时间前后飘，觉得进气泡或者崩头污染的可能性比较大，用脱气过的异丙醇多冲一会试试。
有两种可能,一是流动相里有汽泡,二是检测器里残留有汽泡.
压力不稳这个就不正常，看是是不是有泄漏的地方，或者单向阀，比例阀有问题

纯水和甲醇确实会使保留时间不太稳定的原因是 脱气没有完全，气泡进入单向阀。所以引起了柱压不稳。导致的是基线不稳和流速变化。所以造成了Rt前后不一致。
我认为主要是气泡，用注射器吸满甲醇，拆开单向阀进，出螺母，从入口出打入甲醇，然后出口出会有气泡冒出。即可。

建议您可以到行业内专业的网站进行交流学习！
分析测试网络网乐意为你解答实验中碰到的各种问题，气相、液相、质谱、光谱、药物分析、化学分析、食品分析。这方面的专家比较多，基本上问题都能得到解答，有问题可去那提问，网址网络搜下就有。

⑵ 液相色谱 保留时间推后的原因 有谁知道问题所在呢

色谱分析是贺掘者依靠对比保留时间来进行定性的，保留时间变化超出识别时间范围工作站就无法定性，而保留时间推后的原因是组份在色谱柱中滞留时间变禅薯长了，原因可能如下：
1、色谱柱更换了，更换成具有保留能力更强的柱散闭子，比如粒度变小，柱长变长，填料更换等；
2、流动相类型、比例或者流速变慢，导致对组份的吸附能力更强，流速变慢也会导致组份在柱子时保留时间更长；

⑶ 液相色谱保留时间漂移是什么原因造成的求答案

保留时间漂移的故障排除
保留时间不重现有两种不同的情况：既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下：一色谱柱平衡如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。
流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。二固定相稳定性
固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。
经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。三色谱柱污染保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。
HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。
样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。
避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。
DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。
使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。四流动相组成流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。五疏水坍塌当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱（如
Waters SymmetryShield RP
色谱柱）或非端基封口的色谱柱（如
色谱柱）也可避免发生坍塌。

⑷ 液相调整梯度及ph为什么会改变保留时间

一般来说液相的操作不会导致保留时间的变化。
首先你得保证流动相是同一个。如果换过流动相就没有可槐启比性了，因为配制过程铅败如会有误差的。
第二，你得保证平衡。有的时候色谱柱和缓冲液平衡相对较慢。通常半小时平衡好的，但是有的时候需要一小时。如果没有平衡好就进样了，那么保留时间就会不准确。最好再连续进样几次，看看保留时间的变化趋势。如果逐渐趋于平稳，那么就用最后两次。
第三，观察一枯此下仪器的柱压。有时候仪器压力不稳，可能导致保留时间不对。如果有压力监控最好打开，看看压力的变化趋势。
第四，进样口进样针重新清洗几次。如果残留着一些酸碱溶液的话，混入这次的样品中，pH值可能也会导致保留时间的变化。
出现情况只能慢慢地找原因，一条一条排查看看。

⑸ 影响高效液相色谱组分保留时间因素

色谱柱类型，这是最关键的因素，关系到分离效率的好坏，也关乎各个组分的保留时间；
流动相组成，改变流动相组成，就可以改变流动相的极性(正相、反相色谱)或者流动相的离子比例（离子色谱），从而有效改善不同组分的保留时间；
流动相流速，一般在保证分离度的前提下，流动相流速越快，保留时间越短；
流动相中含盐量，对于某些有机碱或者有机酸来说，调变流动相中含盐量可以有效改变分离效率，从而改变保留时间；
流动相温度，温度越高，保留时间提前。

⑹ 怎样解决液相色谱保留时间的漂移为什么会漂移

保留时间飘移可能的原因有：
1 柱子没有达到平衡；
解决：平衡更长的时间来解决。
2 实验环境温度发生变化；保留时间和温度有很大的关系，一般温度高，出峰快。
解决：这里的温度不仅指柱温，其实还包括流动相温度。柱温一般都有规定，用柱温箱就可以平衡了，但是流动相温度没有规定，很多人不知道也要保持不变。在空调房里做，保持住室温不变，一般会好很多。
3 流动相比例发生变化；
解决：配置时尽量混合均匀；配置时尽量保证比例没有偏离；使用时尽量保证导管接口处不挥发泄漏；长时间不用的要密封，最好废弃不用。
4 长期使用后柱子损耗；
解决：重新，再生柱子，或更换新的。

⑺ 操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些

影响液相色谱保留时间的因素：
1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子，分离度和保留时间往往都会有点差别，所以在操作的时候：a、可以适当调整流动相的比列，如甲醇—水（90:10），如分离效果与保留时间延长，可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成，甲醇就可以换成乙腈，看具体的实际操作而定。
2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别，主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同，但保留时间一般不会相差太大，可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时，一般就调整到室温或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、进样量。进样量大，保留时间往往会延长。
5、输液系统的压力，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，保留时间将会缩短。
具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察，经过调整后才可以的到较好的色谱条件。

⑻ 求助：液相色谱峰保留时间后移，怎么回事

由于不知道是整体后移还是部分后移，我把两个问题都写出来了

保留时间漂移
首先走样之前色谱柱是否平衡好，压力是否稳定，还有，流动相的PH值会影响色谱柱的固定相，必须在范围内，否则固定相可能会溶解，还有就是色谱柱是不是被污染了，强保留组分可能降低或者影响柱效。
及时更换流动相也是必要的，有些流动相会随着时间而改变，影响检测，还有就是如果用的是疏水的色谱柱（如C18），不能用纯水相洗，防止疏水坍塌。
保留时间波动
色谱柱的温度是影响关键，需与室内温度上下波动二度为宜，还有就是流速是否稳定，泵中是否有气泡。是否平衡好，流动相是否不恰当等。