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为什么液相保留时间前后漂移

发布时间: 2023-01-14 14:48:21

㈠ 液相色谱的保留时间总是不稳定,该怎么解决

⑴温度控制不好,向前或向后单向漂移,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定。


⑵流动相组成发生变化,向前或向后单向漂移,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。


⑶流动相未平衡好(如缓冲溶液或离子对试剂,尤其是低浓度的盐溶液),向前或向后单向漂移,需对柱子进行更长时间的平衡。


⑷泵或者管路中有气泡,前后漂移,可通过排气等将气泡赶出。


⑸泵单向阀中的宝石球磨损,造成流动相倒流,压力不稳定,保留时间前后漂移。解决办法是更换部件。


⑹泵比例阀控制失灵,不同流路流动相比例不断变化,保留时间前后漂移。解决方法是更换部件。


⑺泵活塞杆密封垫老化,流动相渗漏。解决办法是换密封垫。


⑻在线混合器混合能力变差,不接梯度测试混合能力,并同手工配置流动相比较。


⑼系统管路有堵塞,引起压力不稳,导致保留时间漂移。


⑽吸滤头堵塞,流动相抽取受阻。清洗或更换吸滤头。


⑾色谱柱样品超载,解决办法是减少进样量。


⑿色谱柱键合的固定相流失,注意流动相pH值在容许范围。


⒀硅胶填料的位点被活化,使用可修饰流动相,加三乙胺或使用碱灭活柱等。

㈡ 液相色谱的保留时间总是不稳定,该怎么解决

1、首先考虑是否有堵塞,查看各放溶剂瓶的过滤头是否有脏,脏了后清洗,玻璃的30%稀硝酸泡,不锈钢的可以超声处理。
2、purge阀打开,看看单通道5ml/min流速,用水压力多大,如果超过10bar就要更换purge阀的滤芯了,不过到5bar就比较脏了。
3、清洗下主动阀的滤芯。
4、如果这些都处理了,还是不行,那估计是比例阀的问题了。

压力不稳,出峰时间前后飘,觉得进气泡或者崩头污染的可能性比较大,用脱气过的异丙醇多冲一会试试。
有两种可能,一是流动相里有汽泡,二是检测器里残留有汽泡.
压力不稳这个就不正常,看是是不是有泄漏的地方,或者单向阀,比例阀有问题

纯水和甲醇确实会使保留时间不太稳定的原因是 脱气没有完全,气泡进入单向阀。所以引起了柱压不稳。导致的是基线不稳和流速变化。所以造成了Rt前后不一致。
我认为主要是气泡,用注射器吸满甲醇,拆开单向阀进,出螺母,从入口出打入甲醇,然后出口出会有气泡冒出。即可。

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㈢ 液相出峰时间漂移是怎么回事

看是什么样的飘移,如果是因为梯度引起的,如果峰型好的话,当然可以正常进行计算,如果是因为仪器本身系统不稳定造成的,那就不能正常进行计算。

㈣ 求助:液相色谱峰保留时间后移,怎么回事

由于不知道是整体后移还是部分后移,我把两个问题都写出来了

保留时间漂移
首先走样之前色谱柱是否平衡好,压力是否稳定,还有,流动相的PH值会影响色谱柱的固定相,必须在范围内,否则固定相可能会溶解,还有就是色谱柱是不是被污染了,强保留组分可能降低或者影响柱效。
及时更换流动相也是必要的,有些流动相会随着时间而改变,影响检测,还有就是如果用的是疏水的色谱柱(如C18),不能用纯水相洗,防止疏水坍塌。
保留时间波动
色谱柱的温度是影响关键,需与室内温度上下波动二度为宜,还有就是流速是否稳定,泵中是否有气泡。是否平衡好,流动相是否不恰当等。

㈤ 怎样解决液相色谱保留时间的漂移为什么会漂移

保留时间飘移可能的原因有:
1 柱子没有达到平衡;
解决:平衡更长的时间来解决。
2 实验环境温度发生变化;保留时间和温度有很大的关系,一般温度高,出峰快。
解决:这里的温度不仅指柱温,其实还包括流动相温度。柱温一般都有规定,用柱温箱就可以平衡了,但是流动相温度没有规定,很多人不知道也要保持不变。在空调房里做,保持住室温不变,一般会好很多。
3 流动相比例发生变化;
解决:配置时尽量混合均匀;配置时尽量保证比例没有偏离;使用时尽量保证导管接口处不挥发泄漏;长时间不用的要密封,最好废弃不用。
4 长期使用后柱子损耗;
解决:重新,再生柱子,或更换新的。

㈥ 液相色谱保留时间漂移是什么原因造成的求答案

保留时间漂移的故障排除
保留时间不重现有两种不同的情况:既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化,如固定相流失(例如通过水解),色谱柱污染(由样品或流动相所致)等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下:一色谱柱平衡如果我们观察到保留时间漂移,首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相,但如果在流动相中加入少量添加剂(如离子对试剂)则需要相当长的时间来平衡色谱柱。
流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上,从而造成保留时间的漂移。应注意:水是很容易污染的流动相成分。二固定相稳定性
固定相的稳定性都是有限的,即使在推荐的PH范围内使用,固定相也会慢慢水解。例如,硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定;长链键合相比短链键合相稳定;烷基键合相比氰基键合相稳定的多。
经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解,如氨基键合相等。三色谱柱污染保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。
HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器,它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是:流动相本身,流动相容器,连接管、泵、进样器和仪器密封垫,以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。
样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分,就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如:配药中的赋形剂,生化样品(如血清)中的蛋白及类脂类化合物,食品样品中的淀粉,环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量,在此情况下,保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取(SPE)等样品前处理方法来去除样品基质的影响。
避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下,找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂,但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物,但蛋白在THF中就不能溶解。
DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。
使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。四流动相组成流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。五疏水坍塌当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时,有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象,这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相,再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱(如
Waters SymmetryShield RP
色谱柱)或非端基封口的色谱柱(如
色谱柱)也可避免发生坍塌。

㈦ 同一原料液相图谱与前个月相比主峰保留时间不一致为什么

你这么说太笼统了,保留时间不一致,那么相差多久算是一致?7min变到8min?还是15min变到18min?一般来说保留时间靠前,变动会比较小。保留时间靠后,变动会比较大。比如保留时间是20min的物质,前后变动2-3min都是正常的。

另外实验仪器和配置过程也会有误差出现。比如换了一根色谱柱。或者同一根色谱柱用着用着老化了,都会导致保留时间的变化。还有流动相,比如反相色谱,有机相加多了,保留时间就会前移。包括水相pH值。尤其是你的流动相里面有离子对试剂,那么影响就更大了。可能多个0.Xg,保留时间就能有很大波动的。这是一个实验的耐用性问题。
有的时候,你的被测物质也会有很大的关系。比如你的被测物质是碱性,那么流动相的pH值稍有变化,可能主峰就会前后漂移的很厉害。具体情况需要具体分析了。

再有,如果是原料液测定,我觉得没有必要太过纠结于保留时间。一般对于保留时间的要求就是:要求被测物质和对照品的保留时间一致,同一天测定保留时间前后不超过1min(有的时候可以放宽到2-3min)
你这个是上个月测定的,如果相差不是太多没有什么问题的。

㈧ 保留时间漂移的原因

保留时间飘移可能的原因有:1柱子没有达到平衡;解决:平衡更长的时间来解决。2实验环境温度发生变化;保留时间和温度有很大的关系,一般温度高,出峰快。解决:这里的温度不仅指柱温,其实还包括流动相温度。柱温一般都有规定,用柱温箱就可以平衡了,但是流动相温度没有规定,很多人不知道也要保持不变。在空调房里做,保持住室温不变,一般会好很多。3流动相比例发生变化;解决:配置时尽量混合均匀;配置时尽量保证比例没有偏离;使用时尽量保证导管接口处不挥发泄漏;长时间不用的要密封,最好废弃不用。4长期使用后柱子损耗;解决:重新,再生柱子,或更换新的。

㈨ 液相色谱峰保留时间后移

若干的可能性,逐个排除:

  1. 如果是保留时间越来越短,可能是色谱柱不耐低pH,固定相有水解,应更换色谱柱,如:Agilent StableBond等;

  2. 如果是保留时间越来越长,可能是系统未平衡——先用纯乙腈冲柱,再用流动相充分平衡;

  3. 如果是保留时间不稳定,且使用的LC是低压多元泵,可能是比例阀闭锁不全,导致其他通道的强洗脱流动相(如乙腈)进入流路——将其他通道换为水,并充分替换;

  4. 如果是保留时间越来越长,可能是压力降低——有泄漏,或流路有气泡。

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