为什么DGGE电泳时间那么长

Ⅰ 胶体越稳定电泳时间约长

不对，胶体电泳速度的快慢与带电粒子的大小、形状、粒表面的电荷数目、溶剂电解质的种类、离子强度、以及PH值、温度和所加的电压等有关。
胶体是一种分散体系的，包含了两种不同状态的物质。一种是分散相，另一种是连续相。分散质的粒子直径在1~100nm范围，介于粗分散体系和溶液之间，是一种高度分散的多相不均匀体系。
电泳意为携带电子，是指分散质粒子在空间匀强电场影响下相对于流体的运动。正电荷粒子(阳离子)的电泳有时被称为阳离子电泳法，而负电荷粒子(阴离子)的电泳有时被称为阴离子电泳。

Ⅱ 凝胶电泳和DGGE的区别

变性梯度凝胶电泳：双链DNA 分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA 片段能够被区分开，但同样长度的DNA 片段在胶中的迁移行为一样，因此不能被区分。DGGE/TGGE 技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上，加入了变性剂（尿素和甲酰胺）梯度，从而能够把同样长度但序列不同的DNA 片段区分开来。一个特定的DNA 片段有其特有的序列组成，其序列组成决定了其解链区域(meltingdomain, MD)和解链行为(melting behavior) 。一个几百个碱基对的DNA 片段一般有几个解链区域，每个解链区域有一段连续的碱基对组成。当变性剂浓度逐渐增加达到其最低的解链区域浓度时，该区域这一段连续的碱基对发生解链。当浓度度再升高依次达到各其他解链区域浓度时，这些区域也依次发生解链。直到变性剂浓度达到最高的解链区域浓度后，最高的解链区域也发生解链，从而双链DNA 完全解链。

Ⅲ 我的样品中加入了甘油，在跑电泳的时候，整个个电泳过程耗费时间太长，跑不下来

需要确认几个方面的原因：
1.是否有未加甘油的样品的电泳结果，对照说明此问题是否由甘油引起。例如marker的结果。
2. 电泳凝胶的配方是否有问题，如果以前也按这个比例成功电泳过，是偶发的情况，很可能是凝胶配制过程中出现问题
3. 电泳过程中，电压和电流与往常相比是否正常？如果发现在同样电压设置下，电流有异常，则一方面要检查电泳缓冲液是否新配，或者是电泳槽是不是有什么放接触不是很好。

甘油由于增加了样品的粘稠度，确实会使得电泳后样品的条带与平常有差异。但是由于所给信息太少，也没有对照说明，只能通过上面的排除法去看有可能是什么原因引起的。

Ⅳ PCR-DGGE是什么

聚合酶链式反应和变性梯度凝胶电泳相结合的方法，通常用来分析样品中微生物菌落构成的多样性！

Ⅳ 大分子量蛋白 电泳时间

大分子量蛋白，电泳时间：

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳根据分子量大小分离蛋白质，分子量小的快，琼脂糖凝胶电泳根据硫酸根与某些蛋白质作用分离蛋白，有可能分子量大的快。

降低蛋白电泳中丙烯酰胺的浓度，低浓度的蛋白电泳胶更有利于大分子量蛋白的分离，延长电泳的时间，即使溴酚蓝指示线已经到底也可以继续电泳一段时间，这样大分子量的蛋白会分得更开。

电泳现象

在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。

Ⅵ DGGE的原理什么,当泳动到与DNA变性所需变性剂浓度一致的凝胶位置时,相对应的DNA发生解链变性,导致电泳迁

DNA发生解链变性时DNA分子的超螺旋结构被破坏,从而导致电泳迁移速率降低
超螺旋结构的DNA分子在凝胶中的迁移速率是最快的

Ⅶ 为什么电泳跑的特别延伸

蛋白质的分子量较大，则电泳时间可以适当延长，以使目的蛋白质有足够的迁移率和其它的蛋白质分开，反之亦然。
跑电泳常见条带问题分析；
一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）：处理办法：待其充分凝固再做实验。
二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）：处理办法：可在两板之间加入适量缓冲液，以排除气泡。
三、区带拖尾：处理办法：加样前离心；选择适当的样品缓冲液，加适量样品促溶剂；电泳缓冲液放置时间过长，重新配制；降低凝胶浓度。
四、区带出现纹理：处理办法：加样前离心，加适量样品促溶剂。
五、鬼带：处理办法：加热煮沸后再添加适量的DTT或Beta巯基乙醇，以补充不足的还原剂；加适量EDTA来阻止还原剂的氧化。
六、溴酚蓝不能起到指示作用：处理办法：更换正确pH值的Buffer，降低分离胶浓度。
七、区带很粗：处理办法：适当增加浓缩胶长度，保证浓缩胶贮液的pH正确（6.8），适当降低电压。
八、电泳电压很高而电流很低：处理办法：电泳槽正确装配。

Ⅷ 变性梯度凝胶电泳(DGGE)实验方法步骤哪里有

在现代遗传学中DNA 序列突变的分析占有十分重要的地位。由于在较大DNA 序列中检测一个细微的突变非常困难，因而现在人们建立了几种方法来解决这一难题。变性梯度凝胶电泳(DGGE)能把长度相同而核苷酸顺序不同的双链DNA 片段分开。这种方法利用了DNA 分子从双螺旋型变成局部变性型时电泳迁移率会下降的现象。不同的DNA 片段发生这种变化所需梯度不同。DGGE 的凝胶中沿电场方向变性剂(甲醛和尿素)含量递增，当DNA 片段通过这种变性剂递增的凝胶时，不同分子的电泳迁移率在不同区域会发生降低。这就可使核苷酸顺序不同DNA 片段分开。此方法可作为测序的初始步骤在杂合个体中分离等位基因。许多研究表明变性递度凝胶电泳分离能力很强，它可以把相差仅1bp 的DNA 片段分开。变性梯度凝胶电泳(DGGE)实验方法步骤，生物帮上面有详细步骤， http://www.bio1000.com/zt/cell/ 细胞生物学,干细胞研究。

Ⅸ PCR-DGGE实验原理和优点是什么

博凌科为-为你解答：变性梯度凝胶电泳（DGGE）是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链，称之为变性。核酸50%发生 变性时的温度称为熔解温度（Tm）。Tm值主要取决于DNA分子中GC含量的多少。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下：温度 50~60 ℃，变性剂0~100%。当一双链DNA片段通过一变性剂浓度呈梯度增加的凝胶时，此片段迁移至某一点变性剂浓度恰好相当于此段DNA的低熔点区的Tm 值，此区便开始熔解，而高熔点区仍为双链。这种局部解链的DNA分子迁移率发生改变，达到分离的效果。Tm的改变依赖于DNA序列，即使一个碱基的替代就 可引起Tm值的升高和降低。因此，DGGE可以检测DNA分子中的任何一种单碱基的替代、移码突变以及少于10个碱基的缺失突变。为了提高 DGGE的突变检出率，可以人为地加入一个高熔点区GC夹。GC夹（GC clamp）就是在一侧引物的5端加上一个30~40bp的GC结构，这样在PCR产物的一侧可产生一个高熔点区，使相应的感兴趣的序列处于低熔点区而 便于分析。因此，DGGE的突变检出率可提高到接近于100%。作为一种突变检测技术，DGGE具有如下的优点：（1）突变检出率高。DGGE的突变检出率为99%以上。（2）检测片段长度可达1kb，尤其适用于 100~500bp的片段。（3）非同位素性。DGGE不需同位素掺入，可避免同位素污染及对人体造成的伤害。（4）操作简便、快速。DGGE一般在24小时内即可获得结果。（5）重复性 好。但是，该方法需要特殊的仪器，而且合成带GC夹的引物也比较昂贵。