电泳时间长了为什么还没有跑出来
① sds-page电泳为什么跑不出蛋白条带连marker的也没有。请高手指教,详细一点。
上样缓冲液混合后进行变性,温度必须要超过95°,时间5—10min,如果没把握,可以处理10min。也有可能是漏胶,制胶时封胶要严,操作不熟练时可以多加一点,待聚合后用去离子水加入电泳槽内,看看是否会漏,如果不会把水倒掉,滤纸吸干后再加入凝胶。加样的问题,加样时注意不要刺破凝胶,以避免样品直接漏出。
② sds-page电泳时蛋白样品没有跑出条带,急求原因
可能有几个原因:
一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)
二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的
三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA?
那么你的蛋白质Marker有没有显示条带?
③ 请教各位,电泳后加样孔很亮,但没有跑出条带是怎么回事啊
DNA片段没有跑出去拉
你在点样的时候砸进了胶板里
片段太长,跑电泳的时间不够胶板的浓度太高等等:)
④ 电泳怎么都跑不出条带
每次电泳时候跑marker了吗?如果marker没有,是胶的问题,可能是核酸染料加少了或者电泳时间过长,染料跑没了。如果marker有,多半是样品的问题。
或者是跑胶时间过长 样品都跑出去
⑤ 为甚sds page电泳的条带都跑下面去了,没有跑开呢(图1)是胶出了什么问题还是加样少了呢
跑的时间太长了,到最后跑到一起了,最好在指示剂到下沿时就停止电泳,或者电压太高,换小点的试试
⑥ 琼脂糖凝胶电泳图上样孔中的条带跑不出来怎么回事
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。
电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷。金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷;非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子,带负电荷。
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在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离(即迁移率)为常数,是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同,或虽所带电荷相同但荷质比不同,在同一电场中电泳,经一定时间后,由于移动距离不同而相互分离。
分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,利用电泳现象使物质分离。胶体有电泳现象,证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同,它们吸附的离子不同,所以带有不同的电荷。
⑦ 看我的PCR扩增产物跑的电泳,其中一个为什么没跑出来,怎么判断DNA模板是不是有问题
电泳图为什么没贴上来?
没跑出来的因素很多。别的都有就这一个没有的话,首先考虑肯定是模板有没有问题。其次机器和试剂还有PCR管是不是够干净或者够稳定。最后考虑有没有加错。
要判断模板有没有问题,你就按照之前的试验方案,就拿这一个样品,做梯度试验,做三四个样就可以了吧,同时拿上次做出来了的做对照。如果这次能出来,就说明模板没问题,是别的原因。如果还没有,就考虑模板有问题了。
⑧ 跑琼脂糖凝胶电泳的时候loading buffer 没跑出去是什么原因
以平板电泳为例,不知你指的是从上下垂直表面跑出去还是指水平跑出去呢?
如果是水平方向的话,那是因为跑的时间没有足够久,一般我们都不会跑那么久让他跑出去的,那样不只浪费时间还影响实验。
如果你是指上下垂直表面的话:是因为跑电泳时候是在一个水平的电场中进行的,电源正负两极之间的电场也是水平方向而不是弯曲的,loading buffer混合的样品中的电子当然也是顺着电场的水平方向移动的,所以呢,它是不会跑出胶外面的。
⑨ 如果样品电泳后很久都没有跑出点样孔,有哪几方面的原因
点样之后放置时间过长,样品已经和电泳液混合起来了,因此,上样量变小,甚至没有,自然就跑不出来。
⑩ 电泳跑的时间长了会出现怎么样的结果
1条带跑到胶外,使得条带损失
2条带扩散变宽变暗。