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分光光度计为什么要校准三种颜色

发布时间: 2022-01-31 04:18:53

1. 分光光度计一般用什么标准溶液校准

一般使用氧化钬玻璃,光谱中性滤光片,或分光光度计专用校准溶液

2. 分光光度计比色时为什么要设置空白管

因为比色分析的定量依据是朗博-比尔定律;仅适用有色物质;测定时要扣除比色皿及其非待测物的吸光度,才能用于朗博-比尔定律;设置空白管,就是得到:扣除比色皿及其非待测物的吸光度的作用。

计算:挥发酸(以醋酸计)%=C×(V1–V2)×0.06×100W6-6有效酸度(pH)的测定,pH值的测定方法有很多,如电位法(pH计法)、比色法及化学法等,常用的方法为电位法及比色法。



(2)分光光度计为什么要校准三种颜色扩展阅读:

常用的目视比色法是标准系列法,通过与一系列标准溶液进行比较来确定样品溶液的浓度。由一组相同的材料,形状,颜色相同的管尺寸;

将一系列不同数量的已知浓度的标准溶液加入到比色管,然后加入等量的显色剂和其他试剂,和其他控制实验条件相同,稀释到相同的体积,从而使一组颜色标准水平逐步深化。

将一定数量待测溶液放入另一个比色管中,在相同条件下显色,并稀释到相同体积。如果被测溶液的色深与标准系列溶液的色深相同,则溶液在两个比色管中的浓度相同。

3. 用分光光度计比色测定时为什么要设空白管

做对比。
分光光度计使用时测定出来的吸光度值或透射比值是相对于一个标准品做空白测出来的,否则测定出来的样品的值是没有依据的。标准品一般是指不含被测物质或和被测样品除了被测物质之外含有一样的组分,以此来做标准,然后被测定样品吸收的单色光与之进行对比得到的测量数据。

比色法(colorimetry)是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。早在公元初古希腊人就曾用五倍子溶液测定醋中的铁

4. 新购紫外分光光度计需要怎么校准还是就只是调T100%和T0%就好了。。在线等啊

按照国家标准跑一边就放心了,GB/T 26798-2011 单光束紫外可见分光光度计 ,如果是是双光束的GB/T26813-2011双光束紫外可见分光光度计

5. 紫外-可见分光光度计实验过程中为什么需用空白试剂校准基线

为了保证测试的准确性。对于双光束分光光度计而言在使用前必须要做基线校正。
系统基线无需经常校正,一般半个月或一个月校正校正一次即可。对有的仪器来说,系统基线校正过于频繁反而会造成基线漂移严重。

6. 红外分光光度计怎么校准

8.1仪器的调整

8.1.1钨灯的更换和调整:

光源灯是易损件,当损件更换或由于仪器搬运后均可能偏离正常位置,为了使仪器有足够的灵敏度,如何正确地调整光源灯的位置则显得更为重要,用户在更换光源灯时应带上手套,以防沾污灯壳而影响发光能量。

光源灯采用12V30W插入式钨卤素灯,更换钨灯时应先切断电源,然后用附件中的扳手旋松钨灯架上的二个紧固螺丝,取出损坏的钨灯,换上钨灯后,将波长选择在550mm左右,开启主机电源开关,移动钨灯上、下、左、右位置,直到成象在入射狭缝上。选择适当的灵敏度开关,观察数字表读数,经过调整至数字表读数为最高即可。最后将二紧固螺丝旋紧。注意:二紧固螺丝为钨灯稳压电源的输出电压,当钨灯点亮时,千万不能短路,否则会损坏钨灯稳压电源电路元件。

8.1.2波长精度检验与校正:采用镨钕滤色片529纳米及808纳米二个特征吸收峰,通过逐点测试法来进行波长检定与校正。本仪器的分光系统采用光栅作为色散元件,其色散是线性的,因此波长分度的刻度也是线性的。当通过逐点测试法记录下的刻度波长与镨钕滤色片特征吸收. 波长值超出误差,则可卸下波长手轮,旋松波长刻度盘上的三个定位螺丝,将刻度指示置特征吸收波长值,误差范围(≤±2nm),旋紧三个定位螺丝即可。

8.1.3吸光度精度的调整:选择开关置于"T",调节透过率"00.0"和"100.0"后,再将选择开关置于"A", 旋动"吸光度调零"旋钮,使得显示值为".000"。将0.5A左右的滤光片(仪器附)置于光路,测的其吸光度值。选择开关置于"T", 测的其透过率值,根据A=lg1/T计算出其吸光度值。如果实测值与计算值有误差,则可调节"吸光度斜率电位器",将实测值调整至计算值,两者允许误差为±0.004A。

7. 分光光度计的校正

在实验室工作中,验收新仪器或仪器使用一段时间后都要进行波长校正和吸光度校正。建议采用下述较为简便、实用的方法进行校正。

镨玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰,可用来校正分光光度计的波长标尺,前者用于可见光区,后者对紫外和可见光区都适用。K2CrO4标准溶液用来校正吸光度标度,即0.0400g K2CrO4溶解于1 L的0.05mol·L-1KOH溶液中制成标准溶液。于1cm光程的吸收池中,在25℃时用不同波长测得的吸光度值见表4.1。

表4.1 铬酸钾溶液的吸光度

8. 求紫外分光光度计的校正步骤

校正吸光度常用一很纯物质 一定浓度的溶液为标准,且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对,为了使标准液吸光度不受测定波长的微移动而有改变,常选择具有较平滑吸收高峰的物质。

同时要求溶液稳定,且在相当的波长范围内吸收度的改变符合Beer-Lambert定律,常用硫酸铜、硫酸铵钻和硝酸钠或钾的溶液。铬酸钾溶液是最常用的标准溶液,此溶液在紫外区和可见区均适用。

校正波长或波数

可用具有窄吸收带的溶液,滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时,可用放电灯泡发射的射线来校正。有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。

苯的蒸气对校正一定范围的波长亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,测其吸收波长,在远紫外区可用氧气的吸收带进行校正。用各种稀土金属的滤光片,可以很快地校正波长,但准确度不如上述方法高。常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。

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日常维护
一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。

维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室,配置恒温设备,特别是地处南方地区的实验室。

二、环境中的尘埃和腐蚀性气体亦可以影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性,也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁,保障环境和仪器室内卫生条件,防尘。

9. 分光光度计的原理是什么

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。 QS认证专用指定分光光度计 而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式: A=-log(I/I。)=-lgT=kLc 式中:A 为吸收度; I。为入射的单色光强度; I 为透射的单色光强度; T 为物质的透射比; k 为吸收系数; L 为被分析物质的光程 c 为物质的浓度 物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。 分光光度计的简单原理 分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

10. 紫外分光光度计如何校正

分光光度计关于操作误差,多数情况下,通过严格按操作程序测量、仪器调零、准确称量等来控制或减少这种误差的产生。关于仪器的系统误差,可通过对分光光度计的定期校正来克服,若所需准确度很高的测量,则必须天天校正。 1.配制60mg/L的重铬酸钾溶液 在天平上称取已干燥的重铬酸钾60mg,准确至+-0.1mg。放在烧杯中,用适量蒸馏水溶解,并加入1ml(0.1mol/L)的高氯酸。然后转移到1000ml的容量瓶中,在蒸馏水稀释至刻度。 2.浓度为60mg/L的重铬酸钾溶液在各温度下的投射比(光谱宽度为2nm) 波长235350(nm)温度(℃) 1018.022.6 1518.022.7 2018.122.8 2518.222.9 3018.322.9 3.要有可见中性虑光片(其透过比为10%,20%,30%准确度优于+-0.2%) 4.要有投射比配对误差不打鱼0.1%的石英吸收池一对 5.投射比准确度+-0.5%,重复度+-0.5% 6.光谱宽度为2nm,按要求校正仪器零点。高氯酸盛于10mm厚的石英吸收池中,调投射比为100%,将经标定过的重铬酸钾盛于另一石英吸收池中,置于光浴,按步骤2提供的数据每个波长测试三遍,三次平均值与标准值之差为其可见光区透射比的准确度。三次测量的最大值和最小值之差为可见光区的重复性。

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