血涂片为什么中间颜色淡

① 在显微镜下观察血涂片时，发现红细胞中央是白色，为什么(速求！）

红细胞的颜色是血红蛋白染的。红细胞呈圆盘形，中间下洼，因此较薄，可容纳的血红蛋白较少，所以颜色浅；周边较厚，容纳的血红蛋白多，所以颜色较红。缺铁时，每一红细胞所含的血红蛋白较少，仅周围一圈红色，中间有大片无色透明的区域，故称为环状红细胞。附图为缺铁红细胞。

② 血涂片的血涂片-注意事项

1) 玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1小时,然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面;,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。
2) 细胞染色对氢离子浓度十分敏感,在染色过程中玻片必须化学清洁,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。
3) 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。
4) 血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分干燥.
5) 染色时间与染液浓度,室温高低,细胞多少有关.染液越淡,室温越低,细胞越多,所需染色时间越长或应适当增加染液量,因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染,摸索最佳染色条件.
6) 染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.
7) 冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液,以免染料沉着于血片上.
8) 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染,必须复染时,可将染液先稀释好再复染.
9) 染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.

③ 缺铁性贫血血涂片见红细胞体积________________,中央淡染区____________。

体积偏小，中心淡染区扩大。
当机体对铁的需求与供给失衡，导致体内贮存铁耗尽（ID），继之红细胞内铁缺乏（IDE），最终引起缺铁性贫血（IDA）。IDA是铁缺乏症（包括ID，IDE和IDA）的最终阶段，表现为缺铁引起的小细胞低色素性贫血及其他异常。IDA是最常见的贫血。其发病率在发展中国家、经济不发达地区及婴幼儿、育龄妇女明显增高。

④ 如果血涂片染色深或浅,应当怎么样进行纠正

1.血涂片颜色染色过深：

原因：染色时间过长、染色液过多导致。现象可能如下偏蓝或者偏红：

颜色太浅

建议调整染色时间、配液比例、涂片厚薄、冲洗时间等再进行测试确认。

⑤ 怎么制作血涂片

血常规是医院常作的检查项目，但是由于大部分的医院用的都是三分类的血球仪（五分类血球仪价格太高），在分析上存在一定的缺陷，而血涂片则能在一定程度上很好的补偿，使得三分类的血球仪也能起到五分类的效果。而且血涂片的作用还不仅于此，它还能更直观的放映细胞的形态，以及血液的一种状态。现在就血涂片的制作和应用做一个介绍。

血涂片的制作：

血涂片的制作方法很多，但需要的材料也都是一样的，载玻片和（或）盖玻片。现在介绍一种我们医院常用的涂片方法：

1、首先左手持一载玻片，将采到的血（做血常规剩下的血）滴一滴到载玻片一端：

细胞分类计数器

（细胞分类计数器）

通过这样的方法，我们就可以得到白细胞下各个种类的比例，结合血常规的白细胞数目就可以得到一个五分类的项目，这对于分析动物的身体状况更加的全面和科学。如上图的结果是：嗜中性粒细胞百分比：70%（分叶：57%，杆状：13%）；淋巴性细胞百分比：25%；单核细胞百分比：3%；嗜酸性粒细胞百分比：2%；嗜碱性粒细胞百分比：0。

再简单举例说一下血涂片在临床上的应用，也是结合血常规的分析。如下图为一只犬的血常规结果：

从结果上看，RBC(红细胞)下降，HGB(血红蛋白)下降，HCT（红细胞压积）下降。很明显的可以判定为贫血。但是贫血也分很多种的，到底是否为再生性，又或者是否是出血或溶血造成的。然后根据血涂片可以知道：

从该血涂片我们可以看到，红细胞中间淡然区明显扩大，说明了这是正红细胞低色素性贫血，也就是由于缺铁性贫血，需要补充铁元素，增强营养。一方面我们知道动物的具体情况，可以针对性的帮助解决问题。

当然，血涂片在临床上的作用不仅仅如此，我们不仅可以用来来计数分类白细胞，还可以观察红细胞的形态来判断如果出现异性红细胞的原因，白细胞形态异常的原因，还可以看到血液寄生虫如：巴贝斯焦虫，血吸虫的微丝蚴。而且对于血常规仪器还可以起到一种验证的作用，就是说如果血常规的结果与你在显微镜下看到的结果出入较大的时候，如果你保证你血涂片的制作和观察都没问题的话，就要怀疑机器的判读有问题了。比喻抽血过程比较慢，导致血凝的出现而使得机器读书的血小板极低，以及由于猫的血小板和红细胞体积较近而出现的判读等都可以用血涂片来纠正和验证。

⑥ 血涂片好坏的标准及影响因素

1) 玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1小时,然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面;,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。
2) 细胞染色对氢离子浓度十分敏感,在染色过程中玻片必须化学清洁,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。
3) 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。
4) 血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分干燥.
5) 染色时间与染液浓度,室温高低,细胞多少有关.染液越淡,室温越低,细胞越多,所需染色时间越长或应适当增加染液量,因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染,摸索最佳染色条件.
6) 染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.
7) 冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液,以免染料沉着于血片上.
8) 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染,必须复染时,可将染液先稀释好再复染.
9) 染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.

⑦ 观察血涂片时,我们会发现红细胞周围颜色深中间颜色浅,这是为什么

因为红细胞中间比较薄，周围比较厚。是个碟子形状。

⑧ 正常人的血涂片中可以见到哪种细胞

血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，应用极广。特别是对各种血液病的诊断有很大价值。但血片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。例如，血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘；染色良好的血片是血液学检查主要基本技术之一。

血涂片
瑞氏染色法原理
1. 瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料。
美蓝(又名亚甲蓝mehyleneblue)为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构,通常为氯盐,即氯化美蓝，美蓝容易氧化为一,二,三甲基硫堇等次级染料(即天青)市售美蓝中部份已被氧化为天青.伊红(又名曙红cosin)通常为钠盐即伊红化钠。美蓝和伊红水溶液混合后产生一种憎液性胶体伊红化美蓝中性沉淀,即瑞氏染料。瑞氏染料溶于甲醇后,又重新解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。2.细胞的染色既有物理的吸附作用又有化学的亲和作用.各种细胞和细胞的各种成份化学性质不同对各种染色料的亲和力也不一样.因此用染色液染色后在同一血片上可以看到各种不同的色彩,例如血红蛋白嗜酸性颗粒为碱性蛋白质与酸性染料伊红结合染粉红色称为酸性物质,细胞核蛋白和淋巴细胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染蓝色或紫色称为嗜碱性物质,中性颗粒成等电状态与伊红和美蓝均可结合,染紫红色称中性物质.

血涂片
实验材料
3.1实验材料：医用采血针、酒精棉球、载玻片、血推片、消毒牙签
3.2实验试剂：瑞氏染液、抗B血清、抗A血清、生理盐水、蒸馏水
3.3仪器设备：Motic光学显微镜
实验步骤
4.1ABO血型鉴定
4.1.1取一块清洁玻片，用记号笔标上记号。
4.1.2用小滴管吸A型标准血清（抗B）一滴加入左侧，用另一小滴管吸B型标准血清（抗A）一滴加入右侧
4.1.3以穿刺法自左手无名指指尖取血，在玻片的每侧各放入一小滴血，用牙签搅拌，使每侧抗血清和血液混和。每边用一支牙签，切勿混用。
4.1.4静置室温下10—15min后，观察有无凝集现象，并据此判断血型。
4.2血涂片的制作及血细胞观察
4.2.1取末捎血一滴置于玻片的一端,左手持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，血滴即沿推片散开。然后便推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一薄层血膜
4.2.2血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动,使血膜迅速干燥,以免血细胞皱缩.
4.2.3用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液溢出,然后将血膜平放在染色架上.加瑞氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜,固定0.5-1.0分钟.滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水,与染料混匀染色5-10分钟.
4.2.4用清水冲去染液,待自然干燥后或用吸水纸吸干,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。
4.2.5白细胞分类计数。
选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数100个红细胞,按其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值。
瑞氏染液:瑞氏染料1g加甲醇(AR)600ML。将瑞氏染料放在清洁干燥乳钵中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解.将已完全溶解的部分倒入棕色试剂瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解于甲醇为止。新配制的染料偏碱,须在室温和37℃下一定时间待染料成熟,主要美蓝逐渐增多为天青B后才能使用.贮存时间越久染色效果越好,因此,Deamgilliland等采用吸光度比值(rA)作为瑞氏染料的质量规格.rA测定方法如下:取瑞氏染液15-25ul(视染液浓度而定)加甲醇10ml稀释,混匀后以甲醇为空白管分别以波长650nm,525nm比色,rA=A650/A525。
因为美蓝吸收峰为波长650nm,伊红吸收峰波长为525nm,天青B吸收峰也为650nm,但吸光度A约为美蓝的一半.所以新配制染料的RA接近2,随着美蓝逐渐氧化为天青B,RA也相应下降,RA下降达1.3±0.1即可使用.瑞氏染料在贮存过程中必须塞严,以防甲醇挥发和氧化为甲酸.有人主张配方中加入30ml甘油,防止甲酸挥发,并可使细胞染色清晰.甲醇必须纯净,如甲醇中丙酮含量过多,染色偏酸,使细胞着色不良。磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8)：磷酸二氢钾0.3g加磷酸氢二钠0.2g再加蒸馏水至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整PH,如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。
正常参考值
细胞类别成人
杆状核0.01-0.05
分叶核0.50-0.70
嗜酸性粒细胞0.005-0.05
嗜碱性粒细胞0-0.01
淋巴细胞0.20-0.40
单核细胞0.03-0.08
附注
1要避免重复计数,玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈曲线移动.
2白细胞总数超过20×109/L,应分类计数200个细胞,白细胞数明显减少的血片,可检查多张血片。
注意事项
1) 玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1小时,然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面;,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。
2) 细胞染色对氢离子浓度十分敏感,在染色过程中玻片必须化学清洁,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。
3) 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。
4) 血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分干燥.
5) 染色时间与染液浓度,室温高低,细胞多少有关.染液越淡,室温越低,细胞越多,所需染色时间越长或应适当增加染液量,因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染,摸索最佳染色条件.
6) 染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.
7) 冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液,以免染料沉着于血片上.
8) 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染,必须复染时,可将染液先稀释好再复染.
9) 染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.
染色结果
在正常情况下血膜外观为粉红色，在显微镜下红细胞呈肉红色；白细胞胞浆能显示各种细胞的特有色彩，细胞核染紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辨。染色结果偏酸，则红细胞和嗜酸性粒细胞颗粒偏红，白细胞核呈浅蓝色或不着色；染色结果偏碱，则所有细胞染成灰蓝色，颗粒深暗，嗜酸性颗粒可染成暗褐色，甚至紫黑色或蓝色。嗜中性颗粒偏粗，偏碱(紫黑色).血片原处呈绿色.

⑨ 为什么显微镜观察血细胞是要染色

染色的目的是使细胞的主要结构,如细胞质、细胞核、细胞器等染上不同的颜色,便于显微镜下观察.
血细胞又称“血球”,主要含下列三个部分：红细胞、白细胞、血小板.
红细胞呈双凹圆盘状,中央较薄,周缘较厚,故在血涂片标本中呈中央染色较浅、周缘较深,无细胞核.白细胞显色各异,如中性粒细胞的胞质染成粉红色,含有许多细小的淡紫色及淡红色颗粒；嗜酸性粒细胞染成桔红色；嗜碱性粒细胞着色较浅.血小板是红骨髓巨核细胞细胞质的脱落物,本身不是细胞.在血涂片中,血小板常呈多角形,聚集成群.血小板中央部分有着蓝紫色的颗粒,称颗粒区（granulomere）；周边部呈均质浅蓝色,称透明区（hyalomere）.
【瑞氏染色结果】在正常情况下,血膜外观染成淡紫红色.显微镜下,红细胞呈粉红色,在厚薄均匀处,略有碟状感；白细胞浆中颗粒清楚,并显示出各种细胞特有的色彩.细胞核染紫红色,核染色质结构清楚.
染色偏酸,则红细胞和嗜酸性粒细胞颗粒偏红,白细胞核呈淡蓝色或不着色.染色偏碱,则所有细胞呈灰蓝色,颗粒深暗.嗜酸性颗粒可染成暗褐色,甚至紫黑或蓝色.中性颗粒偏粗、偏碱,染成紫黑色,血膜厚的部位呈绿色.

⑩ 血涂片中红细胞大小不等以小细胞为多中央淡染区扩大是什么病

这种情况多见于缺铁性贫血或者营养不良性贫血，导致红细胞发育不良，细胞内血红蛋白减少。可以尝试补充铁剂和多吃蛋白质类食品进行治疗。当然，贫血的原因有很多，如果通过铁剂不能有效改善，那么还需要进行详细的贫血原因检查。