测脯氨酸为什么下层水相有颜色
1. 植物体内游离脯氨酸含量的测定注意事项
植物组织中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作为抗寒育种的生理指标。
一 实验试剂：3%磺基水杨酸：1.5g定容到50ml；
2.5%酸性茚三酮（4℃下2到3天有效）：冰乙酸：6mol/LH3PO4=3：2
例：1.25g溶到30ml冰乙酸和20ml6mol/LH3PO4中。
6mol/LH3PO4 16ml H3PO4溶到50ml水中
脯氨酸标准溶液：称取25mg脯氨酸，蒸馏水定容到250ml，其浓度为100μg/ml,再取此液10ml用水稀释至100ml,即为10μg/ml的脯氨酸标准液。
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二 标准曲线的制作：
1，取7支具塞刻度试管，按下表加入各试剂，混匀后加玻璃球塞，在沸水中加热 40分钟；
2，取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分震荡，以萃取红色物质，静置待分层后，吸取甲苯层以“0”管为对照在波长520nm下比色；
3，以消光度为纵坐标，脯氨酸含量为横坐标，绘制标准曲线，求线性回归方程。
管号 0 1 2 3 4 5 6
标准脯氨酸量（ml） 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0
H2O 2 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0
冰乙酸（ml） 2 2 2 2 2 2 2
酸性茚三酮（ml) 3 3 3 3 3 3 3
脯氨酸含量（μg） 0 2 4 8 12 16 20
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三 样品测定：
1，脯氨酸提取：取混匀剪碎叶片0.2到0.5g，分别置于大试管中，加入5ml 3%磺基水杨酸，加盖，沸水浴中浸提10分钟；
2，取出试管待冷却至室温后，吸取2ml上清液，加2ml冰乙酸和3ml 2.5%酸性茚三酮，于沸水浴中加热40分钟，接着按标准曲线制作方法进行甲苯萃取和比色。
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四 计算：
脯氨酸（μg/g）=XV/(W*A)
X——待提取液中脯氨酸含量（μg），由标准曲线求得；
V——提取液总体积（ml）；
W——样品重（g）；
A——测量时吸取的体积（ml）
2. 为什么脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物质，而其他氨基酸却是生成蓝紫色物质
原因：与水合茚三酮反应时，所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽都产生蓝紫色，但脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质，因其α-氨基被取代，所以产生不同的衍生物。
反应原理：α-氨基酸与水合茚三酮一起在水溶液中加热，可发生反应生成蓝紫色物质。氨基酸被氧化分解，放出氨和二氧化碳，氨基酸生成醛，水合茚三酮则生成还原型茚三酮。在弱酸性溶液中，还原型茚三酮、氨和另一分子茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质。
(2)测脯氨酸为什么下层水相有颜色扩展阅读
1、反应机理：除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应生成黄色物质外，所有的α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。该反应分两步进行：
（1）氨基酸被氧化，产生二氧化碳 、氨气和醛，而水合茚三酮被还原成还原型茚三酮。
（2）所生成之还原型茚三酮与另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质。
反应的适宜pH为5～7，同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同，酸度过大时甚至不显色。
2、脯氨酸（Proline，缩写为Pro 或P），α-亚氨基酸，水中溶解度比任何氨基酸都大，25℃时100g水中可溶162g左右。一旦进入肽链后，可发生羟基化作用，从而形成4-羟脯氨酸，是组成动物胶原蛋白的重要成分。
3. 为什么脯氨酸会显示不同的颜色
你好，因为在不同环境下，发生不同的反应，产生不同的物质
4. 测脯氨酸含量时用甲苯萃取的红色物质应该在上层吗
应该就说明主成分是水溶性的吧
5. 我羟脯氨酸标准曲线的时候，加显色剂之后，有的试管有黄色油滴状液体，怎么办呀！
我不太清楚 ，不过你可以到 《工标网》 到那查询你的标准号和关键字，工标网的标准录入量很大，听说有十几万条标准，到工标网找标准也很方便，听说是采用智能化搜索引擎，你只要输入标准号就可以轻松找出相关的标准！
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6. 氨基酸和茚三酮的显色反应 会有三种不同颜色的原因
是因为氨基酸的种类不同。反应成紫色的是亮氨酸，反应成黄色的是赖氨酸，亮氨酸和赖氨酸混合溶液与茚三酮反应为棕色。
7. 脯氨酸的理化性质
外观与性状：白色结晶或结晶性粉末或无色针状结晶，含一个结晶水。微臭，味微甜。
熔点：210-220°C。
比旋度：-84.5°至-86.0°。
潮解性：有潮解性。
溶解性：该品在水中易溶，在乙醇中溶解，难溶于丙酮和氯仿在乙醚或正丁醇中不溶。
储存：遮光，密封保存。
等电点（pI）：6.30 可从乙醇/乙醚中得到无色针状结晶，从水中得到斜方晶，有强甜味，与水合茚三酮试液反应呈黄色，但被冰醋酸酸化后呈红色，与硫氰酸铵反应产生难溶性盐。
注*：其中N的化合价为+5。 S24/25Avoid contact with skin and eyes.
避免与皮肤和眼睛接触。 R36/37/38Irritating to eyes, respiratory system and skin.
刺激眼睛、呼吸系统和皮肤。 方法名称：脯氨酸的测定——电位滴定法
应用范围：该方法采用滴定法测定脯氨酸的含量。该方法适用于脯氨酸。
方法原理：供试品加冰醋酸溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，记录高氯酸滴定液的使用量，计算，即得。
试剂：
⒈ 水（新沸放置至室温）
⒉ 高氯酸滴定液（0.1mol/L）
⒊ 冰醋酸
⒋ 基准邻苯二甲酸氢钾
⒌结晶紫指示液
⒍醋酐
⒎ 醋酸汞试液
试样制备：
① 高氯酸滴定液（0.1mol/L）
配制：取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐23mL，边加边摇，加完后再振摇均匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时。若所测供试品易乙酰化，则须用水份测定法测定本页的含水量，再用水和醋酐调节至本液的含水量为0.01%-0.2%。
标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g，精密称定，加无水冰醋酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度，即可。
贮藏：置棕色玻璃瓶中，密闭保存。
②结晶紫指示液
取结晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解，即得。
操作步骤：精密称取供试品0.1g，加冰醋酸50mL溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，记录消耗高氯酸滴定液的体积数（mL），每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于11.51mg的脯氨酸（C5H9NO2)，即得。
注1：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一，“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
参考文献：中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.657。 酸度测定：取该品2.0g，加水20ml溶解后，依法测定，pH值应为5.9～6.9。
溶液透光度测定：取该品1.0g，加水10ml溶解后，照分光光度法，在430nm的波长处测定透光率，不得低于98.0%。
氯化物检验：取该品0.25g，依法检查，与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。
硫酸盐检验：取该品1.0g，依法检查，与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。铵盐取该品0.1g，依法检查，与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.02%）。
其他氨基酸检验：取该品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加水稀释成每1ml中含0.25mg的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－无水乙醇－浓氨溶液－水（8:8:1:3）为展开剂，展开后，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液（1→50），在80℃干燥约10分钟，立即检视，供试品溶液所显杂质斑点的颜色，与对照溶液的主斑点比较，不得更深（0.5%）。干燥失重取该品，在105℃干燥3小时，减失重量不得过0.3%。
炽灼残渣：不得过0.1%。
铁盐检验：取该品1.0g，依法检查，与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。重金属取该品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，依法检查，含重金属不得过百万分之十。
砷盐检验：取该品2.0g，加盐酸5ml与水23ml溶解后，依法检查（附录Ⅷ J第一法），应符合规定（0.0001%）。
热原检验：取该品，加氯化钠注射液制成每1ml中含45mg的溶液，依法检查（附录Ⅺ D），剂量按家兔体重每1kg注射10ml，应符合规定（供注射用）。
该品为吡咯烷-2-羧酸。按干燥品计算，含C5H9NO2不得少于98.5%。
8. 测定植物体内脯氨酸含量
脯氨酸可以参与植物体内渗透调节，增大细胞内生物大分子对水的亲和力，提高植物的抗旱性。抗旱性较强的植物往往积累较多的脯氨酸，如果在相同实验条件下，小麦更容易萎蔫就是该植物抗旱性不足，所以脯氨酸含量低于正常小麦是有可能的。
至于 要用干重计算是因为植物体内的脯氨酸与含水量有很大关系，实验证明脯氨酸会在植物复水过程中含量迅速下降。
之前学习414农学类联考的时候听老师讲过，学得不精希望能帮到你。知网上有很多关于脯氨酸与植物抗逆性的文章，想要详细的可以去看看。