为什么革兰氏染色颜色不同
‘壹’ 革兰氏染色为什么能将细菌分为两大类
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因此细菌仍保留初染时的颜色,呈现蓝紫色。
‘贰’ 为什么革兰染色会行成两种不同的颜色其机制是什么
细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它溶解,所以染色的前二步结果是一样的,但在G+细胞中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘的复合物分子太大,不能通过细胞壁,保持着紫色。在Gˉ细胞中,乙醇处理不但破坏了胞壁外膜,还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜,于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来,当再用衬托的染色液复染时,显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,红色显示不出来。
原理:
①革兰氏阳性细菌的细胞壁
G+细菌细胞壁具有较厚(20-80nm)而致密的肽聚糖层,多达20层,占细胞壁成分的60%~90%,它同细胞膜的外层紧密相连(图2-9)。有的G+细菌细胞壁中含有磷壁酸(teichoic-acid),也称胞壁质(murein),它是甘油和核糖醇的聚合物,磷壁酸通常以糖或氨基酸的酯而存在。由于磷壁酸带负电荷,它在细胞表面能调节阳离子浓度。磷壁酸与细胞生长有关,细胞生长中有自溶素(autolysins)酶类起作用,磷壁酸对自溶素有调节功能,阻止胞壁过度降解和壁溶。
如果细胞壁的肽聚糖层被消溶,G+细胞成为原生质体(protoplasts),细胞壁不复存在,而只存留细胞膜。除链球菌外,大多数G+细菌细胞壁中含极少蛋白质。
②革兰氏阴性细菌的细胞壁 Gˉ细菌细胞壁比G+细菌细胞壁薄(15~20nm)而结构较复杂,分外膜(outer membrane)和肽聚糖层(2~3nm)。在细胞壁和细胞质膜之间有一个明显的空间,称为壁膜间隙(periplasmic space)。
外膜 Gˉ细菌细胞壁外膜的基本成分是脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),它同细胞质膜相同之处也是双层类脂,但除磷脂外还含有多糖和蛋白质。
LPS的多糖部分包括核心多糖和O-特异多糖。O-特异多糖由重复分支的碳水化合物分子组成,含有已糖(葡萄糖、半乳糖和鼠李糖)和二脱氧已糖。由于糖的种类不同,使各种Gˉ细胞具有不同特性的LPS。核心多糖(core polysaccharide)的主要组分是酮脱氧辛酸(ketodeoxyoctonate, KDO)。
外膜中还含有几种蛋白,如脂蛋白、通透蛋白。有些蛋白具有通孔作用(porin),调控外界分子进入细胞;有的蛋白分子可以作为噬菌体的受体;许多G-细菌对高等生物有致病性是由LPS的成分决定的,它的毒性组分常称为内毒素(endotoxins)。
肽聚糖层 Gˉ细菌细胞壁的肽聚糖层很薄,在大肠杆菌和其它细菌中仅有单
层。肽聚糖层和外膜的内层之间通过脂蛋白连接起来。
壁膜间隙 Gˉ细菌细胞壁的外膜与细胞质膜之间存在明显的壁膜间隙,一层薄的肽聚糖处于其间,肽聚糖层和细胞质膜之间的间隙较宽,肽聚糖层至外膜之间的间隙较窄。大肠杆菌的壁膜间隙宽度为12~15nm,呈胶胨态。其间含有三类蛋白质:水解酶,催化食物的初步降解;结合蛋白,启动物质转运过程;化学受体(chemoreceptors),在趋化性中起作用的蛋白。
‘叁’ 细菌的革兰染色性不同是由于
细菌的革兰染色性不同是由于细胞壁结构不同。
革兰氏染色(Gram Staining)是用来鉴别细菌的一种方法:这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同,可将细菌分成两类,即革兰氏阳性(Gram Positive)与革兰氏阴性(Gram Negative)。
这一染色方法由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系,后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一,对由细菌感染引起的疾病的临床诊断及治疗有着广泛用途。
临床意义
1、鉴别细菌。
2、选择药物。
3、与致病性有关:革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素;而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖,两者的致病作用不同。
‘肆’ g 细菌g-细菌为什么颜色不同原理是什么
革兰氏染色原理:
G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。
Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。
‘伍’ 为何通过革兰氏染色可以呈现不同的颜色
因为不同细胞表面的结构不同。革兰氏阴性菌有两层细胞质膜,细胞壁在两层膜之间;而革兰氏阳性菌只有一层细胞质膜,细胞壁位于外表面。而且细胞质膜上的蛋白质,糖,脂肪的含量也不同,革兰氏阴性菌细胞质膜表面含较多脂多糖。
‘陆’ 革兰氏染色的原理是什么他是怎么把革兰氏阳性菌和阴性均染成不同颜色 的
革兰氏染色原理是通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌遇乙醇或丙酮脱色处理时,不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌在遇脱色剂后,呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。其中,染色的差异主要是阴性与阳性细菌细胞壁的差异所引起的。
‘柒’ 微生物 为什么革兰阳性菌染色成紫色,而革兰阴性菌染色成红色
因为第三步骤酒精脱色时间太短,革兰氏阴性菌脱色不到位,导致在显微镜下革兰氏阴性菌被判断为革兰氏阳性。酒精脱色是非常重要的一步,也是革兰氏染色成功与否的关键。
革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色,成为紫色;
而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态,细胞壁孔径大,不能阻止溶剂透入,因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。
(7)为什么革兰氏染色颜色不同扩展阅读:
革兰氏阳性细菌:金黄葡萄球菌、链球菌、肠球菌、利斯特菌等
革兰氏阴性杆菌:克雷白杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、沙门氏菌等
无论阳性菌还是阴性菌都有杆菌和球菌。葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌是临床最为常见的病原菌,葡萄球菌属于革兰阳性球菌,大肠杆菌属于革兰阴性菌中的肠杆菌科,除大肠杆菌以外,临床较常见的肠杆菌科细菌还有变形杆菌、沙门氏菌、克雷白杆菌;绿脓杆菌属于假单胞菌,为非发酵菌,是临床常见的较耐药革兰阴性杆菌。
‘捌’ 细菌经革兰氏染色法后,为什么有的是呈紫色,有的却是红色
这是跟细菌的细胞壁的结构和它的成分有关。
对于革兰氏阳性菌,它的细胞壁比较厚、肽聚糖含量高和其交联较紧密,故遇乙醇时,肽聚糖的网孔因失水而收缩,再加上它不含类脂,不能在壁上溶出空隙,细胞壁里的结晶紫和碘的复合物不被溶解,所以呈现紫色;
而革兰氏阴性菌的壁较薄,肽聚糖含量少,交联松散,故遇乙醇后肽聚糖网孔不易收缩,加上含类脂物质较多,乙醇将类脂物质溶解,壁上出现较大的空隙,乙醇进入到细胞壁内溶解结晶紫与碘的结合物,细胞呈无色,再经番红等红色染料进行复染,细胞获得了一层新的颜色——红色。
所以经过革兰氏染色法能够分辨出那些是阳性菌,那些是阴性菌。
‘玖’ 革兰染色法和美蓝染色法对细菌染色后有啥不同
1、颜色不同:革兰氏阳性菌为紫色,革兰氏阴性菌经沙皇等红黄燃料染色后呈现粉色或红色,因此在操作时要注意区分。
2、概念不同:美蓝又叫亚甲基蓝,美蓝(亚甲基蓝)染色法就是用美蓝染色液对细菌进行染色以便进行显微镜检查的染色法,属于单染色法。经染色的菌体呈蓝色,与革兰染色法是不同的。
3、操作过程不同:革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。细菌先经碱性染料结晶紫染色,而后经碘液进行媒染,之后用酒精脱色,与美兰操作过程及使用工具是有不同之处的。
(9)为什么革兰氏染色颜色不同扩展阅读:
常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚膜染色、死活染色。制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤,用显微镜甚至油镜观察。
革兰染色法脱色后再用碱性蕃红进行复染,阳性菌仍为紫色,阴性菌染成红色,这就是革兰氏染色的原理。其步骤包括初染、媒染、脱色、复染四个步骤。
除此之外在革兰氏染色法涂片染色时,革兰氏阳性菌的芽孢呈现无色。虽然芽孢在革兰氏染色片中可以看到,但在不易清晰观察时,可用特殊的芽孢染色法,使芽孢与菌体呈现不同颜色。