茚三酮反应为什么蛋白质颜色深
① 茚三酮显色机理是什么
茚三酮是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。当与这些游离胺反应时,能够产生深蓝色或者紫色的物质,叫做Ruhemann紫。
茚三酮常用来检测指纹,这是由于指纹表面所蜕落的蛋白质和肽中含有的赖氨酸残基,其上的一级胺被茚三酮检测。在室温条件下,它是一种白色的固体物质,溶于乙醇和丙酮。茚三酮可以看作是是二氢茚-1,2,3-三酮的水合物。
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应用领域
茚三酮可以用来监测固相肽合成中的脱保护作用(Kaiser测试)。肽链通过C端与固相基质连接,利用N端扩展肽链,当N脱保护后,茚三酮测试呈蓝色。
氨基酸残基是在N端被保护的情况下接入肽链的,因此如果下一个氨基酸残基成功的连接到肽链上,茚三酮测试会给出无色或者黄色的结果。
茚三酮也可以用于蛋白质的氨基酸分析。除去脯氨酸之外的大多数氨基酸,水解之后可与茚三酮反应。水解中某些氨基酸的侧链也会被降解。因此对于那些与茚三酮不反应或者发生其他反应的氨基酸需要另作分析。
其余的氨基酸经过色谱分离后可以比色定量。在分析化学反应的薄层色谱(TLC)中,它可以用于检测所有的胺类,氨基甲酸酯类,在经过充分热处理后可以检测酰胺类物质。
当茚三酮与氨基酸反应时可以释放CO2。二氧化碳中的碳原子来源于氨基酸的羧基碳。在考古研究中,这个反应用于释放古老骨骼中羧基碳用于稳定同位素分析,以帮助重现古代生物的食物结构。
② 茚三酮使氨基酸显色原理是什么麻烦告诉我
α氨基酸与茚三酮在弱酸性溶液中共热,反应后经失水脱羧生成氨基茚三酮,再与水合茚三酮反应生成紫红色,最终为蓝色物质。脯氨酸等仲胺氨基酸与茚三酮反应生成黄色物质。该反应可广泛用于各种氨基酸的定性或定量测定。
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茚三酮的化学性质如下:
茚三酮的特性反应
茚三酮是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。当与这些游离胺反应时,能够产生深蓝色或者紫色的物质,叫做Ruhemann紫。
茚三酮常用来检测指纹,这是由于指纹表面所蜕落的蛋白质和肽中含有的赖氨酸残基,其上的一级胺被茚三酮检测。在室温条件下,是一种白色的固体物质,溶于乙醇和丙酮。茚三酮可以看作是是二氢茚-1,2,3-三酮的水合物。
反应活性
羰基的碳原子带有部分正电荷,如果其连接的邻位基团具有吸电子能力(比如羰基本身)那么羰基碳的正电荷会进一步加强。因此1,2,3-三羰基化合物的中心碳原子比简单的酮具有更强的亲电性。
③ 蛋白质与茚三酮形成的是蓝紫色溶液还是蓝紫色沉淀
蛋白质与茚三酮形成的是蓝紫色沉淀。
除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应生成黄色物质外,所有的α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
该反应分两步进行,首先是氨基酸被氧化,产生 CO2 、NH3和醛,而水合茚三酮被还原成还原型茚三酮;第二步是所生成之还原型茚三酮与另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质。此反应的适宜pH为5~7,同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同。
简介:
1、蛋白质和硝酸反应,生成黄色的沉淀。
2、蛋白质和茚三酮反应生成蓝紫色沉淀,这个颜色比较经典而且灵敏度也非常高,是经常用的试剂。
3、还有一种就是双缩脲试剂,在蛋白质中有一种重要的化学键,就是肽键,肽键与二价铜离子又产生红色沉淀,观察颜色来判断蛋白质是否水解完全。
4、色氨酸,它能够和酚试剂反应成为蓝色沉淀,也是一种经典颜色,但是由于它的局限性,通常不选用此种方法。
④ 反应条件相同时,丙氨酸茚三酮反应的颜色为什么比蛋白质茚三酮反应的颜色深
蛋白质和氨基酸一样,也能和茚三酮水合物试剂产生紫色的颜色反应,用这个反应可以鉴别蛋白质。
除了水会呈阴性反应,而无α—氨基的脯氨酸和羟脯胺酸呈黄色。因为他们没有α—氨基酸可以与水合茚三酮反应生成蓝紫色物质。 纯手打,。。
⑤ 茚三酮反应实验报告中为什么丙氨酸溶液比鸡蛋白溶液颜色深结果分析
茚三酮反应实验报告中,丙氨酸溶液比鸡蛋白溶液颜色深,是因为:
茚三酮是鉴定氨基酸的试剂,反应十分灵敏,鉴定方法简便。茚三酮和氨基酸的氨基反应,形成深蓝色或者紫色的席夫碱。如图:
丙氨酸是纯的氨基酸。而鸡蛋白的主要成分是蛋白质,游离氨基酸或者氨基残基很少,与茚三酮形成的席夫碱数量有限,颜色浅也就是显而易见的了。
⑥ 茚三酮与甘氨酸反应,然后烘干颜色变化的原因
氨基酸的α-NH2所引起的反应。α-氨基酸与水合茚三酮一起在水溶液中加热,可发生反应生成蓝紫色物质。首先是氨基酸被氧化分解,放出氨和二氧化碳,氨基酸生成醛,水合茚三酮则生成还原型茚三酮。在弱酸性溶液中,还原型茚三酮、氨和另一分子茚三酮反应,缩合生成蓝紫色物质。
所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽都产生蓝紫色,但脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质,因其α-氨基被取代,所以产生不同的衍生物。
此反应十分灵敏,根据反应所生成的蓝紫色的深浅,在570nm波长下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量。也可在分离氨基酸时作为显色剂定性、定量地测定氨基酸。
(6)茚三酮反应为什么蛋白质颜色深扩展阅读:
除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应生成黄色物质外,所有的α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。该反应分两步进行,首先是氨基酸被氧化,产生 CO2 、NH3和醛,而水合茚三酮被还原成还原型茚三酮。
第二步是所生成之还原型茚三酮与另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质。此反应的适宜pH为5~7,同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同,酸度过大时甚至不显色。
该反应十分灵敏,1:1 500 000浓度的氨基酸水溶液即能显示反应,因此是一种常用的氨基酸定量方法。但也有些物质对茚三酮也呈类似的阳性反应,如β-丙氨酸、氨和许多一级胺化合物等。所以定性或定量测定中,应严防干扰物存在。
主要反应分为两步 :
第一步 氨基酸 + 弱酸→ 水合茚三酮 + 二氧化碳 + 醛类 + 氨气。
第二步 两个水合茚三酮 + 氨→ 还原性茚三酮 (蓝紫色)。