比色法颜色变浅是因为什么
㈠ 重铬酸钾比色法比较油脂的色泽时色泽越浅越好吗为什么
油脂的颜色,只是代表它原有色素和它在加工中形成色素的一个值。
㈡ 比色法操作的注意事项是什么
噻唑蓝(MTT)比色法操作注意事项
噻唑蓝(MTT):四唑盐
原理:
MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法.活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶干水的蓝紫色产物,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与活细胞数成正比。
优点:简单快速、灵敏、经济
缺点:由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且溶解甲的有机溶剂对实验者也有损害。
应用:新药筛选、细胞毒牲试验、肿瘤放射敏感性实验等
MTT主要有两个用途
1)药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2) 细胞增殖及细胞活性测定。
比色法操作注意事项
1) 选择适当的细胞接种浓度,保证细胞培养结束时浓度不至于过满。
2) 种板技术:均匀。
3) 实验时应设置调零孔,溶媒孔,加药孔。
调零孔:培养基、MTT、DMSO。(无细胞)
溶媒孔:培养液、MTT、DMSO、细胞、溶酶。
加药孔:培养液、MTT、DMSO、细胞、不同浓度的药物。
(一般5-7个梯度,设3-5个复孔)
4)避免血清干扰:一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。
5)边缘效应:周边孔加入PBS。
6)MTT的配置: MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液。4℃下避光保存2周。
7)孔板的重复利用(1.做完MTT后用大水流尽量将板冲净,然后用洗衣粉水泡几个小时(小心最好让洗衣粉先化开)。2.用自来水冲净洗衣粉水,倒扣晾
干.3.重铬酸钾加浓硫酸配成的酸液中浸泡过夜泡洗液(六小时以上即可)后自来水洗净(20次左右)每个孔都要处理4.用去离子水冲洗3遍,双蒸水冲洗3
遍,烤干5.超净台中紫外线照射2个小时左右,就可以用了,不可以高压。或泡酸过夜,dd水冲洗干净,烘干或者晾干后紫外照射30min以上即可使用。8)MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。
9)在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。
10)MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套。
11)配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以操作台上的照明灯关掉。
㈢ 比色法做环氧乙烷残留量实验颜色淡是怎么回事
说明样品的含量低 也可能是你的显色反应没做好
㈣ 什么叫比色法操作上应该注意什么问题
比色法是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。早在公元初古希腊人就曾用五倍子溶液测定醋中的铁。原理是基于被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。
操作注意事项:选择适当的细胞接种浓度,保证细胞培养结束时浓度不至于过满;实验时应设置调零孔,溶媒孔,加药孔;避免血清干扰:一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。
比色法的原理:
利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法,其原理是基于被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。
如利用光电效应,将透过有色溶液后的光强度成正比例地变换为电流的强度来进行比色定量的方法。
以上内容参考:
网络-比色法
㈤ 比色测定的基本原理是什么操作步骤有哪些
原理:
比色分析是基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法,又称吸光亮度法。
有色物质溶液的颜色与其浓度有关,溶液的浓度越大,颜色越深,利用光学比较溶液颜色的深度,可以测定溶液的浓度。
根据吸收光的波长范围不同以及所使用的仪器精密程度,可分为光电比色法和分光亮度法等。
步骤
1. 用相同型号的比色管。
2. 配制等体积的系列标准样品。
3. 配制待测样品(与标准样品等体积)。
4. 对比,找出相同的浓度。
㈥ 比色测定的基本原理是什么
比色分析是基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法,又称吸光亮度法。
有色物质溶液的颜色与其浓度有关。溶液的浓度越大,颜色越深。利用光学比较溶液颜色的深度,可以测定溶液的浓度。
根据吸收光的波长范围不同以及所使用的仪器精密程度,可分为光电比色法和分光亮度法等。
比色分析具有简单、快速、灵敏度高等特点,广泛应用于微量组分的测定。通常中测定含量在10-1~10-4mg·L-1的痕量组分。比色分析如同其他仪器分析一样,也具有相对误差较大(一般为1%~5%)的缺点。但对于微量组分测定来说,由于绝对误差很小,测定结果也是令人满意的。在现代仪器分析中,有60%左右采用或部分采用了这种分析方法。
㈦ 比色法原理是什么
比色法的基本原理是朗伯(Lambert)定律,阐述为:光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关;在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光。
公式为:A=lg(1/T)=Kbc
(A为吸光度;T为透射比, 即透射光强度与入射光强度之比;c为吸光物质的浓度,单位mol/L;b为吸收层厚度,单位cm )