凍干血漿為什麼短時間使用
A. 白血球過少是不是白血病
得看少成什麼樣,自己對一下吧!
廣義來講白細胞可以分為粒細胞、單核細胞、淋巴細胞。凡是白細胞系統的細胞發生惡變稱為白血病細胞,而白細胞細胞占據了造血器官,蔓延到外周血則為白血病。白血病可分為以下幾種類型:
⑴急性白血病:急性白血病是以其起病急,表現為貧血、出血、感染、發熱明顯特徵,在骨髓和外周血中存在大量清一色的白血病細胞。根據組織化學染色及免疫標記又分為兩大類:急性淋巴細胞性白血病和非淋巴細胞性白血病。
⑵慢性白血病:慢性白血病起病隱匿,屬於細胞發育的中晚期細胞的惡變所致。根據細胞系列不一樣,又分成慢性粒細胞性白血病和慢性淋巴細胞性白血病。前者常因急變而死亡;後者常因免疫功能差,感染而死亡。兩者至今尚無很好的辦法治療
⑶少見及特殊類型白血病:該類白血病以難治預後差為特點,包括毛細胞白血病、嗜鹼粒細胞白血病、嗜酸粒細胞白血病、肥大細胞白血病、成人T淋巴細胞白血病、綠色瘤或粒細胞肉瘤、漿細胞白血病、淋巴肉瘤細胞白血病、全髓白血病等。
一、 哪些人易得白血病? 為什麼會得白血病?這問題研究了好久,至今不完全清楚,但有幾種因素和白血病的關系比較明確。
首先,是病毒。1980年美國和日本先後發現有一種成人T淋巴細胞白血病確實由病毒引起,而且有一定的流行區域,這樣更肯定了白血病和病毒的密切關系。
其次,是放射線接觸者。美國在日本廣島投了原子彈後,當地一些埋頭倖存者中白血病發病率顯著提高;平時長期接觸射線的工作者比其他人群的白血病發病率高。
再次,某些化學物質和葯物也可成為白血病的誘因。其中比較明確的是"苯",如長期接觸會引起再生障礙貧血,造血紊亂,繼而發展為白血病。還有葯物乙雙嗎林和白血病的關系也甚為密切,已有多例報道。 化學抗癌葯物是抗白血病的葯物,也是治療其他惡性腫瘤的常用葯物,但是也看到一種現象,在長期應用該葯的患者中,由於免疫功能被抑制,也會產生第二腫瘤,包括白血病。
最後,某些先天性疾病和白血病的關系也十分密切。如先天愚型(唐氏綜合征)的小孩、范科尼貧血等等,這類人群發病概率比一般人高幾十倍。 白血病患者中有白血病家庭史者佔8。1%;近親結婚的人群中,急性淋巴細胞性白血病發病率比一般人高30倍;單卵孿生子如一人患白血病,則另一人患白血病的機會是20%。
二、 白血病起病有哪些跡象? 急性白血病起病有三大症狀,即貧血、出血、感染。
(1) 貧血:起病時貧血即明顯,中度到重度。病人覺乏力,面色蒼白,眼瞼和指甲蒼白,頭暈。
(2) 出血:表現為牙齦出血、鼻出血、皮膚有出血點或出血瘀斑(烏表塊),這是因為血小板減少或凝血功能紊亂引起。
(3) 發熱和感染:白血病本身也可發熱,再加上感染則發熱更高,可為38-40度,發熱前稍有畏寒感覺,熱退後大汗淋漓。 凡有上述現象者,必須立即就醫檢查。必須記住,白血病可有上述三大症狀,但有上述三大症狀者不一定都是白血病。確診的唯一方法是骨髓穿刺塗片檢查,好可和再生障礙性貧血等其它痢疾病作鑒別。 慢性粒細胞白血病起病較隱匿,早期可無症狀,脾腫大時可感到腹脹,往往大部分病人就醫時已發展到巨脾,所以經常很重要。在慢性粒細胞白血病慢性期可無貧血,而白細胞和血小板卻增高。 慢性淋巴細胞性白血病起病也不明顯,尤其早期可無任何感覺。由於慢性淋巴細胞白血病多數是老年人,故輕度乏力也就會忽略。
三、 白血病的化學治療? 治療白血病一般是採用聯合化學治療,醫師常將幾種葯物有機搭配起來組成各種各樣的聯合治療方案,以達到最大限度地消滅白血病細胞。
四、 造血組織移植是怎麼一回事? 化學治療葯物並不能消滅在造血組織的每一個白血病細胞,那麼就要設法將原來事實上已被破壞的造血車間進行徹底摧毀,然後運進新的造血機器,重新造血。即在造血組織移植前應用放射治療或高劑量化學治療將病人骨髓抑制到最低限度,然後再將造血組織輸入,度過艱難一段時間使其植活。 由於技術的進展,造血組織移植成功率在不斷提高。骨髓移植成功率達60-90%,長期存活率為30-60%,比單用化學治療病人的5年生存率大大提高。
五、 哪些造血組織可以移植? 造血組織移植一定要選質好,量多的造血幹細胞作為種子,這樣種入另一塊土地才能植活、生根、發芽。依質量好壞,可用於移植的造成血組織排列如下:
(1) 骨髓:骨髓是出生後的主要造血器官,富含造血幹細胞和幹細胞,故有條件者應首先選用。白血病患者只能選用異體骨髓移植,即父母、同胞兄弟姊妹或其他配型相似的人。
(2) 外周血造血幹細胞:外周血造血幹細胞量比骨髓少得多,但採取及輸入方便,可先用於細胞擴增的刺激因子將其數量變多,然後再給病人輸入,也同樣達到目的。
(3) 胎肝即胎兒肝臟:胎兒時期造血旺盛,且主要在肝臟,以3-5個月胎齡的胎肝最好。
(4) 臍帶血:臍帶血中也有造血幹細胞,設法將其數量擴增後亦可應用。
六、 白血病人為什麼會出血?怎樣處理? 大部分急性白血病病人都有出血症狀。原因是什麼呢?
(1) 血小板量的減少和質的不好:由於白血病細胞在骨髓浸潤,使產生血小板的巨核細胞減少,故血小板減少了。血小板平時有一部分是粘貼在血管壁上,粘貼少了,血管就脆性增加,易破裂出血。另外,白血病病人的血小板聚集力差,使血液不易凝結。
(2) 血管脆性增加:血管變脆不僅是因為血小板減少,也和白血病細胞浸潤有關。
(3) 彌漫性血管內凝血:由於白細胞釋放的促凝物質使全身微循環血管內處於高凝狀態,引起廣泛的微血栓形成。這好比河道堵塞時,河水就泛濫出來一樣。 如何進行處理呢? 血小板少可以輸血小板,但最好是輸單采血小板,即從一個人身上採集的血小板,效果好。否則10單位血小板來自10個人,由於配型不完全相合,輸到體內也常破壞。 其次是處理彌漫性血管內凝血。在大量補充凝血因子,可輸入新鮮血漿或新鮮凍干血漿或凝血因子復合物;另外用右旋糖酐疏通微循環。在搶救中,醫師的臨床經驗是相當重要的。
七、 白血病能治癒嗎? 這個問題如果在60年代提出則回答是否定的,但從目前進展的情況看來,回答是可能的。因為現在已有較多長期存活的白血病病人存在,這就是一個鐵的事實。 治癒的標準是什麼?是指白血病病人的骨髓象及血象達到正常范圍,臨床無症狀,和正常人一樣可以毫無顧慮地生活和工作。一般過5年不復發就有希望,10年可視為治癒。
必須知道的是當一個病人初治時,醫師還不能預計是否能長期存活。這要看發展過程。要看該白血病病人的白血病細胞對化學治療是否敏感,醫師是否很有經驗地掌握整個治療過程及用葯方法,幫助病人渡過難關。 為了使白血病病人長期存活,需要解決白血病細胞的耐葯問題,藏在病人體內的殘留白血病細胞消滅問題。這些都還在研究中,希望今後有所突破,那就使醫師能預料及幫助白血病病人獲得長期生存。 白血病的發病機制是種種因素導致染色體上基因突變所致,如果有什麼辦法逆轉這基因突變,或將突變基因調去代之以正常基因,這就是根除白血病的最理想辦法。目前尚處在實驗階段,相信將來應用於臨床治療必然是一個重大突破。 摘自:《常見病問答叢書》(楊秉輝主編)之《白血病、多發性骨髓病和惡性淋巴瘤》分冊(袁彌滿、陳新編著)-上海醫科大學出版社
B. 蜂王漿有蜂王漿含片、鮮蜂王漿、干凍粉,哪一種對人體吸收要好些
如何服用蜂王漿及選擇何種劑型更好!
一、蜂王漿如何貯存?
蜂王漿貯存需冷藏或冰凍,4℃左右冷藏期為3個月,-5℃左右冷凍保存一年,-18℃以下保存兩年以上。沒有冷藏、冷凍條件的,可摻入蜂蜜在室溫條件下供臨時食用和保存。
二、蜂王漿如何食用?
蜂王漿的服用首先要考慮是讓蜂王漿里的大分子成分能夠充分地被消化、分解和充分吸收。
蜂王漿食用時間:一般是空腹食用最好,早餐前30分鍾到1小時,晚上入睡前30分鍾左右食用,早晚各一次。飯前空腹服用可以讓蜂王漿中的蛋白質和多肽等大分子成分易被消化、分解和吸收,也便於蜂王漿里其他各種小分子成分更快、更充分地被吸收。鮮王漿:成人一般一次服用3~5克。因為蜂王漿呈酸性,可能對胃稍有影響,如果人服用後胃部感到不適,可酌量減少用量。
飯後服用會由於腹內有大量食物存在,佔用大量的消化液,食物也會阻礙蜂王漿成分與腸壁的接觸。另外,蜂王漿與胃中存留食物相混合也會破壞其中的營養成分。由於蜂王漿有怕光怕熱的特性,所以最為忌諱開水沖服。
不論何時服用,最好採用舌下含服的方法,這樣可以首先通過舌下腺吸收其中一部分,或者用溫開水送服。
三、食用新鮮王漿不更好嗎?為什麼要把蜂王漿製成凍乾粉(含片和膠囊)?
真正的新鮮王漿和凍乾粉在質量上是沒有區別的。如果你得到的王漿是在常溫下存放的王漿,其質量就大不一樣了。前蘇聯生物學家對王漿的保鮮度做過試驗。他們用常溫下存放5天以後的王漿喂蜂王,蜂王不能生長。從外觀上看,王漿變化不大,但其中的生物活性物質也大部分喪失。目前世界上公認的鮮王漿保存方法是在零下18攝氏度以下的低溫冷凍庫中冷凍保存。所以,你只要確認你買到的是鮮王漿,那麼你把它存放在冰箱中低於18攝氏度的冷凍室內,它是會保持其原有的獨特的(一般冰箱達不到這個性能)。不過,這樣服用很不方便,一是它形成冰凍形,不易取出,而且家庭冰箱經常開門箱內溫度變化較大,鮮王漿從冰箱進進出出,容易喪失活性物質,所以還是吃王漿凍乾粉(含片和膠囊)為好。
四、為什麼蜂王漿不烘乾而凍干,什麼是凍干?
王漿在高溫下會喪失活性物質,所以不能用烘乾法製成粉。但是市場上卻有烘乾的王漿粉。以次沖好低價競爭。隨著現代科技的發展,凍干保鮮技術已廣泛應用於醫學、生物、化工食品等領域,其特點是在超低溫和高真空狀態下,使製品不經過冰化水、水化氣的過程,而直接升華為水氣逸出,從而完整地保存其中的活性物質及色香味,就像人體的鮮血可製成凍干血漿用於搶救生命一樣。三邦公司擁有現代化的冷凍乾燥設備和檢測儀器,高質量的冷凍技術保證了高質量的「三邦」牌蜂王漿凍乾粉含片和膠囊。
五、「三邦」牌蜂王漿凍乾粉的主要劑型?
「三邦」牌蜂王漿凍乾粉目前現有膠囊、小袋粉和含片等劑型。其中凍乾粉膠囊食用時無蜂王漿特有的「辛、酸、辣、澀」口味;小袋粉保持了蜂王漿的原味,不管哪種劑型都必須以真、純、精為前提。
六、「三邦」蜂王漿凍乾粉含片的主要特色?
蜂王漿凍乾粉服用後其中一些重要的物質會或多或少會被胃液、肝臟破壞,作為凍乾粉小袋粉的升級產品「三邦」蜂王漿凍乾粉含片,不僅杜絕了粘袋、粘口腔和拋灑的浪費,而且通過舌下含服這種給葯途徑,口腔黏膜可以直接優先吸收一部分小分子營養成分,比其他蜂王漿凍乾粉劑型多了一個吸收的程序。初期對蜂王漿口味不適者也可直接吞服,且便於攜帶和保存。
C. 凝血酶時間測定和凝血酶原時間測定的區別
凝血酶原時間(PT)測定和膽鹼酯酶(ChE)活力檢測各有什麼臨床意義?
凝血酶原是由肝臟合成的一種蛋白質。凝血酶原試驗是一種了解血液凝固情況的試驗,它可以反映肝臟的凝血功能。凝血酶原時間(PT)和凝血因子Ⅰ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅹ有關,而這些因子也均在肝臟合成。凝血酶原時間的正常值為11~15秒(奎氏法)。當肝臟出現病變、肝功能不良、上述凝血因子因合成障礙而含量降低時,即可引起凝血酶原時間延長而發生凝血障礙。如重型肝炎時,凝血酶原時間明顯延長,患者容易出血,預後較差;慢性活動性肝炎與肝硬變時,凝血酶原時間可輕度延長;肝外阻塞而無明顯肝細胞損害時,凝血酶原時間可正常。長期肝外阻塞、膽汁淤積、影響維生素K的吸收時,也可導致凝血酶原時間延長;若給患者注射維生素K時,則凝血酶原時間可恢復正常。
此外, 由於凝血酶原半衰期短,在急性重型肝炎發病後的短時間內即有凝血酶原時間的改變,故測定凝血酶原時間,對重型肝炎的診斷,病情和預後的判定,具有重要的臨床意義。
血清膽鹼酯酶,又稱「假性」或「非特異性」膽鹼酯酶,是由肝臟合成的一種特異性較差的,既可作用於乙醯膽鹼,又能作用於其他膽鹼酯類的酶。其正常值為0.80~1.00或40單位以上。
由於血清膽鹼酯酶的半衰期短,所以它是肝內損害時的一種極為敏感的、反映肝臟酶合成障礙的試驗。其活性降低的程度往往與肝病的嚴重程度相一致。如重型肝炎患者膽鹼酯酶活性值一般都較正常降低,且降低程度與病情輕重密切相關;約80%的病人,其血清膽鹼酯酶活性可降至正常值的60%,重危病人甚至下降至10%以下,此類患者多很快死亡。因此,血清膽鹼酯酶活性的測定,有助於對重型肝炎的診斷及對病情和預後的判定。此外,重度慢性肝炎和晚期肝硬變患者,血清膽鹼酯酶亦有不同程度的降低。
血栓與止血實驗室檢查的臨床重要性與日俱增,檢驗內容不斷擴大,工作量也日益增多;不斷出現的方法更新和試劑商品化、操作自動化,改變了以往靠手工操作、自配試劑、工作效率低的局面。與此同時,方法標准化和質量控制也顯得格外重要。然而,由於血栓與止血試驗的特殊性 ......
有關(凝血酶原時間(PT)、活化的部分凝血活酶時間(APTT)和纖維蛋白原(FIB)測定等三項實驗)
摘要:對ICSH、ICTH或美國國家臨床生物化學委員會(NCCLS)等國際以文件形式公布的有關凝血酶原時間(PT)、活化的部分凝血活酶時間(APTT)和纖維蛋白原測定等三項實驗的標准化及其重要性作了簡單敘述。
關鍵詞: 凝血酶原時間 活化的部分凝血活酶時間 纖維蛋白原 標准化
由於血栓與止血實驗的特殊性,因此迄今僅有凝血酶原時間(prothrombin time,PT)、活化的部分凝血酶時間(activated partial thromboplastin time,APTT)和纖維蛋白原(fibrinogen,Fg)等三項實驗有了標准化的試劑(如PT)、標准品(如Fg)、質控品和統一的報告形式等;其他,如血小板功能、抗凝因子和纖溶成分等檢測尚缺乏成熟的標准化方案。本文僅就經國際血液學標准化委員會(ICSH)國際血栓與止血委員會(ICTH)或美國國家臨床生物化學標准委員會(NCCLS)等國際組織以文件形式公布的有關PT、APTT和Fg三項實驗的標准化問題作一簡介。
一、標准化和質量控制的重要性
所謂血栓與止血檢測方法的標准化和質量控制,是指採用統計學原理,運用規范的物理、化學、生物學的方法,對血栓與止血實驗的技術、操作、儀器、試劑和標本等項的質量水平,進行合理的管理、檢測和評價,以標准化和質量控制來堵絕誤差,提高實驗的精密度、准確性和可靠性。標准化和質量控制的重要性在於:
1、為臨床診治提供可靠的依據:實驗結果的可靠性是臨床診治疾病的重要依據和條件。實驗結果若為假陽性就會造成誤診、誤治;若為假陰性就會造成漏診、漏治;實驗結果偏高或偏低都會影響患者的診斷、鑒別診斷以及影響醫師對病情和療效的判斷。
2、提高血栓與止血基礎研究的效率和價值:血栓與止血基礎研究的形式就是進行各種實驗。實驗可靠性好,就能揭示血栓與止血的客觀規律,甚至可帶來重大理論突破及(或)社會、經濟效益;若實驗可靠性差或有錯誤,則會造成假象或錯誤理論。
3、有助於人群健康調查和建立血液學參數的正常范圍:為了解一定人群的健康水平,建立具有廣泛意義的血液學參考值的范圍須進行較大規模人群的健康調查,健康調查必須要有實驗結果的可靠性作保障,不然會導致不準確或錯誤的結果,故質量控制對群體醫學也有重要意義。
總之,血栓與止血實驗室的質量控制,從一定程度上反映一個國家,一個地區,一個單位血栓與止血醫療水平和研究水平的高低。因此,應倍加重視。
二、 凝血酶原時間(PT)的標准化
自1935年Quick創建凝血酶原時間(prothrombin time,PT)測定方法以來,迄今仍然 是檢查外源凝血系統諸因子及相關抑制物的重要篩選試驗,PT也是目前口服抗凝劑治療的主要手段。但是,PT測定受多種因素影響,必須對它進行標准化和質量控制,以提高PT檢測的精密度、准確度和可靠性。
(一)凝血酶原時間(PT)的標准化問題
1、組織凝血活酶標准化:應用的國際參考品(international reference preparation IRP),有下列幾種:
(1)單一組織凝血活酶國際參考品:是一種組織提取物的生理鹽水懸液制劑。WHO在英國使用的統一標準的"英國比較凝血活酶"(British comparative thromboplastin,BCT)為基礎,制備WHO的原級凝血活酶參考品(primary reference preparation),如人腦組織凝血活酶,編號67/40。同時又以BCT67/40為基礎標化了次級參考品(secondary reference preparation)。如牛腦組織凝血活酶,編號為68/434;兔腦為70/178。後來WHO還公布了一些次級組織凝血活酶參考品,如人腦或胎盤制劑,如BCT/253;兔或兔、猴組織混合制劑,如RBT/79等。
(2)復合組織凝血活酶國際參考品:它是組織提取物的生理鹽水懸液中加入適量的纖維蛋白原、因子V 和氯化鈣組成的制劑,如牛組織凝血活酶OBT/79等。
目前世界各國都廣泛應用WHO的這些參考品來校正本國或本地區制備或生產的組織凝血活酶參考物。這樣使世界范圍內有了多種組織凝血活酶參考品。
2、組織凝血活酶工作制劑(working preparation,WP)的國際敏感度指數(international sensitivity index,ISI)
由於不同組織凝血活酶對凝血因子的敏感性不同。為了使不同敏感性的組織凝血活酶在檢測PT中能得到同樣的結果,必須要制定一個共同的敏感性指標。這就需要通過自製的試劑與國際參考品(IRP)進行比較,然後得出一個校正值。具體的方法如下:
(1)用國際參考品(IRP)標定國家、地區或本實驗室的參考制劑(reference preparation,RP)。
(2)用實驗室參考制劑(RP)標定工作制劑(WP)。
1)標本:2份正常人血漿和6份口服抗凝劑達6周的患者血漿,連收10天,共60份標本。
2)測定:按一定順序進行測定,每份標本重復測定2次。將PT測定的結果(秒)點在雙 對數坐標紙上,橫坐標代表WP的PT測定結果,縱坐標代表RP的PT測定結果,畫出最佳的各點擬合直線,得出定標曲線,通過WP/RP比值,或回歸方程求出斜率b。
3)計算WP的ISI值:ISI值愈接近於1.0,表明組織凝血活酶試劑愈敏感,因此,生產和出售組織凝血活酶試劑的廠商,必須在產品上標有ISI。
3、PT測定結果的報告方式:理論上,無論何種組織凝血活酶,只要標有ISI,就可與國際參考製品進行對比校正,並可用同一種計量單位報告。1985年ICSH和ICTH推薦以PT監測口服抗凝劑的報告方式是國際正常化比率(international normalizde ratio,INR)。
INR的計算公式如下: 在用INR後,各種敏感性不同的組織凝血活酶均可得到相同的INR值。
4、儀器特有有ISI:上述PT根據報告方式適用於手工法(試管傾斜法)測定PT。但是手工法與儀器法以及儀器法與儀器法測定PT的INR之間,仍有差異。研究表明,在ACL、Cobas Fibro和Coaga-Pet三台自動化儀器上,使用同一種ISI為1.12的Thromborel S試劑,測定PT的均值分別為10.7秒、12.1秒和11.1秒。但若以同一ISI值計算INR,得出的數值也存在著不同程度的差異。為此,專家們提出建議:同一組織凝血活酶試劑用於不同儀器時,可用所謂的"儀器特有的ISI"(instrument specific ISIs)或稱區域性ISI(Local ISI)來計算INR。每台儀器所使用的凝血活酶試劑都應該有特定的ISI值,重新標定ISI值的做法是購買標有INR的凍干血漿,然後在自己的儀器上再標定所使用凝血活酶試劑的ISI值,這樣才可使病人的INR具有可比性。
(二)凝血酶原時間(PT)的推薦方法
[原理]
將組織凝血活酶(主要含組織因子和脂質)和鈣離子,加到枸櫞酸抗凝血漿中,在37℃保溫,測定血漿凝固時間,即為PT。PT主要用於篩選檢測外源凝血系統的因子Ⅶ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ和相關因子的抑制物的試驗。
[標本來集和處理]
1、標本採集:用硅化或塑料注射器抽取空腹靜脈血,按9:1比例加入含0.109mol/L的枸櫞酸鈉抗凝劑的硅化或塑料試管中,輕輕混合均勻。
2、標本處理:以2000~2500g,離心15分鍾,分離乏血小板血漿,並在24小時內完成試驗。
3、正常對照血漿:選擇正常健康男性和女性各lO名以上,年齡在18~45歲。但不能是妊娠、月經期、哺乳期和口服避孕葯的婦女,採取的血漿冰凍乾燥保存或-80℃保存。
[試劑]
1、抗凝劑:109mmol/L枸櫞酸鈉液(相當於含二分子結晶水的枸櫞酸鈉32g/L)。
2、凝血活酶試劑:市售商品,應標有ISI、批號及有效期。凍干者應按說明書加指定的緩沖稀釋劑復溶。
3、氯化鈣(CaCl2)溶液:為25mmol/L。(目前有些商品試劑已將凝血活酶液與氯化鈣液混合好,可不必另配CaCl2液)。
4、質控物:正常及異常對照血漿
5、配製試劑用水必須符合1級純水的標准。
[儀器]
1、手工法:秒錶,保持37℃±1℃的恆溫水浴箱或電熱塊。水深能浸試管3cm以上,表面無劃痕的10×mm拭管。經標準的0.1mL移液管。經校正的秒錶。
2、儀器法:各種自動或半自動血凝儀,嚴格按說明書操作。
[操作步驟]
1、手工法
(1)測定溫度36.5~38.5℃,上述各試劑及被測血漿,均應預溫至此一溫度,但凝血活酶試劑預溫不可超過30分鍾,血漿預溫一般不宜超過10分鍾。
(2)所用試管及加樣器等接觸血漿的器具均為塑料或硅化玻璃管。
(3)吸取枸櫞酸抗凝血漿0.1mL,加入一小試管中:加入凝血活酶試劑0.1mL混勻後置37℃水浴中。再加入25mmol/L CaCl2液0.1mL,(也可先將凝血活酶試劑與CaCl2溶液等量混合,加入0.2mL)。立即混勻並開動秒錶:試管仍浸於水浴中,至約10秒鍾時,自水浴中取出,在紗布上迅速擦去試管外水滴,在明亮處不斷傾斜試管,在流動狀態下觀察有無纖維蛋白形成。一旦見到纖維蛋白(同時將出現液體流動減慢),立即停表,記錄時間。每次測定二管,按平均數報告。本試驗的最後混合液其pH應為7.2~7.3,大部分商品凝血活酶試劑均用含緩沖液的溶液配製。
(4)每批均同時做正常和異常對照,方法應與測定標本完全相同。
[報告方式]
1、以PT的秒(S)數報告(最接近的0.5秒)
2、以患者血漿(S)/正常對照PT(S)的比率(PRT)報告。
3、在口服華法令類抗凝葯物治療監控時,應報告國際正常化比率(INR)。大部分自動化儀器可根據所測的PTR和凝血活酶試劑的ISI,自動算出INR。手工法可根據下列公式,用一計算器直接計算:
Poller設計了一個簡便的列線圖,在取得PTR和ISI值後,即可從圖上直接查找出INR值,十分便利,國內已有介紹。
ICSH規定,不再用稀釋曲線或百分比(活動度)報告。
[參考值]
因儀器/試劑不同,會得出不同結果,故很難統一規定參考值。各實驗室應根據自己的儀器、試劑等條件,自行測定一批健康人,建立參考值。此後至少每年或當條件有變化時,根據新的條件,重新建立。參考值PT測定的一切條件均應與患者血漿PT測定相同(包括采血、容器、抗凝劑等)。健康供血者應選至少20個18~55歲的男性和非妊娠、月經期女性,不可服葯,在平靜休息狀態采血、以減少個體差異(有條件時,可測一批老年人和小兒,分開統計)。同時應分開幾天采血和測定,以減少天間差異。測定結果經統計學處理,計算標准差:以兩個標准差(2SD)或95%可信限作為參考范圍。對於三個標准差是正常還是異常,需結合具體情況進行評估。從統計學上講,其中有些人是正常的。用以上標准,病人(PT異常)則很少會遺漏。
三、活化部分凝血活酶時間(APTT)的標准化
(一)活化部分凝血活酶時間(APTT)的標准化
APTT是檢測內源凝血系統諸凝血因子缺陷和相關抑制物的篩選試驗,也是當前用於凝血因子、肝素抗凝治療以及狼瘡抗凝物質檢測的主要手段。
與PT測定一樣,不同的部分凝血活酶、不同的活化劑和不同的激活時間對各種凝血因子缺陷、對肝素和對狼瘡抗凝物質的敏感性相差很大。例如,檢測APTT的試劑中,所用活化劑(白陶土、硅藻土、鞣花酸)不同,他們對檢測肝素、狼瘡抗凝物質和因子Ⅷ、Ⅸ的敏感性不同。
迄今,ICSH和ICTH尚未有APTT檢測方法標准化或試劑標准化的可行方案問世,僅NCCLS於1992年,提出一個編號為H29-T的暫行方案。
(二)活化的部分凝血活酶時間(APTT)的推薦方法
[原理]
將一種磷脂和激活劑加到血漿中,經過孵育後,加入適當濃度的鈣離子。其纖維蛋白凝塊形成的時間(以秒計),即為APTT。本法主要用於過篩測定內源途徑凝血因子的缺陷,如因子Ⅶ、Ⅺ、Ⅷ、Ⅸ、激肽釋放酶原(PK)、高分子量激肽原(HMWK)以及纖維蛋白原等。同時也用於上述因子的抑制物測定、肝素治療的監測以及狼瘡抗凝因子的檢查。
[儀器]
本實驗所用儀器、設備(包括采血、貯血容器、加樣裝置和標本的處理等)以及對它們的要求完全與PT相同。PT所用自動化儀器同樣適於本實驗。
[試劑]
1、部分凝血活酶試劑:由商品供應。一般已與檄活劑按比例配在一起(或分開配製)常用的激活劑由硅藻土(商品名Celite)、白陶土、二氧化硅微粒、鞣化酸(ellagic acid)或其它可用的激活劑,由廠方配套供應。
APTT試劑/儀器結合,應能使因子Ⅷ、Ⅸ或Ⅺ活性低於0.3μ/mL(或<30%)的血漿,出現異常延長的結果。
2、氯化鈣溶液(25mmol/L)以及其它試劑與PT所用者相同。
[操作步驟]
1、樣品的採取、貯存、輸送與PT測定相同。注意,應用清潔的塑料或硅化玻璃采血器采血及貯血。
2、標本(去血小板的血漿)的制備與PT相同。注意、應用去血小板血漿測定。
3、水浴箱或電熱板的溫度為37℃±1℃,要經常檢查是否正確。
4、接觸活化時間:加激活劑活化因子Ⅻ的時間要保持一致;各儀器和試劑生產廠家的規定可能不一樣,應嚴格按說明書要求進行。手工操作時,應用秒錶或類似的定時裝置計時。
5、操作:預溫(不超過30分鍾)APTT試劑一份與預溫(不超過10分鍾)的侍測血漿一份混合,立即開動秒錶計時;至規定的接觸活化時間終點時,加人預溫37℃的CaCl2液一份,混勻,同時開動秒錶。至出現血漿凝固時,停表,記錄血漿凝固時間(以秒計)。手工測定時應同時測定兩管,按平均數報告。一些精密度已有很大改進的自動或半自動凝血儀,如果有適當的質控標准也可只測定一次。應同時測定正常和異常對照血漿。
[參考值]參照PT
[特殊解釋]
1、對肝素的敏感性:APTT常用於肝素治療的監測,通常以患者APTT與正常血漿APTT的比率在1.5~2.5作為治療控制范圍:但不同的試劑/儀器系統對肝素的敏感性不同。其試劑/儀器系統對肝素的敏感性可進行測定。體外的敏感性(in vitro sensitlvity)是指將臨床在使用的同類型釣肝素按其治療濃度,加到正常血漿中,測定APTT。體外敏感性與體內敏感性(in vivo sensitivity)不等同,但可作參考。
2、浪瘡抗凝因子:狼瘡抗凝因子是一種抗磷脂的自身抗體,由於它抗凝血的重要成分磷脂,故能幹擾凝血。血中如存在狼瘡抗凝因子,APTT將延長。但APTT試劑對狼瘡抗疑因子的敏感性有很大差別,試劑製造廠家應提供足夠的說明,有關的國家機構也可提供對狼瘡抗凝因子的資抖。但要知道,病人個體之間也有很大差異,沒有一種試劑能測出所有狼瘡抗凝因子。
四、纖維蛋白原測定(Fg)的標准化
(一)纖維蛋白原測定(Fg)的標准化問題
纖維蛋白原(死)由肝合成,存在於血漿和體液中,其結構和功能基本已搞清,但迄今仍無理想的臨床檢測方法;文獻報道的測定方法多至10餘種,有的精密度、准確信較好,但過於復雜、煩瑣;有的雖然簡便、快速,但精密度、准確性較差。
1992年,英國國家生物標准及控制研究所(NIBSC)、研究完成了一個纖維蛋白原標准品,編號為89/644,向WHO的生物標准專家委員會(ECBS)推薦,[15]並被ECBC批准為國際參考品(IRP)。從此,各國均引進這一標准品來標化本國或廠家生產的次極標准品(我國衛生部臨床檢驗中心亦已在引進)。使纖維蛋白原測定的標准化工作,走出了關鍵的一步。因此根據調查,各家標准品纖維蛋白原含量差別很大。
(二)纖維蛋白原(Fg)測定的推薦方法
各家用IRP來標化自己的標准時,推薦採用Jacobsson的改良法,現將該法介紹如下。
[試劑]
1、緩沖液:Na2O·2H2O 0.882g;KH2PO4 2.77gl升,此為貯存緩沖液;將貯存緩沖液l份,加生理鹽水2份即為應用緩沖液,pH為6.35。
2、生理鹽水:0.15mol/L
3、人或牛凝血酶:500IU/mL,生理鹽水溶液。
4、凝塊溶解劑:尿素400g溶於少量蒸溜水中,200mL 1.Omol/L NaOH,再加水至l升。
[操作步驟]
將纖維蛋白原凍干(標准)品(源於89/644)加lmL蒸餾水復溶,加到含有2mL應用緩沖液的有機玻璃淺盤或其他容器中,再加入凝血酶液50μL,迅速混勻,在室溫中靜制置2小時。將容器倒扣於吸水的布上(其下可墊吸水紙),再用適當物質(加濾紙)將凝塊吸干。將凝塊取下,置於5OmL生理鹽水中洗滌2次,每次洗滌後均應將凝塊吸干(可用玻璃擠壓凝塊),盡量除去含於凝塊中的液體,以免液體中的其它血漿蛋白殘留。必要時可在清潔棉布上擠壓。
小心將凝塊加人含凝塊溶解劑7.5mL的容器中,搖勻,直至凝塊完全溶解。倒人光徑為1cm的比色杯中,以凝塊溶解劑為空白,在280nm和315nm波長讀取吸光度(A)。
(三)適用的纖維蛋白原(Fg)測定(Clauss法)
[原理]
將凝血酶加到血漿中,使纖維蛋白原變成纖維蛋白,血漿便出現凝固。在有足量的凝血酶時,與不同含量的纖維蛋白原作用,其出現血漿凝固的時間與纖維蛋白原含量呈負相關。
[試劑]
1、牛凝血酶l00NIHU/mL
2、纖維蛋白原標准品(IRP次級標准)
3、緩沖液(下列兩種任選一種):
(1)巴比妥緩沖液(PH7.5);巴比妥2.5g,巴比妥鈉2.75g,璐氯化鈉7.3g溶於750mL去離子水中,校正至PH7.5,加水至1L。
(2)咪唑(Imidazole,或Glyoxaline)緩沖液:咪唑3.4g(0.05mol/L),氯化鈉5.85g,加於約500mL水中;加O.1mol/L鹽酸186mL,調PH至7.3-7.4,最後加蒸餾水至1升。
[操作步驟]
1、手工法
(1)用上述緩沖液先將標准品稀釋成0.8,1.6,2.4,和4.0g/L纖維蛋白原濃度,各濃度再用緩沖液作1:10稀釋。
(2)患者血漿及質控物用緩沖液作1:10稀釋。
(3)將含100NIHU/mL,牛凝血酶,混勻後室溫保存。如用儀器法測定,則用100NIHU/mL,牛凝血酶,不必稀釋。
(4)在一試管中,加稀釋血漿0.2mL,置37℃水浴中4分鍾。
(5)加入預溫37℃的lOONIHU/mL凝血酶液O.2mL,搖勻並立即開動秒錶,不斷觀察凝固時間。至出現凝固時停表。
(6)每份標本測定兩次,求平均數。同時測定各標准管和對照(質控)管,方法相同,准確記錄時間。
(7)計算:用雙對數紙作圖,以凝固時間為縱坐際、纖維蛋白原濃度為橫坐標,將各相應濃度的標准管對凝固時間,在圖上標出相應的點並連成直線,製成標准曲線。然後根據患者和質控血漿所測得的凝固時間。在圖上查到纖維蛋白原含量。
如血漿纖維蛋白原含量大於4g/L,應稀釋血漿後重測,結果乘以稀釋倍數。如血漿纖維蛋白原含量低於O.8g/L,需將原血漿改為1:2或1:5稀釋,在標准曲線上查得結果後除以5或除以2。
2.儀器法:本法可用自動或半自動凝血儀按凝血酶時間(TT)測定法測定。可自動列印出結果。一般儀器法比手工法精密度高。
D. 檢驗金黃色葡萄球菌凍干血漿培養時間過長會影響結果么
有的,環凱凍干血漿用於金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗
E. 為什麼含艾滋病毒的冰凍血漿在相當長的時間後仍然能感染人
首先,病毒生存的溫度許可。 再者,生存環境許可。艾滋病病毒只要寄生在淋巴細胞里。冰凍血漿的淋巴細胞是具有活性的,這就為艾滋病病毒提供了生存的環境條件。
F. 凍幹人血漿一般用什麼溶劑溶解 用0.1%枸櫞酸鈉,0.5%葡萄糖還是無熱源蒸餾水
溶解的話直接用蒸餾水.稀釋的話就得用緩沖液了.
樣品在凍干前,裡面一般是含有鹽的.凍干只是把水抽走,所以溶解時把水補進去就OK了.
G. 凍幹人血漿一般用什麼溶劑溶解
溶解的話直接用蒸餾水。稀釋的話就得用緩沖液了。
樣品在凍干前,裡面一般是含有鹽的。凍干只是把水抽走,所以溶解時把水補進去就OK了。
H. 低值質控是什麼
需要檢查血小板、出凝血時間是否正常
血小板正常值10-30萬
出凝血時間
一般在醫學的血常規的檢查中,都要涉及出凝血時間的檢查。
一.出血時間測定及臨床意義
從破裂或損傷的血管中,血液自行流出至血小板栓子形成暫時止血稱為止血過程,許多病理因素可影響這一過程而導致出血不止.為 此設計了許多試驗尋找這一病理生理的原因,比如:內皮素測定,血管性血友病因子(vWF)測定,血小板聚集試驗等等.這些試驗靈 敏,但操作復雜,常先用出血時間檢驗作為篩選試驗,如為陽性結果,再做上述試驗. 出血時間測定有三種方法,即Duke法,Ivy法,出血時間測定器法.Duke法雖操作簡單,但穿刺深度,寬度難以標准化, 且受穿刺部位毛細血管分布及血管收縮程度的影響,致使實驗的敏感性很差.文獻記載,血小板低於3×109/L的患者陽性率僅為4 2%,遺傳性假血友病(VWD)患者陽性率為32%,而測定器法分別為92%和67%.Ivy法雖較Duke法敏感,操作繁瑣, 又是損傷性的,切口難以標准化,也不易住推廣.出血時間沉定器法由於刀片埋裝在儀器內部,由彈簧快速彈出,使切口深度,寬度易於 控制,可標准化且靈敏度高. 因此,文件中規定出血時間測定實驗應使用出血時間測定器法而廢除Duke法.
二,凝血時間測定及臨床意義
凝血時間試驗是指血液自血管抽出放入試管中,從液態的溶膠狀態為半固體凝膠狀態所需要的時間.實際上是反映血液(或血漿)的 Ⅻ因子被激活後,血漿中處於酶原狀態的凝血因子依次被激活,連續"放大",最終使纖維蛋白原變成纖維蛋白.後者形成網狀結構網路 血小板栓子和紅細胞,最後網狀纖維蛋白收縮,形成牢固的血塊.這一過程需要Ⅻ,Ⅺ,Ⅸ,Ⅷ,Ⅹ,Ⅴ,Ca2+,凝血酶原及纖維蛋 白原等諸凝血因子的參與,其中任一因子缺乏均可引起上述"連續放大"過程障礙,而使凝血不良.因此,凝血時間延長,可反映上述因 子缺乏.雖其記錄的是整個凝血過程,但此實驗對Ⅺ,Ⅸ,Ⅷ因子較為敏感,而只有凝血酶原,X因子,纖維蛋白原明顯減低時才顯示實 驗結果延長. 凝血時間實驗大致有6種測定方法,王鴻利等用6種凝血時間測定對12例重型血友病(Ⅷ因子活性<1%),4例中型血友病( Ⅷ因子 活性1%-5%)進行測定,結果(檢出率/病例數)為:毛細血管法,重型1/12,中型0/4;玻片法,重型2/12,中型0/ 4;普通試管法,重型12/12,中型2/4;APTT,重型12/12,中型4/4;硅化管,重型12/12,中型4/4;A CT法,重型12/12,中型4/4.可以看出毛細血管法,玻片法很不敏感,不能再用於Ⅺ,Ⅸ,Ⅷ因子的篩選實驗.普通試管法簡 單且較敏感,標本用量較少,可用於常規檢查,但由於是手工操作,要注意實驗器材的標准化.APTT簡便,快速,市場有各型凝血儀 可用於不同規模實驗室,且有配套的試劑,質控物,校準物,易於質量控制,是較理想的常規實驗方法.APTT也可手工法,但影響因 素較多,在標本量較多時,不適使用. 三 為什麼手術前APTT,PT和血小板計數三項目檢查作為出血傾向的診斷指標 為了避免術中出血,手術前進行出血傾向的檢查非常必要,由於影響止血的因素很多,但又不可能做許多實驗,因此,以往常規中用 出血時間和凝血時間作為診斷指標,結果異常時再進一步做較復雜的試驗尋找病因.前已述及,Duke法雖簡單適於常規應用,但敏感 性很差,不能達到診斷要求,而出血時間測定器方法,操作復雜,費時,不適合常規使用.雖是反映血管,血小板數量和質量方面的病理 變化,但臨床最常見的是血小板減少引起變化.而血管性疾病和血小板質量異常引起的疾病多是遺傳性疾病,發病率很低,且基本上能在 臨床表現,體征和病史中反映出來,可提示做一些確診試驗.從這個意義上講,手術前只要做一項血小板計數而不做出血時間,也基本上 能保證手術前篩查的要求. APTT法僅對凝血階段Ⅺ,Ⅸ,Ⅷ因子敏感.為此,在進行APTT檢測同時還應再檢查PT,以保證能檢出由於凝血酶原,Ⅴ因 子,Ⅵ因子缺乏而引起的出血傾向. 四 ,活化的APTT,PT檢測方法及質量控制 (一)血標本的採取應注意的問題 1. PT,APTT凝血實驗檢查均使用靜脈血.采血人員應技術熟練,以防止組織損傷,外源性凝血因子進入針管. 2.凝血實驗標本最好不與其他實驗一起採集,否則由於標本的分配,分裝等使用血液停留在針管的時間延長.一般血液採集,進入 容器至進行實驗所用的時間越短,所分析的凝血因子被保護得越好.從輸液三通管取出血的做法不可取. 3.取血時病人應鬆弛,環境溫暖,防止靜脈攣縮,止血帶的壓力要盡可能小,壓力大及束縛時間長可影響局部血液的濃縮和內皮細 胞釋放組織纖溶酶原活物(t-PA),後者將引起纖溶性增強,血小板短和內徑應標准化,國際上推薦用21G1.5或20G1.5 針頭.取血時,拉針栓的速度要慢而均勻,使血液平穩地進入注射器,防止氣泡的產生. 4.一旦取樣完畢,立即與抗凝劑充分混合,一般提倡使用真空采血管.此管有充分的透明度,根據取血量設計,有2.0,5.0 ,10ml各種血液收集管,真空負壓並有定量的抗凝劑,能保證抗凝劑與取血量的比例,且能有充分的空間便於血液和抗凝劑混合. 5.用硅化玻璃或塑料注射器采血.考慮結果的精確性,應將試管刻度的可能誤差控制在既定體積的10%以內. 6. 采血後標本在低溫保存且在一定時間范圍內.筆者曾對不同條件保存的血漿因子變化進行了探討,結果顯示在32℃保存血漿6,12, 24hⅧ因子活性可分別消失50%,60%95%,即使保存在4℃也分別消失5%,55%,70%.V因子活性在32℃分別消失 25,40,80%,而在4℃則僅損失0%,5%,10%.因此測定APTT的血漿在-80℃至少可保存1個月,4℃為6h,2 0℃為6h,而32℃僅為2h.PT血漿,在4℃為24h,20℃為6h,32℃為2h. 7. 國際血液學標准化委員會(ICSH),國際血栓與止血委員會(ICTH)推薦使用3.2g/dl(含2H2O)或0.109mo l/L的枸櫞鈉作為凝血因子檢查的抗凝劑.另外,近年來,許多試驗室採用緩沖抗凝劑,這種試劑對標本經冷凍保存後再行分析更為適 宜.因為無緩沖劑,血漿pH值隨時間而增加,凝固時間可延長,特別是Ⅷ因子即使是在-20℃保存,其凝血活性也可減少50%.緩 沖劑的作用是維持血漿恆定pH,防止易變因子失活.抗凝劑在血標本的絕對含量可改變血漿中鈣離子濃度,進而影響試驗結果,一定要 注意采血時血液與抗凝劑的比例.應指出,所謂血液與抗凝劑按9:1比例混合,實際上是指抗凝劑與正常壓積血液之間的比例而言.因 此應根據患者紅細胞比例(Hct)狀況隨時調整抗凝劑用量. (二)應用試劑應注意的問題 1. 凝血活酶應注意的問題: (1)組織凝血活酶標准化應用的國際參考品(international reference preparation, IRP),有下列幾種:單一組織凝血活酶國際參考品:是一種組織提取物的生理鹽水懸液制劑.WHO在英國使用的統一標準的"英國 比較凝血活酶",編號67/40.同時又以BCT67/40為基礎標准化了次級參考品.如牛腦組織凝血活酶,編號68/434; 兔腦為70/178等.復合組織凝血活酶國際參考品:它是組織提取物的生理鹽水懸液中加入適量纖維蛋白原,因子V和氯化鈣組成的 制劑,如牛組織凝血活酶OBT/79等. (2)組織凝血活酶工作制劑的國際敏感指數(ISI),由於不同組織凝血活酶對凝血因子 的敏感性不同.為了使不同敏感性的組織凝血活酶在檢測PT中能得到同樣的結果,必須要制定一個共同的敏感性指標.自製的試劑要與 國際參考品(IRP)進行比較,然後得出一個校正值(即ISI).ISI值越接近於1.0,表明組織凝血活酶試劑越敏感,因此, 生產和出售得產品必須標有ISI. (3)儀器特有的ISI:上述PT根據報告方式適用於手工法(試管傾斜法)測定PT.但是手工 法與儀器法以及儀器法與儀器法測定PT的國際標准化比值(INR)之間,仍有差異.為此,專家們提出建議:同一組織凝血活酶試劑 用於不同儀器時,可用所謂的"儀器特有的ISI"或稱區域性ISI來計算INR.每台儀器所用的凝血活酶試劑都應該有特定的IS I值,重新標定ISI值的做法是購買標有INR的凍干血漿,然後在自己的儀器上再標定所使用凝血活酶試劑的ISI值,這樣才可使 病人的INR具有可比性. (4)某些凝血活酶和部分活化凝血活酶並不一定與某此儀器相匹配.渾濁的或含微粒的凝血活酶和部分活化 凝血活酶不能運用通過光學系統測定終點的儀器進行檢測. (5)凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步驟必須嚴格按照說明書進行.通 常在使用前必須充分混勻試劑,以使微粒重新均勻懸浮於液體中.按說明書要求的溫度存放試劑,並且試驗過程中,將試劑置於37℃下 的時間不能長於說明書中規定的溫度. (6)做APTT實驗時所用的活化劑不同,對血內肝素,狼瘡抗凝物質及因子Ⅷ,Ⅸ缺乏症的敏 感性也不同,要根據檢測項目來選擇不同活化劑的APTT試劑.同樣PT延長時反遇有關凝血因子中單一因子或幾個因子缺陷引起的病 理現象,由於不同疾病可能僅反映某一因子的變化,因此一種特定試劑不可能對這些疾病的變化的敏感性一致.由於不同廠家生產的PT 試劑質量不同,因此,同一份標本用不同PT試劑其結果可有明顯的差異.因此PT實驗最好採用INR的報告方式. 2. 試劑准備過程中應該使用去離子水.如果pH值增高的水沒有得到適當的緩沖,將會延長測定結果.如果用含氨的水配製抗凝劑,會導致 V因子活性快速降低,從而延長凝血酶原時間.凝血活酶,部分活化凝血活酶,緩沖液和抗凝劑須在4-10℃條件下貯存,但在室溫下 保存氯化鈣和水. 3. 正常對照血漿通常將多份健康人血標本混在一起,以彌補個體誤差.正常對照血漿要求20份以上健康,年齡在18-55歲間的男女個 體,且刪除服葯者,須在平靜,休息狀態抽血.樣本離心取出血漿後混勻,分裝小瓶,凍存於-80℃備用,或冷凍乾燥. 4. 參比血漿:標准化是質控的重要組成部分,方法標准化對有的實驗室來說是困難的,因有設備條件方面的限制.為了使結果大同一實驗室 的不同時期具有可比性,必須使用標准品或參比血漿.WHO已建立了10多種國際標准品. (三)設備與儀器應注意的問題 1. 玻璃器皿的要求:貯存和測試時應選用干凈,沒有劃痕的試管.酸清洗法(鹽酸3mol/L)被公認為適用於凝血研究清洗玻璃製品的 最佳方法.玻璃製品必須通過徹底沖洗,以去除殘留的酸,避免改變容器表面的pH值.一次性玻璃和塑料製品分開保存.手工法PT或 試管法全血凝固時間測定時,試管口徑為8mm,直徑越大,CT越長. 2. 溫度的要求:人工測定終點法要求水浴箱的溫度必須保持在(37±1)℃,並且周圍照明設備要好,便於讀取終點.如果為了讀數而將 試管從水浴箱中拿出,傾斜觀察,此時動作應迅速,否則試管中的血漿溫度將很快下降. 3. 儀器的選擇:自動終點測定法有半自動和全自動兩種類型,區別在於前者在試劑和血漿移液步驟上仍是手工的;而後者完全由儀器自動操 作.自動終點法測定所得結果重復性好,大大提高了不同試驗室結果間的可比性. 應該根據儀器的精密度,可靠性,使用和維修的簡易程度來選擇所購買儀器.現在已有不少用合成底物法代替以凝固為終點的生物學測定 法的報道.但是,這兩種測定方法的臨床意義不盡相同. (四)實驗操作應注意的問題 1. 許多試驗誤差都來源於技術的錯誤.在實驗技術,試劑,溫度及pH值上很微小的變化都會導致試驗結果明顯的變化.孵育時間與溫度是 在一期法凝血酶原時間測定時應嚴格控制的參數.血漿不能在37℃下放置超過10min,凝血活酶放置時間也不能超過說明規定的時 限. 2. 手工法PT或試管法CT檢查時,傾斜試管動作一定要輕,角度要小,以減少血液與管壁的接觸面積.同一標本要做二管(有文獻報告試 管法CT檢查要3管)並取均值報告.每批實驗必須有正常對照. 3. 血液凝固主要是酶催化的反應,所以實驗過程中要嚴格控制理想的pH環境和溶液的離子強度.多數常規試驗都在處於血液生理pH值緩 沖范圍的緩沖系統中進行.反應混合物的pH值必須處於7.2-7.4之間. 4. 試驗結果准確還取決於所用的反應物的量,加入順序和不同反應物的孵育時間.如每次APTT試驗時,活化部分凝血活酶試劑和血漿混 合物的孵育時間必須一致. 混勻過程決定了APTT試驗中接觸活化的量,在孵育時如果在活化部分凝血活酶與血漿混合的技術不佳,將會改變測定結果. 5. APTT,PT需乏血小板血漿.一般3000r/min離心10min後分離血漿.離心前注意標本量,離心後注意血漿的量(Hc t)以保證抗凝劑與標本量最適比例. 6. 試驗前檢查血漿是否有溶血,黃疸,脂血和出現凝塊.紅細胞膜含有磷脂,溶血標本具有與血小板第Ⅲ因子(磷脂)相似的凝血活性,這 種磷脂能縮短溶血血漿的APTT值.標本中如果出現凝塊,無論凝塊多麼小,均會影響試驗結果. 7. 報告方式:(1)以PT的秒(s)數報告.(2)以患者PT(s)/正常對照(s)的比(PTR)報告.(3)在口服葯物治療監 控時以INR報告.(4)ICSH規定,不再用百分比(活動度)報告.(5)APTT以秒報告. (五)繪制質控圖監測儀器,試劑 繪制質控圖並隨時分析其變化趨勢是質量控制的重要手段.在每天工作中,同時測正常和氨基常對照血漿(商品或自製),並用Le vey-Jeuny質控圖檢查有無失控.其步驟為,首先在常規的實驗條件下(包括高素質的實驗人員,規范的操作,穩定的儀器), 對質控品至少進行10次測量,計算出X及標准差,然後繪出質控圖,質控物的X值為基線,縱軸有X±2s.每次試驗時質控物與標本 一起檢測,並把當日的結果點在圖表上.下列的質量變化圖形有利於操作人員判斷結果是否有所失控.當失控時,按下述步驟(圖1)檢 查原因. 室間質評:各實驗室必須積極參加由檢驗中心組織的室間質評活動,以便了解本單位的結果准確性,因儀器和試劑不同,同一份質控 血漿可行到不同結果,應將回報結果根據儀器試劑分組比較. 五,參考值 文獻報道手工法APTT的參考值為31.5-43.5s,女性為32-43s.兩者無顯著差異. 受檢查的測定值較正常對照延長超過10s以上才有病理意義.手工法PT參考值為11-14s,超過正常對照3s為異常,PT R參考值為1±0.15. 因儀器,試劑的不同,會得到不同的結果,因此儀器法很難規定統一的參考值,各實驗室應根據自己的儀器,試劑等條件,自行測定 一批健康人,建立參考值.此後至少每年或條件有變化時,根據新的條件,重新建立參考值.至少選擇40名18-55歲之間男性及非 妊娠,月經期女性(男女各半)身健康,半月內無服葯史,在平靜休息的狀態采血且分開幾天采血和測定(以減少批間差異).在常規檢 測示本的條件下進行試驗.測定結果經統計學處理,計算標准差,取95%可信限為參考值范圍.
I. 1985年浙江省首先在哪種疾病的病人中發現艾滋病病毒感染者
1985年,美國一個公司在浙江展銷治療血友病的第Ⅷ因子凍干血漿,展銷後,這家公司將展品贈送給當地,當地選擇了幾位血友病患兒使用,不幸,這批凍干血漿在生產時被艾滋病感染者的血液污染,使用這批第Ⅷ因子凍干血漿的患兒不幸感染了艾滋病病毒(HIV)。這也是我國本土報告的最早發現的艾滋病感染者病例。
J. 誰談談羊水肺部栓塞
呼吸和心跳是維持人類生命的基本功能,呼吸循環衰竭的發生是急性羊水栓塞造成產婦死亡的主要原因。除此之外,羊水中含有促使血液凝固的物質,進入母體後還會引起凝血功能的障礙,常常繼而發生產後大出血,及皮膚、粘膜廣泛出血。人體的主要器官,腦、心、肝、腎由栓塞缺氧繼而發生功能障礙……