生物臨時保藏為什麼保存時間不長

⑴ 設計一個如何獲得微生物的純培養的實驗

具體看你要培養什麼類型的微生物呢？
大致就分以下幾步吧1.培養基的配製2.菌種的接種操作3,菌種的保藏
以細菌培養為例，實驗操作
1、制備牛肉膏蛋白腖固體培養基
⑴制備流程：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板
⑵實驗注意事項
①全程要求無菌操作：無菌技術除了用來防止實驗室的培養物被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。
②50℃左右開始倒平板：培養基用高壓滅菌鍋滅菌後，需冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。操作時使錐形瓶的瓶口通過火焰灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養基。
③冷卻後倒置的原因：平板冷凝後，培養皿蓋上會凝結小水珠，凝固後的培養基表面的濕度也比較高。將平板倒置，即可以使培養皿表面的水分更好的揮發，又可以防止培養皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。
④在倒平板過程中，不能將培養基濺在培養皿蓋與皿底之間的部位，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生。
2、純化大腸桿菌的接種方法（即微生物的接種方法）
微生物最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋塗布平板法。
⑴平板劃線法
①原理
連續劃線：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。由於劃線後，線條末端細菌數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。
②特點
操作簡單，但是單菌落不易形成。
③操作注意事項
A、第一次劃線及每次劃線之前接種環都需要灼燒滅菌，劃線操作結束時仍需灼燒接種環，每次灼燒的目的不同。
Ⅰ 第一次灼燒目的：避免接種環上可能存在的微生物污染培養物。
Ⅱ 每次劃線前灼燒：殺死上次劃線結束後接種環上殘留的菌種，使每次劃線的菌種來自上次劃線末端。
Ⅲ 劃線結束灼燒：殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。
B、灼燒接種環之後，要冷卻後才能伸入菌液，以免溫度太高，殺死菌種。
C、劃線時最後一個區域不要與第一個區域相連。
⑵稀釋塗布平板法
①原理
將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養皿表面形成單個菌落。
②特點
操作復雜，但是但菌落容易分離
③操作注意事項
A、將塗布器末端浸在盛有體積分數為70%的酒精的燒杯中。取出時，要讓多餘的酒精在燒杯中滴盡，然後將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃。且待酒精燃盡後，冷卻8～10s後，方能進行塗布。
B、操作中一定要注意防火！不要將過熱的塗布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。
C、在所用操作過程中都應在火焰附近進行。應從操作的各個細節上保證「無菌」。如：對塗布器等接種器皿進行消毒和滅菌、酒精燈與培養皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等。
3、結果分析與評價
⑴培養基制備成功的標准
如果未接種的培養基在恆溫箱中保溫1～2天後無菌落生長，說明培養基的制備是成功的，否則實驗失敗需要重新制備。
⑵接種操作成功的標准
如果培養基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，並符合大腸桿菌的菌落特點，則說明接種操作是符合要求的；如果培養基上出現了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達到要求，實驗失敗，需要分析原因，再次制備。
⑶及時細致地觀察與記錄
培養12h與24h後的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同，及時觀察記錄的同學會發現這一點，並能觀察到其他一些細微變化。可用圖表來記錄菌落的顏色、大小、形狀、數目等。
4、要點：菌種的保藏
⑴目的
菌種放在低溫環境中保藏的目的是降低新陳代謝速率，延緩菌種衰老。
⑵方法
①臨時保藏法：適用於頻繁使用的菌種。
方法：將菌種接種到固體斜面培養基上，在適宜的溫度下培養。當菌落長成以後，將試管置於4℃的冰箱中保藏。
缺點：保存時間不長，菌種容易被污染或產生變異。
②甘油冷凍管藏法：適用於需要長期保存的菌種。
方法：在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油後滅菌。將1mL培養的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻後，放在-20℃的冷凍箱中保藏。

⑵ 臨時保藏法和甘油管藏法是什麼意思

臨時保藏法：將菌種接種到固體斜面培養基上，然後在適宜的溫度下進行培養，當菌落長成之後，將試管放置於冰箱中（4°C）進行保藏即可。甘油管冷凍保藏法是利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達到保藏目的。

甘油管冷凍保藏法是將80%的甘油高壓蒸汽滅菌待用。將培養好的斜面菌種用無菌水製成高濃度的菌懸液。取1ml滅菌甘油放入與菌液充分混勻，使甘油濃度約為10%-30%，於-70℃下凍存。-20℃保存時間較短。或採用體積比為8：2的甘油-生理鹽水，加入新鮮培養的菌體肉湯，混合均勻後至-20℃冰箱保存。

注意事項

無論採用何種保藏方法，首先應該挑選典型菌種的優良純種來進行保藏，最好保藏它們的休眠體，如分生孢子、芽孢等。其次，應根據微生物生理、生化特點，人為地創造環境條件，使微生物長期處於代謝不活潑、生長繁殖受抑制的休眠狀態。這些人工造成的環境主要是乾燥、低溫和缺氧，另外，避光、缺乏營養、添加保護劑或酸度中和劑也能有效提高保藏效果。

⑶ 菌種保藏的常用方法及特點

（1）斜面低溫保藏。是一種最常用、最簡便的菌種保藏方法。首先將需要保藏的菌種接到斜面培養基上，在適宜的溫度條下培養，當菌絲健壯地長滿斜面時，即將此試管菌種取出，放置於4 ℃的冰箱中保藏。特點：
①簡單易行，適用於各類菇類菌種保藏，是目前生產及科研普遍採用的一種方法；②保藏時間短，需6個月轉接一次，轉管次數多菌絲變異的可能性大；③如改用橡皮塞並用石蠟扣，可保藏1年～3年。
（2）液體石蠟保藏。液體石蠟保藏也稱為礦油保藏，即用礦油覆蓋試管斜面試管保藏的方法。礦油是指無色、透明、黏稠、性質穩定、不易被微生物分解的石蠟油和液體石蠟，將其覆蓋在斜面菌種之上，可以隔絕空氣，防治培養基水分蒸發，抑制微生物的代謝活動，推遲細胞老化，從而達到長期保藏菌種的目的。特點：
①方法簡便易行，保藏條件不嚴格，保藏時間長，可作為長期保藏菌種的方法；②菌種必須垂直放，放置不方便。
（3）濾紙保藏。濾紙保藏是一種以無菌濾紙作為食用菌孢子吸附載體長期保藏菌種的方法，又稱濾紙孢子保藏法。特點：技術要求高，設備費用大，菌種不易衰老退化，菌種保藏時間長很少變異。
（4）自然基質保藏。自然基質保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含營養的自然生長的基質作培養基來保藏菌種的方法。自然基質很多，食用菌常用的自然基質有發酵的糞草、木屑及枝條基質等，取材方便，製作方法簡便，保藏時間也較長。使用時，只需取一塊、一粒或一條培養物放在新鮮的培養基上，並在適溫下培養即可。特點：方法簡便易行，保藏時間長。

⑷ 菌種保藏

菌種保藏方法大全

基本原理
微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處於最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。

低溫、乾燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據這三個因素而設計的。

保藏方法大致可分為以下幾種：

1．傳代培養保藏法

又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等（後者作保藏厭氧細菌用），培養後於4—6℃冰箱內保存。

2．液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。

3．載體保藏法

是將微生物吸附在適當的載體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而後進行乾燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4．寄主保藏法

用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代，此法相當於一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍乾燥保藏法進行保藏。

5．冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、乾冰酒精快速凍結（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷凍乾燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然後在減壓下利用升華現象除去水分（真空乾燥）。

有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍乾燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞碸等。

三、器材

細菌、酵母菌，放線菌和黴菌；

肉膏蛋白腖斜面培養基，滅菌脫脂牛乳，滅菌水，化學純的液體石蠟，甘油，五氧化二磷，河沙，瘦黃土或紅土，冰塊、食鹽，乾冰，95％酒精，10％鹽酸，無水氯化鈣；

滅菌吸管，滅菌滴管，滅菌培養皿，管形安瓿管，淚滴形安瓿管（長頸球形底），40目與 100目篩子，油紙，濾紙條（0．5×1．2cm），乾燥器，真空泵，真空壓力表，噴燈，L形五通管，冰箱，低溫冰箱（-30℃），液氮冷凍保藏器。
四、操作步驟、各保藏法的應用范圍及優缺點

下列各法可根據實驗室具體條件與需要選做。

1．斜面低溫保藏法

將菌種接種在適宜的固體斜面培養基上，待菌充分生長後，棉塞部分用油紙包紮好，移至2—8℃的冰箱中保藏。

保藏時間依微生物的種類而有不同，黴菌、放線菌及有芽孢的細菌保存2—4個月，移種一次。酵母菌兩個月，細菌最好每月移種一次。

此法為實驗室和工廠菌種室常用的保藏法，優點是操作簡單，使用方便，不需特殊設備，能隨時檢查所保藏的菌株是否死亡、變異與污染雜菌等。缺點是容易變異，因為培養基的物理、化學特性不是嚴格恆定的，屢次傳代會使微生物的代謝改變，而影響微生物的性狀；污染雜菌的機會亦較多。
2．液體石蠟保藏法

（1）將液體石蠟分裝於三角燒瓶內，塞上棉塞，並用牛皮紙包紮，1．05kg/cm2>，121．3℃滅菌30分鍾，然後放在40℃溫箱中，使水汽蒸發掉，備用。

（2）將需要保藏的菌種，在最適宜的斜面培養基中培養，使得到健壯的菌體或孢子。

（3）用滅菌吸管吸取滅菌的液體石蠟，注入已長好菌的斜面上，其用量以高出斜面頂端1cm為准（圖Ⅶ-12），使菌種與空氣隔絕。

（4）將試管直立，置低溫或室溫下保存（有的微生物在室溫下比冰箱中保存的時間還要長）。
此法實用而效果好。黴菌、放線菌、芽孢細菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1—2年，一般無芽孢細菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很難保藏的腦膜炎球菌，在37℃溫箱內，亦可保藏3個月之久。此法的優點是製作簡單，不需特殊設備，且不需經常移種。缺點是保存時必須直立放置，所佔位置較大，同時也不便攜帶。從液體石蠟下面取培養物移種後，接種環在火焰上燒灼時，培養物容易與殘留的液體石蠟一起飛濺，應特別注意。
3．濾紙保藏法

（1）將濾紙剪成0．5×1．2cm的小條，裝入0．6×8cm的安瓿管中，每管1—2張，塞以棉塞，1．05kg/cm2>，121．3℃滅菌30分鍾。

（2）將需要保存的菌種，在適宜的斜面培養基上培養，使充分生長。

（3）取滅菌脫脂牛乳1—2ml滴加在滅菌培養皿或試管內，取數環菌苔在牛乳內混勻，製成濃懸液。

（4）用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內，使其吸飽，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。

（5）將安瓿管放入內有五氧化二磷作吸水劑的乾燥器中，用真空泵抽氣至干。

（6）將棉花塞入管內，用火焰按圖Ⅶ-13熔封，保存於低溫下。

（7）需要使用菌種，復活培養時，可將安瓿管口在火焰上燒熱，滴一滴冷水在燒熱的部位，使玻璃破裂，再用鑷子敲掉口端的玻璃，待安瓿管開啟後，取出濾紙，放入液體培養基內，置溫箱中培養。
細菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保藏，前兩者可保藏2年左右，有些絲狀真菌甚至可保藏14—17年之久。此法較液氮、冷凍乾燥法簡便，不需要特殊設備。

4．沙土保藏法

（1）取河沙加入10％稀鹽酸，加熱煮沸30分鍾，以去除其中的有機質。

（2）倒去酸水，用自來水沖洗至中性。

（3）烘乾，用40目篩子過篩，以去掉粗顆粒，備用。

（4）另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土，加自來水浸泡洗滌數次，直至中性。

（5）烘乾，碾碎，通過100目篩子過篩，以去除粗顆粒。

（6）按一份黃土、三份沙的比例（或根據需要而用其他比例，甚至可全部用沙或全部用土）摻合均勻，裝入10×100mm的小試管或安瓿管中，每管裝1g左右，塞上棉塞，進行滅菌，烘乾。

（7）抽樣進行無菌檢查，每10支沙土管抽一支，將沙土倒入肉湯培養基中，37℃培養48小時，若仍有雜菌，則需全部重新滅菌，再作無菌試驗，直至證明無菌，方可備用。

（8）選擇培養成熟的（一般指孢子層生長豐滿的，營養細胞用此法效果不好）優良菌種，以無菌水洗下，製成孢子懸液。

（9）於每支沙土管中加入約0．5ml（一般以剛剛使沙土潤濕為宜）孢子懸液，以接種針拌勻。

（10）放入真空乾燥器內，用真空泵抽干水分，抽干時間越短越好，務使在12小時內抽干。

（11）每10支抽取一支，用接種環取出少數沙粒，接種於斜面培養基上，進行培養，觀察生長情況和有無雜菌生長，如出現雜菌或菌落數很少或根本不長，則說明製作的沙土管有問題，尚須進一步抽樣檢查。

（12）若經檢查沒有問題，用火焰熔封管口，放冰箱或室內乾燥處保存。每半年檢查一次活力和雜菌情況。

（13）需要使用菌種，復活培養時，取沙土少許移入液體培養基內，置溫箱中培養。

此法多用於能產生孢子的微生物如黴菌、放線菌，因此在抗生素工業生產中應用最廣，效果亦好，可保存2年左右，但應用於營養細胞效果不佳。
5．液氮冷凍保藏法

（1）准備安瓿管用於液氮保藏的安瓿管，要求能耐受溫度突然變化而不致破裂，因此，需要採用硼硅酸鹽玻璃製造的安瓿管，安瓿管的大小通常使用75×10mm的，或能容1．2mm液體的。

（2）加保護劑與滅菌保存細菌、酵母菌或黴菌孢子等容易分散的細胞時，則將空安瓿管塞上棉塞，1．05kg/cm2，121．3℃滅菌15分鍾：若作保存黴菌菌絲體用則需在安瓿管內預先加入保護劑如10％的甘油蒸餾水溶液或10％二甲亞碸蒸餾水溶液，加入量以能浸沒以後加入的菌落圓塊為限，而後再用1．05kg/cm2>，121．3℃滅菌15分鍾。

（3）接入菌種將菌種用10％的甘油蒸餾水溶液製成菌懸液，裝入已滅菌的安瓿管；黴菌菌絲體則可用滅菌打孔器，從平板內切取菌落圓塊，放入含有保護劑的安瓿管內，然後用火焰熔封。浸入水中檢查有無漏洞。

（4）凍結再將已封口的安瓿管以每分鍾下降1℃的慢速凍結至-30℃。若細胞急劇冷凍，則在細胞內會形成冰的結晶，因而降低存活率。
（5）保藏經凍結至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷凍保藏器（圖Ⅶ-14）的小圓筒內，然後再將小圓筒放入液氮保藏器內。液氮保藏器內的氣相為-150℃，液態氮內為-196℃。

（6）恢復培養保藏的菌種需要用時，將安瓿管取出，立即放入38—40℃的水浴中進行急劇解凍，直到全部融化為止。再打開安瓿管，將內容物移入適宜的培養基上培養。

此法除適宜於一般微生物的保藏外，對一些用冷凍乾燥法都難以保存的微生物如支原體、衣原體、氫細菌、難以形成孢子的黴菌、噬菌體及動物細胞均可長期保藏，而且性狀不變異。缺點是需要特殊設備。

6．冷凍乾燥保藏法

（1）准備安瓿管用於冷凍乾燥菌種保藏的安瓿管宜採用中性玻璃製造，形狀可用長頸球形底的，亦稱淚滴型安瓿管（圖Ⅶ-15），大小要求外徑6—7．5mm，長105mm，球部直徑9—11mm，壁厚0．6—1．2mm。也可用沒有球部的管狀安瓿管。塞好棉塞，1．05kg/cm2>，121．3℃滅菌30分鍾，備用。

（2）准備菌種，用冷凍乾燥法保藏的菌種，其保藏期可達數年至十數年，為了在許多年後不出差錯，故所用菌種要特別注意其純度，即不能有雜菌污染，然後在最適培養基中用最適溫度培養，使培養出良好的培養物。細菌和酵母的菌齡要求超過對數生長期，若用對數生長期的菌種進行保藏，其存活率反而降低。一般，細菌要求24—48小時的培養物；酵母需培養3天；形成孢子的微生物則宜保存孢子；放線菌與絲狀真菌則培養7—10天。

（3）制備菌懸液與分裝以細菌斜面為例，用脫脂牛乳2ml左右加入斜面試管中，製成濃菌液，每支安瓿管分裝0．2ml。
（4）冷凍冷凍乾燥器有成套的裝置出售，價值昂貴，此處介紹的是簡易方法與裝置，可達到同樣的目的。

將分裝好的安瓿管放低溫冰箱中冷凍，無低溫冰箱可用冷凍劑如乾冰（固體CO2>）酒精液或乾冰丙酮液，溫度可達-70℃。將安瓿管插入冷凍劑，只需冷凍4—5分鍾，即可使懸液結冰。

（5）真空乾燥為在真空乾燥時使樣品保持凍結狀態，需准備冷凍槽，槽內放碎冰塊與食鹽，混合均勻，可冷至-15℃。裝置儀器如圖Ⅶ-16，安瓿管放入冷凍槽中的乾燥瓶內。

抽氣一般若在30分鍾內能達到93．3Pa（0．7mmHg）真空度時，則乾燥物不致熔化，以後再繼續抽氣，幾小時內，肉眼可觀察到被乾燥物已趨乾燥，一般抽到真空度26．7Pa（0．2mmHg），保持壓力6—8小時即可。

（6）封口抽真空乾燥後，取出安瓿管，接在封口用的玻璃管上，可用L形五通管（圖Ⅶ-17）繼續抽氣，約10分鍾即可達到26．7Pa（0．2mmHg）。於真空狀態下，以煤氣噴燈的細火焰在安瓿管頸中央進行封口。封口以後，保存於冰箱或室溫暗處。

此法為菌種保藏方法中最有效的方法之一，對一般生活力強的微生物及其孢子以及無芽胞菌都適用，即使對一些很難保存的致病菌，如腦膜炎球菌與淋病球菌等亦能保存。適用於菌種長期保存，一般可保存數年至十餘年，但設備和操作都比較復雜。

⑸ 微生物的實驗室培養（高中生物）

奇怪，高中生物我以前怎麼沒學這些。還好我是研究微生物方向的。我就一字字打給你吧，希望你有用沒用看它個50%以上吧，別讓我白忙就行。以下回答絕對權威，表述有些未採用專用術語。

針對你所問的三個大范圍的問題，我只能簡單的介紹一下。
1、培養基就是微生物生長繁殖的物質和環境基礎，培養基含有氮源，碳源，水，生長因子等等。可以分成固體培養基，液體培養基，天然培養基，合成培養基，選擇培養基等等。不同培養基的功能不同，有的是活化微生物用的，有的是選擇微生物用的，有的則是保藏微生物用的。根據具體的目的和微生物的種類，選擇不同的培養基。而且選擇的培養基所用的營養成分的比例根據具體需要而定。至於保藏的方法，有短時保藏，也有長時間凍藏的，保藏方法也有很多，你所說的臨時保藏就是斜面試管4攝氏度保藏法，它是將微生物劃線於斜面試管培養基上，而後4攝氏度低溫保藏。是需要培養基的。甘油保藏法也有幾種不同的操作方法，有的是【無菌水+細菌】和甘油以不同比例混合成10%-40%不等的甘油濃度保藏液，有的則是【培養基（液體培養基）+細菌】和甘油按比例混合成10%-40%不等的甘油保藏液，而後於-20攝氏度條件下凍藏，保藏期通常數年。所以也是需要培養基的。這也是眾多培養基中的一小部分而已。第一個問題先告一段落吧。
2、有點暈，第二個問題更復雜。你所說的稀釋塗布平板法主要是用於細菌的分離和純化步驟上，由於菌懸液濃度過高時，接種於培養基上會出現密密麻麻的菌落，菌落之間相互重疊，也就失去了分離純化的意義。菌懸液濃度太低的話可能你塗布到平板上的菌懸液中沒有了你需要的細菌。也無法分離出目的細菌。
對於你說的一步到位，是多少濃度合適呢？你不知道，所以就只能10倍，100倍，1000倍，10000倍的稀釋下去，然後每個濃度的菌懸液都塗布相應的平板，這樣，就可以保證會有一種濃度比較合適，能夠分離純化出你要的細菌。當然了，如果你一次性稀釋的恰到好處，也是可以的，能分離到純的單菌落沒人敢否認你，不過就是這樣的成功率不高，或者說很難。這種方法也是挺麻煩的，不過稀釋也是很簡單的操作。不知道這樣說你能否明白？
3、第三個問題稍微好敘述些。原理：單純的水在-20攝氏度會結成冰晶，破壞細胞壁和細胞膜，使細菌死亡。甘油則不會形成冰晶，可以保持細胞壁和細胞膜的完整性。同時由於100%的甘油不能將細菌均勻混合，太黏了也不太會流動，所以要稀釋成10%-40%濃度的甘油，我們實驗室一般使用20%終濃度的甘油進行保種，注意是終濃度20%，不是濃度為20%。如果濃度低於15%或10%，同樣會有冰晶，會破壞細胞壁和膜。另一個面，細菌畢竟是細菌，不是高等生物，它們的抗逆性很強，-20攝氏度不會殺死它們，只是抑制了它們的活性，因而它們停止了生長，進入一種類似休眠的狀態，但條件合適時，它們會繼續繁殖。當然經過甘油-20攝氏度低溫保藏的菌種在使用之前是要經過活化的，注意了，這就是我前面所說的活化培養基，它是一種營養環境，目的是讓處於休眠的細菌醒過來，恢復活力。這再另一方面回答了你培養基有什麼用的問題。它還有活化細菌的作用。別說-20攝氏度不會凍死細菌，有些細菌在100度的溫度下都能存活的，當然這樣的細菌是嗜極細菌就是了。

說了這么多，也不知道你有沒認真看完，是否看明白了。別讓我辛辛苦苦打這么多字你就隨便瞄幾眼。～～～～還有就是如果看明白了，也希望你把分給我吧，最近問了些基因克隆方面的問題，分用了不少，所以現在正在掙分數。。。謝謝。

⑹ 為什麼水中保鮮不能把生物保存千萬年

生物進化的基礎是DNA的變異，生物進化的動力是生態環境的改變。
某些生物在數千萬年中都沒有改變，原因是對環境變化的適應能力強，或在幾千萬年時間內其生存環境變化不大。如水生動物變化就小，是因為水中的環境相對比較穩定。

⑺ 培養基的青黴素可以分離青黴

（1）抗生素有殺滅細菌的作用，而對酵母菌等真菌沒有傷害，所以在分離酵母菌時，可在選擇培養基中添加抗生素來抑制細菌的生長．獲得純凈酵母菌的關鍵是防止雜菌污染．
（2）若所得菌種暫時不使用，可用固體斜面培養基進行臨時保藏，由於菌種容易發生污染並變異，所以保存時間不能太長．為了防止污染環境，使用後的培養基要先用高壓蒸汽滅菌法滅菌後才能丟棄．
（3）果酒發酵的適宜溫度是18℃-25℃，可用酸性的重鉻酸鉀來檢測發酵液中是否有酒精產生．在發酵過程中，葡萄皮中的色素進入到發酵液中，所以釀出的葡萄酒為紅色的．
故答案為：（1）選擇 青黴素（或抗生素） 防止外來雜菌的入侵
（2）菌種容易被污染或產生變異 高壓蒸汽滅菌
（3）18℃-25℃酸性的重鉻酸鉀 葡萄皮中的色素進入到發酵液中

⑻ 為什麼在臨時保藏過程中，每3∼6個月都要重新將菌種從舊的培養基上轉移到新鮮的培養基上

臨時培養的培養基隨保存時間的延長而失去其營養價值，菌在其上就不能存活而死亡。在存放的過程中主要是培養基水分的散失，以及細菌利用其中能源導致能源缺乏。隨著冷凍時間的延長菌體也會受到傷害，所以要定期復壯一下，以保持菌體的生物活性、。

⑼ 跪求：微生物保存方法，各種保存方法的保存時間

1斜面低溫保藏法：有芽孢細菌存半年，無則一個月。2液體石蠟保藏：兩年。3沙土保藏：十年。4麩皮保藏：一年。5懸液保藏：一到兩年。6冷凍真空乾燥法：五到十五年。7液氮超低溫法：十到二十年。8低溫保藏法：一年。9甘油保藏法：半年