為什麼高效液相色譜保留時間過短
Ⅰ 操做液相色譜時影響保留時間的變化的因素有哪些
影響液相色譜保留時間的因素：
1、流動相的比例與極性。對於不同的柱子，分離度和保留時間往往都會有點差別，所以在操作的時候：a、可以適當調整流動相的比列，如甲醇—水（90:10），如分離效果與保留時間延長，可以調整88:12或者92:8或者95:5等。b、有時候還需要更換流動相的組成，甲醇就可以換成乙腈，看具體的實際操作而定。
2、柱子與柱溫。不同的柱子保留時間會有所差別，主要是載體的吸附性和固定液的純度不同，但保留時間一般不會相差太大，可以根據對照品或者標准品的保留時間指定。柱溫在HPLC操作時，一般就調整到室溫或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色譜一般調整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、進樣量。進樣量大，保留時間往往會延長。
5、輸液系統的壓力，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，保留時間將會縮短。
具體的影響因素還要在實際操作中慢慢考察，經過調整後才可以的到較好的色譜條件。
Ⅱ 高效液相做含測，保留時間差別大
是不是同一個樣品不同時間做出來的保留時間差別較大？
保留時間影響因素比較多，如果已經確定pH值影響不大，可以從以下幾個方面進行考慮：
1.流動相的比例，最好保證有機相的比例一致，保存及超聲脫氣的時候用封口膜封一下，減少有機相揮發，也不要放置太長時間
2.柱溫是否恆定，柱溫在一定程度上會影響保留值，最好設為定值，不要設為不控制
3.色譜柱有沒有更換，不同廠家的同一類型色譜柱由於填充技術、制備工藝的不同，在同樣色譜條件下對同一組分的保留情況會有所不同，即使是同一廠家的也會有這種情況
4.液相系統是否更換，不同的色譜儀的管路長短不同，會使走樣時柱壓不同，柱壓也會影響出峰時間和峰形，原理類似於加壓過柱
5.如果是梯度洗脫，要保證平衡時間足夠長，否則也會引起保留值改變
Ⅲ 在做高效液相色譜中，為什麼同樣的樣品，物質的出峰時間差這么多呢，第一次是16min，第二次是26min
要看你液相的條件前後是否一致。最主要的是流動相是否前後相同，流動相的不同最容易導致保留時間變化；另外要看一下流動相流速，柱溫等···
Ⅳ 高效液相色譜的出峰時間為什麼會推遲測的是同一個樣品，白天測比晚上測出峰時間推遲了。
壓力不會使出峰時間延後，出峰時間延後說明保留時間增長，與流動相的極性、柱溫有關系。柱溫不變，正相條件下，可能是流動相極性變弱了；反相條件下，可能是流動相極性變強了。流動相不變的前提下，看柱溫是不是偏低。
應該是流動相或者柱子的問題.流動相比例的變化可以排除,因為比例變化,A,B兩峰都會變化.
B峰不變化,A峰變化.應該是體系中有A物質敏感的微小變化.例如PH,極性等.
我覺得是流動相比例變了，最好的驗證方法是流動相配製在一個瓶子
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Ⅳ 液相色譜的保留時間總是不穩定，該怎麼解決
1、首先考慮是否有堵塞，查看各放溶劑瓶的過濾頭是否有臟，臟了後清洗，玻璃的30%稀硝酸泡，不銹鋼的可以超聲處理。
2、purge閥打開，看看單通道5ml/min流速，用水壓力多大，如果超過10bar就要更換purge閥的濾芯了，不過到5bar就比較臟了。
3、清洗下主動閥的濾芯。
4、如果這些都處理了，還是不行，那估計是比例閥的問題了。
壓力不穩，出峰時間前後飄，覺得進氣泡或者崩頭污染的可能性比較大，用脫氣過的異丙醇多沖一會試試。
有兩種可能,一是流動相里有汽泡,二是檢測器里殘留有汽泡.
壓力不穩這個就不正常，看是是不是有泄漏的地方，或者單向閥，比例閥有問題
純水和甲醇確實會使保留時間不太穩定的原因是 脫氣沒有完全，氣泡進入單向閥。所以引起了柱壓不穩。導致的是基線不穩和流速變化。所以造成了Rt前後不一致。
我認為主要是氣泡，用注射器吸滿甲醇，拆開單向閥進，出螺母，從入口出打入甲醇，然後出口出會有氣泡冒出。即可。
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Ⅵ 液相色譜峰保留時間後移
若乾的可能性，逐個排除：
如果是保留時間越來越短，可能是色譜柱不耐低pH，固定相有水解，應更換色譜柱，如：Agilent StableBond等；
如果是保留時間越來越長，可能是系統未平衡——先用純乙腈沖柱，再用流動相充分平衡；
如果是保留時間不穩定，且使用的LC是低壓多元泵，可能是比例閥閉鎖不全，導致其他通道的強洗脫流動相（如乙腈）進入流路——將其他通道換為水，並充分替換；
如果是保留時間越來越長，可能是壓力降低——有泄漏，或流路有氣泡。