mtt的孵育時間為什麼是4小時

『壹』 鍔犱簡mtt鍚4灝忔椂鏃墮棿寰堜弗鏍煎悧

鍦ㄥ姞鍏MTT鍚庯紝涓鑸鍒4灝忔椂鍗沖彲寰楀埌姣旇緝濂界殑緇撴灉錛屼絾鏄鏃墮棿榪囧緱澶闀誇箣鍚庡啀榪涜屾祴瀹氾紝浼氬圭粨鏋滀駭鐢熻宸錛屾墍浠ヤ笉瑕佽冭檻鏃墮棿榪囧緱澶闀垮啀榪涜屾祴瀹氥

『貳』 mtt瀹為獙鍘熺悊

鍣誨攽钃濓紝綆縐癕TT銆傜粏鑳炵嚎綺掍綋涓鐨勭惀鐝閰歌劚姘㈤叾鑳戒嬌澶栨簮鎬MTT榪樺師涓烘按涓嶆憾鎬х殑钃濈傳鑹茬粨鏅剁敳鑷 (Formazan)騫舵矇縐鍦ㄧ粏鑳炰腑錛岃屾葷粏鑳炴棤姝ゅ姛鑳姐備簩鐢插熀浜氱牅(DMSO)鑳芥憾瑙ｇ粏鑳炰腑鐨勭敳鑷滐紝鐢ㄩ叾鑱斿厤鐤媯嫻嬩華鍦570nm娉㈤暱澶勬祴瀹氬叾鍏夊惛鏀跺礆紝鍙闂存帴鍙嶆槧媧葷粏鑳炴暟閲忋傚湪涓瀹氱粏鑳炴暟鑼冨洿鍐咃紝MTT緇撴櫠褰㈡垚鐨勯噺涓庣粏鑳炴暟鎴愭ｆ瘮銆

4. 姣忓瓟鍔犲叆10ulMTT婧舵恫錛5mg/ml錛屽嵆0.5%MTT錛夛紝緇х畫鍩瑰吇4h銆傝嫢鑽鐗╀笌MTT鑳藉熷弽搴旓紝鍙鍏堢誨績鍚庡純鍘誨煿鍏繪恫錛屽皬蹇冪敤PBS鍐2-3閬嶅悗錛屽啀鍔犲叆鍚玀TT鐨勫煿鍏繪恫銆

5. 緇堟㈠煿鍏伙紝灝忓績鍚稿幓瀛斿唴鍩瑰吇娑層

6. 姣忓瓟鍔犲叆100ul浜岀敳鍩轟簹鐮滐紝緗鎽囧簥涓婁綆閫熸尟鑽10min錛屼嬌緇撴櫠鐗╁厖鍒嗘憾瑙ｃ傚湪閰惰仈鍏嶇柅媯嫻嬩華OD490nm澶勬祴閲忓悇瀛旂殑鍚稿厜鍊箋

7. 鍚屾椂璁劇疆璋冮浂瀛旓紙鍩瑰吇鍩恆丮TT銆佷簩鐢插熀浜氱牅錛夛紝瀵圭収瀛旓紙緇嗚優銆佺浉鍚屾祿搴︾殑鑽鐗╂憾瑙ｄ粙璐ㄣ佸煿鍏繪恫銆丮TT銆佷簩鐢插熀浜氱牅錛夈

『叄』 鍋歁TT瀹為獙 緇嗚優閾烘澘鎬繪槸涓嶅潎鍖 鏈変綍鑹鏂硅В鍐

鍋歁TT瀹為獙 緇嗚優閾烘澘鎬繪槸涓嶅潎鍖 鏈変綍鑹鏂硅В鍐
涓昏佹槸鍩轟簬SDH鐨勬椿鎬э紝鏌愪簺緇嗚弻鏈夎繎浼肩殑浠ｈ阿鐗規у彲鑳戒細騫叉壈緇撴灉錛

MTT瀹為獙:
灝嗙粏鑳炰互1脳105/ml嫻撳害鎺ョ嶄簬96瀛斿煿鍏繪澘錛100渭l/瀛旓紝璁8瀛旈噸澶嶏紝瀛佃偛榪囧滐紱緇嗚優璐村佸悗錛岀敤鏃犺娓呭煿鍏繪恫瀛佃偛24h錛屼嬌緇嗚優鍚屾ワ紱寮冧笂娓呮恫錛屼互鍩瑰吇娑查厤鍒朵笉鍚屾祿搴︾殑鑽鐗100渭l/瀛旓紝瀛佃偛24h錛屽姞鍏MTT娑50渭l/瀛旓紝緇х畫瀛佃偛4h錛屽掔疆鐩稿樊鏄懼井闀滀笅瑙傚療錛屽彲瑙佽摑緔鑹查拡鐘剁粨鏅訛紱鍚稿幓涓婃竻錛屽姞鍏DMSO100渭l/瀛旓紝瀹ゆ俯鎸鑽15min錛屽緟緇撴櫠瀹屽叏婧惰В錛岄叾鏍囦華550nm娉㈤暱媯嫻嬪惛鍏夊害鍊箋

娉 MTT鍙閫忚繃緇嗚優鑶滆繘鍏ョ粏鑳炲唴錛屾椿緇嗚優綰跨矑浣撲腑鐨勭惀鐝鑴辨阿閰惰兘浣垮栨簮鎬MTT榪樺師涓洪毦婧朵簬姘寸殑钃濈傳鑹茬殑緇撴櫠騫舵矇縐鍦ㄧ粏鑳炰腑錛岀粨鏅剁墿鑳借浜岀敳鍩轟簹鐮滐紙DMSO錛夋憾瑙ｏ紝鐢ㄩ叾鑱斿厤鐤媯嫻嬩華嫻嬪畾鍏跺厜鍚告敹鍊礆紝鍙闂存帴鍙嶆槧緇嗚優鏁伴噺銆