為什麼誘導時間越長融合率越高
發布時間: 2023-11-11 06:32:59
㈠ 用IPTG誘導表達的時間是否越長越好,為什麼
用IPTG誘導表達的時間不是越長越好,因為只有在特定的環境信號(加入IPTG)刺激下,目的基因才會被激活,之後才會產生大量的代謝表達產物,收集有較多表達量的菌體。
如果不用IPTG的話,大部分目的蛋白是不會表達的,有少部分可能會有極少量的表達,稱之為泄漏表達。
科學研究:
IPTG常用於需要誘導β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與X-Gal或Bluo-Gal結合使用,用於重組細菌菌落的藍白篩選,這些菌落可以誘導lac操縱子在大腸桿菌中的表達。IPTG與lacI阻遏蛋白結合並改變其構象而發揮作用,防止β-半乳糖苷酶編碼基因lacZ的抑制。
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