為什麼液相色譜保留時間改變

⑴ 液相色譜的保留時間總是不穩定，該怎麼解決

1、首先考慮是否有堵塞，查看各放溶劑瓶的過濾頭是否有臟，臟了後清洗，玻璃的30%稀硝酸泡，不銹鋼的可以超聲處理。
2、purge閥打開，看看單通道5ml/min流速，用水壓力多大，如果超過10bar就要更換purge閥的濾芯了，不過到5bar就比較臟了。
3、清洗下主動閥的濾芯。
4、如果這些都處理了，還是不行，那估計是比例閥的問題了。

壓力不穩，出峰時間前後飄，覺得進氣泡或者崩頭污染的可能性比較大，用脫氣過的異丙醇多沖一會試試。
有兩種可能,一是流動相里有汽泡,二是檢測器里殘留有汽泡.
壓力不穩這個就不正常，看是是不是有泄漏的地方，或者單向閥，比例閥有問題

純水和甲醇確實會使保留時間不太穩定的原因是 脫氣沒有完全，氣泡進入單向閥。所以引起了柱壓不穩。導致的是基線不穩和流速變化。所以造成了Rt前後不一致。
我認為主要是氣泡，用注射器吸滿甲醇，拆開單向閥進，出螺母，從入口出打入甲醇，然後出口出會有氣泡冒出。即可。

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⑵ 液相色譜 保留時間推後的原因 有誰知道問題所在呢

色譜分析是賀掘者依靠對比保留時間來進行定性的，保留時間變化超出識別時間范圍工作站就無法定性，而保留時間推後的原因是組份在色譜柱中滯留時間變禪薯長了，原因可能如下：
1、色譜柱更換了，更換成具有保留能力更強的柱散閉子，比如粒度變小，柱長變長，填料更換等；
2、流動相類型、比例或者流速變慢，導致對組份的吸附能力更強，流速變慢也會導致組份在柱子時保留時間更長；

⑶ 液相色譜保留時間漂移是什麼原因造成的求答案

保留時間漂移的故障排除
保留時間不重現有兩種不同的情況：既保留時間漂移和保留時間波動。前者是指保留時間僅沿單方向發生變化，而後者指保留時間無固定規律的波動。將此兩種情況區分開來對找到問題的原因往往很有幫助。如，保留時間的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留時間的無規律波動。事實上，保留時間漂移的多半原因是不同機理的色譜柱老化，如固定相流失（例如通過水解），色譜柱污染（由樣品或流動相所致）等。保留時間漂移的幾種最常見的原因如下：一色譜柱平衡如果我們觀察到保留時間漂移，首先應考慮色譜柱是否已用流動相完全平衡。通常平衡需要10-20個柱體積的流動相，但如果在流動相中加入少量添加劑（如離子對試劑）則需要相當長的時間來平衡色譜柱。
流動相污染也可能是原因之一。溶於流動相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上，從而造成保留時間的漂移。應注意：水是很容易污染的流動相成分。二固定相穩定性
固定相的穩定性都是有限的，即使在推薦的PH范圍內使用，固定相也會慢慢水解。例如，硅膠基質在pH4時水解穩定性最好。水解速度與流動相類型和配體有關。雙官能團配體和三官能團配體比單官能團配體的鍵合相要穩定；長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩定；烷基鍵合相比氰基鍵合相穩定的多。
經常清洗色譜柱亦會加速色譜柱固定相的水解。其他硅膠基質鍵合相在水溶液環境中也可以發生水解，如氨基鍵合相等。三色譜柱污染保留時間漂移的另一個常見原因是色譜柱污染。
HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器，它可以過濾並吸附流動相攜帶的任何物質。污染源可以是：流動相本身，流動相容器，連接管、泵、進樣器和儀器密封墊，以及樣品等。通常通過實驗可判斷污染的來源。
樣品中如果存在色譜柱上保留很強的組分，就可能是使保留時間漂移的潛在根源。這些根源通常是樣品基質。如：配葯中的賦形劑，生化樣品（如血清）中的蛋白及類脂類化合物，食品樣品中的澱粉，環境水樣中的腐殖酸等。通常樣品中的強保留組分具有較高的分子量，在此情況下，保留時間漂移的同時或其後會有反壓的增加。可以通過使用固相提取（SPE）等樣品前處理方法來去除樣品基質的影響。
避免色譜柱污染最簡單的方法是防患於未然。相比之下，找到問題的所在並設計有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑，但並非所有污染物都可以在流動相中溶解。如THF可去除反相色譜柱中的許多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。
DMSO常常用於去除反相色譜柱中的蛋白。
使用保護柱是個非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時採用的辦法。四流動相組成流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因。如流動相中易揮發組分的揮發及循環使用流動相等。五疏水坍塌當小孔徑、端基封口良好的反相填料色譜柱使用接近100%的水為流動相時，有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或完全不保留的現象，這就是疏水坍塌。此現象是由流動相不浸潤固定相表面而致。挽救的辦法實現用含大量有機組分的流動相浸潤固定相，再用高水含量的流動相進行平衡。由是色譜柱長期儲存也會發生此現象。使用內嵌極性基團的反相色譜柱（如
Waters SymmetryShield RP
色譜柱）或非端基封口的色譜柱（如
色譜柱）也可避免發生坍塌。

⑷ 液相調整梯度及ph為什麼會改變保留時間

一般來說液相的操作不會導致保留時間的變化。
首先你得保證流動相是同一個。如果換過流動相就沒有可槐啟比性了，因為配製過程鉛敗如會有誤差的。
第二，你得保證平衡。有的時候色譜柱和緩沖液平衡相對較慢。通常半小時平衡好的，但是有的時候需要一小時。如果沒有平衡好就進樣了，那麼保留時間就會不準確。最好再連續進樣幾次，看看保留時間的變化趨勢。如果逐漸趨於平穩，那麼就用最後兩次。
第三，觀察一枯此下儀器的柱壓。有時候儀器壓力不穩，可能導致保留時間不對。如果有壓力監控最好打開，看看壓力的變化趨勢。
第四，進樣口進樣針重新清洗幾次。如果殘留著一些酸鹼溶液的話，混入這次的樣品中，pH值可能也會導致保留時間的變化。
出現情況只能慢慢地找原因，一條一條排查看看。

⑸ 影響高效液相色譜組分保留時間因素

色譜柱類型，這是最關鍵的因素，關繫到分離效率的好壞，也關乎各個組分的保留時間；
流動相組成，改變流動相組成，就可以改變流動相的極性(正相、反相色譜)或者流動相的離子比例（離子色譜），從而有效改善不同組分的保留時間；
流動相流速，一般在保證分離度的前提下，流動相流速越快，保留時間越短；
流動相中含鹽量，對於某些有機鹼或者有機酸來說，調變流動相中含鹽量可以有效改變分離效率，從而改變保留時間；
流動相溫度，溫度越高，保留時間提前。

⑹ 怎樣解決液相色譜保留時間的漂移為什麼會漂移

保留時間飄移可能的原因有：
1 柱子沒有達到平衡；
解決：平衡更長的時間來解決。
2 實驗環境溫度發生變化；保留時間和溫度有很大的關系，一般溫度高，出峰快。
解決：這里的溫度不僅指柱溫，其實還包括流動相溫度。柱溫一般都有規定，用柱溫箱就可以平衡了，但是流動相溫度沒有規定，很多人不知道也要保持不變。在空調房裡做，保持住室溫不變，一般會好很多。
3 流動相比例發生變化；
解決：配置時盡量混合均勻；配置時盡量保證比例沒有偏離；使用時盡量保證導管介面處不揮發泄漏；長時間不用的要密封，最好廢棄不用。
4 長期使用後柱子損耗；
解決：重新，再生柱子，或更換新的。

⑺ 操做液相色譜時影響保留時間的變化的因素有哪些

影響液相色譜保留時間的因素：
1、流動相的比例與極性。對於不同的柱子，分離度和保留時間往往都會有點差別，所以在操作的時候：a、可以適當調整流動相的比列，如甲醇—水（90:10），如分離效果與保留時間延長，可以調整88:12或者92:8或者95:5等。b、有時候還需要更換流動相的組成，甲醇就可以換成乙腈，看具體的實際操作而定。
2、柱子與柱溫。不同的柱子保留時間會有所差別，主要是載體的吸附性和固定液的純度不同，但保留時間一般不會相差太大，可以根據對照品或者標准品的保留時間指定。柱溫在HPLC操作時，一般就調整到室溫或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色譜一般調整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、進樣量。進樣量大，保留時間往往會延長。
5、輸液系統的壓力，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，保留時間將會縮短。
具體的影響因素還要在實際操作中慢慢考察，經過調整後才可以的到較好的色譜條件。

⑻ 求助：液相色譜峰保留時間後移，怎麼回事

由於不知道是整體後移還是部分後移，我把兩個問題都寫出來了

保留時間漂移
首先走樣之前色譜柱是否平衡好，壓力是否穩定，還有，流動相的PH值會影響色譜柱的固定相，必須在范圍內，否則固定相可能會溶解，還有就是色譜柱是不是被污染了，強保留組分可能降低或者影響柱效。
及時更換流動相也是必要的，有些流動相會隨著時間而改變，影響檢測，還有就是如果用的是疏水的色譜柱（如C18），不能用純水相洗，防止疏水坍塌。
保留時間波動
色譜柱的溫度是影響關鍵，需與室內溫度上下波動二度為宜，還有就是流速是否穩定，泵中是否有氣泡。是否平衡好，流動相是否不恰當等。