為什麼液相保留時間前後漂移
㈠ 液相色譜的保留時間總是不穩定,該怎麼解決
⑴溫度控制不好,向前或向後單向漂移,解決方法是採用恆溫裝置,保持柱溫恆定。
⑵流動相組成發生變化,向前或向後單向漂移,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。
⑶流動相未平衡好(如緩沖溶液或離子對試劑,尤其是低濃度的鹽溶液),向前或向後單向漂移,需對柱子進行更長時間的平衡。
⑷泵或者管路中有氣泡,前後漂移,可通過排氣等將氣泡趕出。
⑸泵單向閥中的寶石球磨損,造成流動相倒流,壓力不穩定,保留時間前後漂移。解決辦法是更換部件。
⑹泵比例閥控制失靈,不同流路流動相比例不斷變化,保留時間前後漂移。解決方法是更換部件。
⑺泵活塞桿密封墊老化,流動相滲漏。解決辦法是換密封墊。
⑻在線混合器混合能力變差,不接梯度測試混合能力,並同手工配置流動相比較。
⑼系統管路有堵塞,引起壓力不穩,導致保留時間漂移。
⑽吸濾頭堵塞,流動相抽取受阻。清洗或更換吸濾頭。
⑾色譜柱樣品超載,解決辦法是減少進樣量。
⑿色譜柱鍵合的固定相流失,注意流動相pH值在容許范圍。
⒀硅膠填料的位點被活化,使用可修飾流動相,加三乙胺或使用鹼滅活柱等。
㈡ 液相色譜的保留時間總是不穩定,該怎麼解決
1、首先考慮是否有堵塞,查看各放溶劑瓶的過濾頭是否有臟,臟了後清洗,玻璃的30%稀硝酸泡,不銹鋼的可以超聲處理。
2、purge閥打開,看看單通道5ml/min流速,用水壓力多大,如果超過10bar就要更換purge閥的濾芯了,不過到5bar就比較臟了。
3、清洗下主動閥的濾芯。
4、如果這些都處理了,還是不行,那估計是比例閥的問題了。
壓力不穩,出峰時間前後飄,覺得進氣泡或者崩頭污染的可能性比較大,用脫氣過的異丙醇多沖一會試試。
有兩種可能,一是流動相里有汽泡,二是檢測器里殘留有汽泡.
壓力不穩這個就不正常,看是是不是有泄漏的地方,或者單向閥,比例閥有問題
純水和甲醇確實會使保留時間不太穩定的原因是 脫氣沒有完全,氣泡進入單向閥。所以引起了柱壓不穩。導致的是基線不穩和流速變化。所以造成了Rt前後不一致。
我認為主要是氣泡,用注射器吸滿甲醇,拆開單向閥進,出螺母,從入口出打入甲醇,然後出口出會有氣泡冒出。即可。
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㈢ 液相出峰時間漂移是怎麼回事
看是什麼樣的飄移,如果是因為梯度引起的,如果峰型好的話,當然可以正常進行計算,如果是因為儀器本身系統不穩定造成的,那就不能正常進行計算。
㈣ 求助:液相色譜峰保留時間後移,怎麼回事
由於不知道是整體後移還是部分後移,我把兩個問題都寫出來了
保留時間漂移
首先走樣之前色譜柱是否平衡好,壓力是否穩定,還有,流動相的PH值會影響色譜柱的固定相,必須在范圍內,否則固定相可能會溶解,還有就是色譜柱是不是被污染了,強保留組分可能降低或者影響柱效。
及時更換流動相也是必要的,有些流動相會隨著時間而改變,影響檢測,還有就是如果用的是疏水的色譜柱(如C18),不能用純水相洗,防止疏水坍塌。
保留時間波動
色譜柱的溫度是影響關鍵,需與室內溫度上下波動二度為宜,還有就是流速是否穩定,泵中是否有氣泡。是否平衡好,流動相是否不恰當等。
㈤ 怎樣解決液相色譜保留時間的漂移為什麼會漂移
保留時間飄移可能的原因有:
1 柱子沒有達到平衡;
解決:平衡更長的時間來解決。
2 實驗環境溫度發生變化;保留時間和溫度有很大的關系,一般溫度高,出峰快。
解決:這里的溫度不僅指柱溫,其實還包括流動相溫度。柱溫一般都有規定,用柱溫箱就可以平衡了,但是流動相溫度沒有規定,很多人不知道也要保持不變。在空調房裡做,保持住室溫不變,一般會好很多。
3 流動相比例發生變化;
解決:配置時盡量混合均勻;配置時盡量保證比例沒有偏離;使用時盡量保證導管介面處不揮發泄漏;長時間不用的要密封,最好廢棄不用。
4 長期使用後柱子損耗;
解決:重新,再生柱子,或更換新的。
㈥ 液相色譜保留時間漂移是什麼原因造成的求答案
保留時間漂移的故障排除
保留時間不重現有兩種不同的情況:既保留時間漂移和保留時間波動。前者是指保留時間僅沿單方向發生變化,而後者指保留時間無固定規律的波動。將此兩種情況區分開來對找到問題的原因往往很有幫助。如,保留時間的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留時間的無規律波動。事實上,保留時間漂移的多半原因是不同機理的色譜柱老化,如固定相流失(例如通過水解),色譜柱污染(由樣品或流動相所致)等。保留時間漂移的幾種最常見的原因如下:一色譜柱平衡如果我們觀察到保留時間漂移,首先應考慮色譜柱是否已用流動相完全平衡。通常平衡需要10-20個柱體積的流動相,但如果在流動相中加入少量添加劑(如離子對試劑)則需要相當長的時間來平衡色譜柱。
流動相污染也可能是原因之一。溶於流動相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上,從而造成保留時間的漂移。應注意:水是很容易污染的流動相成分。二固定相穩定性
固定相的穩定性都是有限的,即使在推薦的PH范圍內使用,固定相也會慢慢水解。例如,硅膠基質在pH4時水解穩定性最好。水解速度與流動相類型和配體有關。雙官能團配體和三官能團配體比單官能團配體的鍵合相要穩定;長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩定;烷基鍵合相比氰基鍵合相穩定的多。
經常清洗色譜柱亦會加速色譜柱固定相的水解。其他硅膠基質鍵合相在水溶液環境中也可以發生水解,如氨基鍵合相等。三色譜柱污染保留時間漂移的另一個常見原因是色譜柱污染。
HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器,它可以過濾並吸附流動相攜帶的任何物質。污染源可以是:流動相本身,流動相容器,連接管、泵、進樣器和儀器密封墊,以及樣品等。通常通過實驗可判斷污染的來源。
樣品中如果存在色譜柱上保留很強的組分,就可能是使保留時間漂移的潛在根源。這些根源通常是樣品基質。如:配葯中的賦形劑,生化樣品(如血清)中的蛋白及類脂類化合物,食品樣品中的澱粉,環境水樣中的腐殖酸等。通常樣品中的強保留組分具有較高的分子量,在此情況下,保留時間漂移的同時或其後會有反壓的增加。可以通過使用固相提取(SPE)等樣品前處理方法來去除樣品基質的影響。
避免色譜柱污染最簡單的方法是防患於未然。相比之下,找到問題的所在並設計有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑,但並非所有污染物都可以在流動相中溶解。如THF可去除反相色譜柱中的許多污染物,但蛋白在THF中就不能溶解。
DMSO常常用於去除反相色譜柱中的蛋白。
使用保護柱是個非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時採用的辦法。四流動相組成流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因。如流動相中易揮發組分的揮發及循環使用流動相等。五疏水坍塌當小孔徑、端基封口良好的反相填料色譜柱使用接近100%的水為流動相時,有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或完全不保留的現象,這就是疏水坍塌。此現象是由流動相不浸潤固定相表面而致。挽救的辦法實現用含大量有機組分的流動相浸潤固定相,再用高水含量的流動相進行平衡。由是色譜柱長期儲存也會發生此現象。使用內嵌極性基團的反相色譜柱(如
Waters SymmetryShield RP
色譜柱)或非端基封口的色譜柱(如
色譜柱)也可避免發生坍塌。
㈦ 同一原料液相圖譜與前個月相比主峰保留時間不一致為什麼
你這么說太籠統了,保留時間不一致,那麼相差多久算是一致?7min變到8min?還是15min變到18min?一般來說保留時間靠前,變動會比較小。保留時間靠後,變動會比較大。比如保留時間是20min的物質,前後變動2-3min都是正常的。
另外實驗儀器和配置過程也會有誤差出現。比如換了一根色譜柱。或者同一根色譜柱用著用著老化了,都會導致保留時間的變化。還有流動相,比如反相色譜,有機相加多了,保留時間就會前移。包括水相pH值。尤其是你的流動相裡面有離子對試劑,那麼影響就更大了。可能多個0.Xg,保留時間就能有很大波動的。這是一個實驗的耐用性問題。
有的時候,你的被測物質也會有很大的關系。比如你的被測物質是鹼性,那麼流動相的pH值稍有變化,可能主峰就會前後漂移的很厲害。具體情況需要具體分析了。
再有,如果是原料液測定,我覺得沒有必要太過糾結於保留時間。一般對於保留時間的要求就是:要求被測物質和對照品的保留時間一致,同一天測定保留時間前後不超過1min(有的時候可以放寬到2-3min)
你這個是上個月測定的,如果相差不是太多沒有什麼問題的。
㈧ 保留時間漂移的原因
保留時間飄移可能的原因有:1柱子沒有達到平衡;解決:平衡更長的時間來解決。2實驗環境溫度發生變化;保留時間和溫度有很大的關系,一般溫度高,出峰快。解決:這里的溫度不僅指柱溫,其實還包括流動相溫度。柱溫一般都有規定,用柱溫箱就可以平衡了,但是流動相溫度沒有規定,很多人不知道也要保持不變。在空調房裡做,保持住室溫不變,一般會好很多。3流動相比例發生變化;解決:配置時盡量混合均勻;配置時盡量保證比例沒有偏離;使用時盡量保證導管介面處不揮發泄漏;長時間不用的要密封,最好廢棄不用。4長期使用後柱子損耗;解決:重新,再生柱子,或更換新的。
㈨ 液相色譜峰保留時間後移
若乾的可能性,逐個排除:
如果是保留時間越來越短,可能是色譜柱不耐低pH,固定相有水解,應更換色譜柱,如:Agilent StableBond等;
如果是保留時間越來越長,可能是系統未平衡——先用純乙腈沖柱,再用流動相充分平衡;
如果是保留時間不穩定,且使用的LC是低壓多元泵,可能是比例閥閉鎖不全,導致其他通道的強洗脫流動相(如乙腈)進入流路——將其他通道換為水,並充分替換;
如果是保留時間越來越長,可能是壓力降低——有泄漏,或流路有氣泡。