為什麼DGGE電泳時間那麼長

Ⅰ 膠體越穩定電泳時間約長

不對，膠體電泳速度的快慢與帶電粒子的大小、形狀、粒表面的電荷數目、溶劑電解質的種類、離子強度、以及PH值、溫度和所加的電壓等有關。
膠體是一種分散體系的，包含了兩種不同狀態的物質。一種是分散相，另一種是連續相。分散質的粒子直徑在1~100nm范圍，介於粗分散體系和溶液之間，是一種高度分散的多相不均勻體系。
電泳意為攜帶電子，是指分散質粒子在空間勻強電場影響下相對於流體的運動。正電荷粒子(陽離子)的電泳有時被稱為陽離子電泳法，而負電荷粒子(陰離子)的電泳有時被稱為陰離子電泳。

Ⅱ 凝膠電泳和DGGE的區別

變性梯度凝膠電泳：雙鏈DNA 分子在一般的聚丙烯醯胺凝膠電泳時，其遷移行為決定於其分子大小和電荷。不同長度的DNA 片段能夠被區分開，但同樣長度的DNA 片段在膠中的遷移行為一樣，因此不能被區分。DGGE/TGGE 技術在一般的聚丙烯醯胺凝膠基礎上，加入了變性劑（尿素和甲醯胺）梯度，從而能夠把同樣長度但序列不同的DNA 片段區分開來。一個特定的DNA 片段有其特有的序列組成，其序列組成決定了其解鏈區域(meltingdomain, MD)和解鏈行為(melting behavior) 。一個幾百個鹼基對的DNA 片段一般有幾個解鏈區域，每個解鏈區域有一段連續的鹼基對組成。當變性劑濃度逐漸增加達到其最低的解鏈區域濃度時，該區域這一段連續的鹼基對發生解鏈。當濃度度再升高依次達到各其他解鏈區域濃度時，這些區域也依次發生解鏈。直到變性劑濃度達到最高的解鏈區域濃度後，最高的解鏈區域也發生解鏈，從而雙鏈DNA 完全解鏈。

Ⅲ 我的樣品中加入了甘油，在跑電泳的時候，整個個電泳過程耗費時間太長，跑不下來

需要確認幾個方面的原因：
1.是否有未加甘油的樣品的電泳結果，對照說明此問題是否由甘油引起。例如marker的結果。
2. 電泳凝膠的配方是否有問題，如果以前也按這個比例成功電泳過，是偶發的情況，很可能是凝膠配製過程中出現問題
3. 電泳過程中，電壓和電流與往常相比是否正常？如果發現在同樣電壓設置下，電流有異常，則一方面要檢查電泳緩沖液是否新配，或者是電泳槽是不是有什麼放接觸不是很好。

甘油由於增加了樣品的粘稠度，確實會使得電泳後樣品的條帶與平常有差異。但是由於所給信息太少，也沒有對照說明，只能通過上面的排除法去看有可能是什麼原因引起的。

Ⅳ PCR-DGGE是什麼

聚合酶鏈式反應和變性梯度凝膠電泳相結合的方法，通常用來分析樣品中微生物菌落構成的多樣性！

Ⅳ 大分子量蛋白 電泳時間

大分子量蛋白，電泳時間：

SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳根據分子量大小分離蛋白質，分子量小的快，瓊脂糖凝膠電泳根據硫酸根與某些蛋白質作用分離蛋白，有可能分子量大的快。

降低蛋白電泳中丙烯醯胺的濃度，低濃度的蛋白電泳膠更有利於大分子量蛋白的分離，延長電泳的時間，即使溴酚藍指示線已經到底也可以繼續電泳一段時間，這樣大分子量的蛋白會分得更開。

電泳現象

在確定的條件下，帶電粒子在單位電場強度作用下，單位時間內移動的距離（即遷移率）為常數，是該帶電粒子的物化特徵性常數。不同帶電粒子因所帶電荷不同，或雖所帶電荷相同但荷質比不同，在同一電場中電泳，經一定時間後，由於移動距離不同而相互分離。分開的距離與外加電場的電壓與電泳時間成正比。

Ⅵ DGGE的原理什麼,當泳動到與DNA變性所需變性劑濃度一致的凝膠位置時,相對應的DNA發生解鏈變性,導致電泳遷

DNA發生解鏈變性時DNA分子的超螺旋結構被破壞,從而導致電泳遷移速率降低
超螺旋結構的DNA分子在凝膠中的遷移速率是最快的

Ⅶ 為什麼電泳跑的特別延伸

蛋白質的分子量較大，則電泳時間可以適當延長，以使目的蛋白質有足夠的遷移率和其它的蛋白質分開，反之亦然。
跑電泳常見條帶問題分析；
一、微笑形區帶（兩邊翹起，中間凹下）：處理辦法：待其充分凝固再做實驗。
二、皺眉形區帶（兩邊向下，中間鼓起）：處理辦法：可在兩板之間加入適量緩沖液，以排除氣泡。
三、區帶拖尾：處理辦法：加樣前離心；選擇適當的樣品緩沖液，加適量樣品促溶劑；電泳緩沖液放置時間過長，重新配製；降低凝膠濃度。
四、區帶出現紋理：處理辦法：加樣前離心，加適量樣品促溶劑。
五、鬼帶：處理辦法：加熱煮沸後再添加適量的DTT或Beta巰基乙醇，以補充不足的還原劑；加適量EDTA來阻止還原劑的氧化。
六、溴酚藍不能起到指示作用：處理辦法：更換正確pH值的Buffer，降低分離膠濃度。
七、區帶很粗：處理辦法：適當增加濃縮膠長度，保證濃縮膠貯液的pH正確（6.8），適當降低電壓。
八、電泳電壓很高而電流很低：處理辦法：電泳槽正確裝配。

Ⅷ 變性梯度凝膠電泳(DGGE)實驗方法步驟哪裡有

在現代遺傳學中DNA 序列突變的分析佔有十分重要的地位。由於在較大DNA 序列中檢測一個細微的突變非常困難，因而現在人們建立了幾種方法來解決這一難題。變性梯度凝膠電泳(DGGE)能把長度相同而核苷酸順序不同的雙鏈DNA 片段分開。這種方法利用了DNA 分子從雙螺旋型變成局部變性型時電泳遷移率會下降的現象。不同的DNA 片段發生這種變化所需梯度不同。DGGE 的凝膠中沿電場方向變性劑(甲醛和尿素)含量遞增，當DNA 片段通過這種變性劑遞增的凝膠時，不同分子的電泳遷移率在不同區域會發生降低。這就可使核苷酸順序不同DNA 片段分開。此方法可作為測序的初始步驟在雜合個體中分離等位基因。許多研究表明變性遞度凝膠電泳分離能力很強，它可以把相差僅1bp 的DNA 片段分開。變性梯度凝膠電泳(DGGE)實驗方法步驟，生物幫上面有詳細步驟， http://www.bio1000.com/zt/cell/ 細胞生物學,幹細胞研究。

Ⅸ PCR-DGGE實驗原理和優點是什麼

博凌科為-為你解答：變性梯度凝膠電泳（DGGE）是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。核酸的雙螺旋結構在一定條件下可以解鏈，稱之為變性。核酸50%發生 變性時的溫度稱為熔解溫度（Tm）。Tm值主要取決於DNA分子中GC含量的多少。DGGE將凝膠設置在雙重變性條件下：溫度 50~60 ℃，變性劑0~100%。當一雙鏈DNA片段通過一變性劑濃度呈梯度增加的凝膠時，此片段遷移至某一點變性劑濃度恰好相當於此段DNA的低熔點區的Tm 值，此區便開始熔解，而高熔點區仍為雙鏈。這種局部解鏈的DNA分子遷移率發生改變，達到分離的效果。Tm的改變依賴於DNA序列，即使一個鹼基的替代就 可引起Tm值的升高和降低。因此，DGGE可以檢測DNA分子中的任何一種單鹼基的替代、移碼突變以及少於10個鹼基的缺失突變。為了提高 DGGE的突變檢出率，可以人為地加入一個高熔點區GC夾。GC夾（GC clamp）就是在一側引物的5端加上一個30~40bp的GC結構，這樣在PCR產物的一側可產生一個高熔點區，使相應的感興趣的序列處於低熔點區而 便於分析。因此，DGGE的突變檢出率可提高到接近於100%。作為一種突變檢測技術，DGGE具有如下的優點：（1）突變檢出率高。DGGE的突變檢出率為99%以上。（2）檢測片段長度可達1kb，尤其適用於 100~500bp的片段。（3）非同位素性。DGGE不需同位素摻入，可避免同位素污染及對人體造成的傷害。（4）操作簡便、快速。DGGE一般在24小時內即可獲得結果。（5）重復性 好。但是，該方法需要特殊的儀器，而且合成帶GC夾的引物也比較昂貴。