細胞培養到一定時間為什麼要傳代
『壹』 為什麼培養細胞長成緻密單層後必須要進行傳代培養
因為正常細胞具有接觸抑制現象,
如果不分瓶培養,
就會導致細胞停止分裂,
最終衰老死亡。
細胞膜上有糖類和蛋白質共同構成的糖蛋白,也叫做糖被,
它在細胞上起識別作用。
當細胞增殖到一定程度,
也就是互相挨在一起的時候,
糖蛋白識別了這種信息,
就會使細胞停止繼續繁殖。
請參看接觸抑制
http://ke..com/view/472342.htm
『貳』 細胞第一次傳代時間
正常細胞培養時,不論細胞的種類和供體的年齡如何,在細胞全生存過程中,大致都經歷以下三個階段:
1.原代培養(Primary Culture)期:
也稱初代培養,即從體內取出組織接種培養到第一次傳代階段,一般持續1一4周。此期細胞呈活躍的移動,可見細胞分裂,但不旺盛。初代培養細胞與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大。細胞群是異質的(Heterogeneous),也即各細胞的遺傳性狀互不相同,細胞相互依存性強。如把這種細胞群稀釋分散成單細胞,在軟瓊脂培養基中進行培養時,細胞克隆形成率(Cloning Efficiency)很低,即細胞獨立生存性差。克隆形成率即細胞群被稀釋分散成單個細胞進行培養時,形成細胞小群(克隆)的百分數。初代培養細胞多呈二倍體核型;由於原代培養細胞和體內細胞性狀相似性大,是檢測葯物很好的實驗對象。
2.傳代期:
初代培養細胞一經傳代後便改稱做細胞系(Cell Line)。在全生命期中此期的持續時間最長。在培養條件較好情況下,細胞增殖旺盛,並能維持二倍體核型,呈二倍體核型的細胞稱二倍體細胞系(Diploid Cell Line)。為保持二倍體細胞性質,細胞應在初代培養期或傳代後早期凍存。當前世界上常用細胞均在不出十代內凍存。如不凍存,則需反復傳代以維持細胞的適宜密度,以利於生存。但這樣就有可能導致細胞失掉二倍體性質或發生轉化。一般情況下當傳代10~50次左右,細胞增殖逐漸緩慢,以至完全停止,細胞進入第三期。
3.衰退期:
此期細胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;細胞形態輪廓增強,最後衰退凋亡。在細胞生命期階段,少數情況下,在以上三期任何一點(多發生在傳代末或衰退期),由於某種因素的影響,細胞可能發生自發轉化(Spontaneous Transformation)。轉化的標志之一是細胞可能獲得永生性(Immortality)或惡性性(Malignancy)。細胞永生性也稱不死性,即細胞獲持久性增殖能力,這樣的細胞群體稱無限細胞系(Infinite Cell Line),也稱連續細胞系(Continuous Cell Line)。在早期文獻中無限細胞系也稱已建立細胞系(Established Cell Line),現已不用。無限細胞系的形成主要發生在第二期末,或第三期初階段。細胞獲不死性後,核型大多變成異倍體(Heteroploid)。細胞轉化亦可用人工方法誘發,轉化後的細胞也可能具有惡性性質。細胞永生性和惡性性非同一性狀。
『叄』 關於動物細胞培養,為什麼細胞遺傳物質的改變發生於傳代培養過程
它在原代培養的時候經過50代左右就該死了,不想死的就突變了,不突變就沒有傳代培養了,你也不會提這個問題了
『肆』 為什麼要進行傳代培養
傳代培養通常是動物細胞培養才會用到的名詞,在植物組織培養過程中稱為繼代培養。通常植物組培的目的是快繁,所以需要繼代產生大量中間繁殖體再進行再分化培養產生植株。
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。
傳代方法:
1、懸浮生長細胞傳代
多採用離心法傳代。1000轉/分,20-30秒後去上清。沉澱細胞加新培養液後再混勻傳代。亦有直接傳代法,即懸浮細胞沉澱在瓶壁時,將上清培養液去除1/2-1/3,然後用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。
2、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)
此類細胞部分呈現貼壁生長現象,但貼壁不牢,可用直接吹打法使細胞從瓶壁脫落下來,進行傳代。
3、貼壁生長細胞傳代
採用酶消化法傳代。常用的消化液有0。25%的胰蛋白酶液。
『伍』 在動物細胞培養中進行完成原代培養後為什麼要進行傳代培養
獲得高度統一性狀的細胞
『陸』 細胞培養擴大為什麼要傳代5到6次
一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利於生長或發生中毒
『柒』 為什麼細胞培養一段時間後 變成長梭形
有幾種可能性:
1.可能是所用的培養液用的時間太久,裡面的必須營養成分谷氨醯胺缺失------配製好的培養液在4度冰箱放置兩周後,大部分谷氨醯胺就已破壞,在缺少谷氨醯胺時會出現細胞生長不良等現象.以前我養的細胞也出現過纖維化 變臟等現象,我換成新鮮培養基後它就變好 了.
2.PH值不合適.比如原來生長條件是一個PH,現在改變較大.
3.傳代時細胞密度太小.有些細胞在相互接觸狀態下長得比較好.
你可以改用新配製的培養液,並把細胞傳密些先養養試試.
『捌』 腫瘤細胞培養多長時間換一次培養基,即傳代一次
一般三天換一次培養基,當然如果培養基的顏色變黃了就立即換培養基.傳代看細胞覆蓋率,覆蓋率達到80%-90%就可以傳了,癌細胞一般1傳5.
『玖』 癌細胞培養到一定時期不傳代培養也能無限增殖 對嗎
培養的每個時期都是不傳代也能無限增殖啊 傳代只是因為你培養基裡面的營養物質消耗完了 細胞長的太密了
『拾』 細胞培養到什麼狀態就可以傳代了如果要加葯得到什麼狀態
細胞傳代實為細胞分瓶。單層貼壁生長的細胞一般是接近匯合或100%匯合後進行傳代,有些呈克隆樣或成堆生長,永遠也達不到匯合,應根據經驗,在細胞密度最高時傳代。還有些具有接觸抑制的細胞,要在匯合前進行傳代。