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分光光度計為什麼要校準三種顏色

發布時間: 2022-01-31 04:18:53

1. 分光光度計一般用什麼標准溶液校準

一般使用氧化鈥玻璃,光譜中性濾光片,或分光光度計專用校準溶液

2. 分光光度計比色時為什麼要設置空白管

因為比色分析的定量依據是朗博-比爾定律;僅適用有色物質;測定時要扣除比色皿及其非待測物的吸光度,才能用於朗博-比爾定律;設置空白管,就是得到:扣除比色皿及其非待測物的吸光度的作用。

計算:揮發酸(以醋酸計)%=C×(V1–V2)×0.06×100W6-6有效酸度(pH)的測定,pH值的測定方法有很多,如電位法(pH計法)、比色法及化學法等,常用的方法為電位法及比色法。



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常用的目視比色法是標准系列法,通過與一系列標准溶液進行比較來確定樣品溶液的濃度。由一組相同的材料,形狀,顏色相同的管尺寸;

將一系列不同數量的已知濃度的標准溶液加入到比色管,然後加入等量的顯色劑和其他試劑,和其他控制實驗條件相同,稀釋到相同的體積,從而使一組顏色標准水平逐步深化。

將一定數量待測溶液放入另一個比色管中,在相同條件下顯色,並稀釋到相同體積。如果被測溶液的色深與標准系列溶液的色深相同,則溶液在兩個比色管中的濃度相同。

3. 用分光光度計比色測定時為什麼要設空白管

做對比。
分光光度計使用時測定出來的吸光度值或透射比值是相對於一個標准品做空白測出來的,否則測定出來的樣品的值是沒有依據的。標准品一般是指不含被測物質或和被測樣品除了被測物質之外含有一樣的組分,以此來做標准,然後被測定樣品吸收的單色光與之進行對比得到的測量數據。

比色法(colorimetry)是通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。早在公元初古希臘人就曾用五倍子溶液測定醋中的鐵

4. 新購紫外分光光度計需要怎麼校準還是就只是調T100%和T0%就好了。。在線等啊

按照國家標准跑一邊就放心了,GB/T 26798-2011 單光束紫外可見分光光度計 ,如果是是雙光束的GB/T26813-2011雙光束紫外可見分光光度計

5. 紫外-可見分光光度計實驗過程中為什麼需用空白試劑校準基線

為了保證測試的准確性。對於雙光束分光光度計而言在使用前必須要做基線校正。
系統基線無需經常校正,一般半個月或一個月校正校正一次即可。對有的儀器來說,系統基線校正過於頻繁反而會造成基線漂移嚴重。

6. 紅外分光光度計怎麼校準

8.1儀器的調整

8.1.1鎢燈的更換和調整:

光源燈是易損件,當損件更換或由於儀器搬運後均可能偏離正常位置,為了使儀器有足夠的靈敏度,如何正確地調整光源燈的位置則顯得更為重要,用戶在更換光源燈時應帶上手套,以防沾污燈殼而影響發光能量。

光源燈採用12V30W插入式鎢鹵素燈,更換鎢燈時應先切斷電源,然後用附件中的扳手旋松鎢燈架上的二個緊固螺絲,取出損壞的鎢燈,換上鎢燈後,將波長選擇在550mm左右,開啟主機電源開關,移動鎢燈上、下、左、右位置,直到成象在入射狹縫上。選擇適當的靈敏度開關,觀察數字表讀數,經過調整至數字表讀數為最高即可。最後將二緊固螺絲旋緊。注意:二緊固螺絲為鎢燈穩壓電源的輸出電壓,當鎢燈點亮時,千萬不能短路,否則會損壞鎢燈穩壓電源電路元件。

8.1.2波長精度檢驗與校正:採用鐠釹濾色片529納米及808納米二個特徵吸收峰,通過逐點測試法來進行波長檢定與校正。本儀器的分光系統採用光柵作為色散元件,其色散是線性的,因此波長分度的刻度也是線性的。當通過逐點測試法記錄下的刻度波長與鐠釹濾色片特徵吸收. 波長值超出誤差,則可卸下波長手輪,旋松波長刻度盤上的三個定位螺絲,將刻度指示置特徵吸收波長值,誤差范圍(≤±2nm),旋緊三個定位螺絲即可。

8.1.3吸光度精度的調整:選擇開關置於"T",調節透過率"00.0"和"100.0"後,再將選擇開關置於"A", 旋動"吸光度調零"旋鈕,使得顯示值為".000"。將0.5A左右的濾光片(儀器附)置於光路,測的其吸光度值。選擇開關置於"T", 測的其透過率值,根據A=lg1/T計算出其吸光度值。如果實測值與計算值有誤差,則可調節"吸光度斜率電位器",將實測值調整至計算值,兩者允許誤差為±0.004A。

7. 分光光度計的校正

在實驗室工作中,驗收新儀器或儀器使用一段時間後都要進行波長校正和吸光度校正。建議採用下述較為簡便、實用的方法進行校正。

鐠玻璃或鈥玻璃都有若干特徵的吸收峰,可用來校正分光光度計的波長標尺,前者用於可見光區,後者對紫外和可見光區都適用。K2CrO4標准溶液用來校正吸光度標度,即0.0400g K2CrO4溶解於1 L的0.05mol·L-1KOH溶液中製成標准溶液。於1cm光程的吸收池中,在25℃時用不同波長測得的吸光度值見表4.1。

表4.1 鉻酸鉀溶液的吸光度

8. 求紫外分光光度計的校正步驟

校正吸光度常用一很純物質 一定濃度的溶液為標准,且此溶液的吸光度系數經不同實驗室核對,為了使標准液吸光度不受測定波長的微移動而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質。

同時要求溶液穩定,且在相當的波長范圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鑽和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是最常用的標准溶液,此溶液在紫外區和可見區均適用。

校正波長或波數

可用具有窄吸收帶的溶液,濾光片或蒸氣來校正所需要的光波范圍。如果要求很高的精密度時,可用放電燈泡發射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個為校正用的燈。

苯的蒸氣對校正一定范圍的波長亦很有用,可用一小滴苯放於一厘米厚的吸收杯中,測其吸收波長,在遠紫外區可用氧氣的吸收帶進行校正。用各種稀土金屬的濾光片,可以很快地校正波長,但准確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。

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日常維護
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕,產生光能不足、雜散光、雜訊等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命。

維護保養時應定期加以校正。應具備四季恆濕的儀器室,配置恆溫設備,特別是地處南方地區的實驗室。

二、環境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械繫統的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔,保障環境和儀器室內衛生條件,防塵。

9. 分光光度計的原理是什麼

分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。該儀器是食品廠、飲用水廠辦理QS、HACCP認證的必備檢驗設備。 QS認證專用指定分光光度計 而分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。 常用的波長范圍為:(1)200~400nm的紫外光區,(2)400~760nm的可見光區,(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和准確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進行校正檢定。 單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式: A=-log(I/I。)=-lgT=kLc 式中:A 為吸收度; I。為入射的單色光強度; I 為透射的單色光強度; T 為物質的透射比; k 為吸收系數; L 為被分析物質的光程 c 為物質的濃度 物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數後,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身並沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色後再測定,故又稱比色分析。由於顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標准品或對照品同時操作。 分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用於核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。 分光光度計的簡單原理 分光光度計計採用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品後,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

10. 紫外分光光度計如何校正

分光光度計關於操作誤差,多數情況下,通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、准確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關於儀器的系統誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需准確度很高的測量,則必須天天校正。 1.配製60mg/L的重鉻酸鉀溶液 在天平上稱取已乾燥的重鉻酸鉀60mg,准確至+-0.1mg。放在燒杯中,用適量蒸餾水溶解,並加入1ml(0.1mol/L)的高氯酸。然後轉移到1000ml的容量瓶中,在蒸餾水稀釋至刻度。 2.濃度為60mg/L的重鉻酸鉀溶液在各溫度下的投射比(光譜寬度為2nm) 波長235350(nm)溫度(℃) 1018.022.6 1518.022.7 2018.122.8 2518.222.9 3018.322.9 3.要有可見中性慮光片(其透過比為10%,20%,30%准確度優於+-0.2%) 4.要有投射比配對誤差不打魚0.1%的石英吸收池一對 5.投射比准確度+-0.5%,重復度+-0.5% 6.光譜寬度為2nm,按要求校正儀器零點。高氯酸盛於10mm厚的石英吸收池中,調投射比為100%,將經標定過的重鉻酸鉀盛於另一石英吸收池中,置於光浴,按步驟2提供的數據每個波長測試三遍,三次平均值與標准值之差為其可見光區透射比的准確度。三次測量的最大值和最小值之差為可見光區的重復性。

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