跑膠為什麼marker顏色淺
發布時間: 2024-01-05 08:30:39
Ⅰ 瓊脂糖凝膠電泳跑完,DNA條帶顏色淺怎麼回事
原因有以下:
1、 可以考慮是不是樣品不純,目的產物與雜帶相差不大,所以要多跑一段時間才有尾巴。參考marker,marker應該不會有。如果有的話說明配膠有問題。
2 、瓊脂糖檢測DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚藍便可,注意上樣濃度。
3、可能是原液濃度太大造成的。
4、可能DNA已降解。
原理
瓊脂糖凝膠電泳的分析原理與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有「分子篩」和「電泳」的雙重作用。
瓊脂糖凝膠具有網路結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決於凈電荷的性質和數量,而且還取決於分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相比於蛋白質太大,對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道,現廣泛應用於核酸的研究中。
Ⅱ SDS-PAGE跑了4、5回了,條帶顏色總是特別淺看不清楚,連MARKER都看不清楚,是怎麼回事啊
1 上樣量太少,或者電泳時候loading buffer不行,導致蛋白跑了
2 脫色時間不夠,建議K-G染色後,脫色液在30min內換兩次
3 重新按標准配置電泳緩沖液。
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