血塗片為什麼中間顏色淡

① 在顯微鏡下觀察血塗片時，發現紅細胞中央是白色，為什麼(速求！）

紅細胞的顏色是血紅蛋白染的。紅細胞呈圓盤形，中間下窪，因此較薄，可容納的血紅蛋白較少，所以顏色淺；周邊較厚，容納的血紅蛋白多，所以顏色較紅。缺鐵時，每一紅細胞所含的血紅蛋白較少，僅周圍一圈紅色，中間有大片無色透明的區域，故稱為環狀紅細胞。附圖為缺鐵紅細胞。

② 血塗片的血塗片-注意事項

1) 玻片的清洗：新玻片常有游離鹼質,因此應用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時,然後再徹底清洗。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20分鍾,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來水反復沖洗,必要時再置95%乙醇中浸泡1小時,然後擦乾或烤乾備用。使用玻片時只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面;,以保持玻片清潔,乾燥,中性、無油膩。
2) 細胞染色對氫離子濃度十分敏感,在染色過程中玻片必須化學清潔,配製瑞氏染液必須用優質甲醇,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應近中性,否則各種細胞染色反應異常,致使細胞的識別困難,甚至造成錯誤。
3) 一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊,兩側留有空隙。血片制好後最好立即固定染色,以免細胞溶解和發生退行性變。
4) 血膜未乾透,細胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落,因此血膜必需充分乾燥.
5) 染色時間與染液濃度,室溫高低,細胞多少有關.染液越淡,室溫越低,細胞越多,所需染色時間越長或應適當增加染液量,因此染色時間應視具體情況而定.特別是更換新染料時必須經試染,摸索最佳染色條件.
6) 染液不可過少,以防蒸發乾燥染料沉著於血片上難沖洗干凈.
7) 沖洗時應用流水將染液沖去.不能先倒掉染液,以免染料沉著於血片上.
8) 染色過深可用甲醇或酒精適當脫色,最好不復染,必須復染時,可將染液先稀釋好再復染.
9) 染色時應注意保護血膜尾部細胞,不能劃掉.因為體積較大細胞常在此處出現.

③ 缺鐵性貧血血塗片見紅細胞體積________________,中央淡染區____________。

體積偏小，中心淡染區擴大。
當機體對鐵的需求與供給失衡，導致體內貯存鐵耗盡（ID），繼之紅細胞內鐵缺乏（IDE），最終引起缺鐵性貧血（IDA）。IDA是鐵缺乏症（包括ID，IDE和IDA）的最終階段，表現為缺鐵引起的小細胞低色素性貧血及其他異常。IDA是最常見的貧血。其發病率在發展中國家、經濟不發達地區及嬰幼兒、育齡婦女明顯增高。

④ 如果血塗片染色深或淺,應當怎麼樣進行糾正

1.血塗片顏色染色過深：

原因：染色時間過長、染色液過多導致。現象可能如下偏藍或者偏紅：

顏色太淺

建議調整染色時間、配液比例、塗片厚薄、沖洗時間等再進行測試確認。

⑤ 怎麼製作血塗片

血常規是醫院常作的檢查項目，但是由於大部分的醫院用的都是三分類的血球儀（五分類血球儀價格太高），在分析上存在一定的缺陷，而血塗片則能在一定程度上很好的補償，使得三分類的血球儀也能起到五分類的效果。而且血塗片的作用還不僅於此，它還能更直觀的放映細胞的形態，以及血液的一種狀態。現在就血塗片的製作和應用做一個介紹。

血塗片的製作：

血塗片的製作方法很多，但需要的材料也都是一樣的，載玻片和（或）蓋玻片。現在介紹一種我們醫院常用的塗片方法：

1、首先左手持一載玻片，將採到的血（做血常規剩下的血）滴一滴到載玻片一端：

細胞分類計數器

（細胞分類計數器）

通過這樣的方法，我們就可以得到白細胞下各個種類的比例，結合血常規的白細胞數目就可以得到一個五分類的項目，這對於分析動物的身體狀況更加的全面和科學。如上圖的結果是：嗜中性粒細胞百分比：70%（分葉：57%，桿狀：13%）；淋巴性細胞百分比：25%；單核細胞百分比：3%；嗜酸性粒細胞百分比：2%；嗜鹼性粒細胞百分比：0。

再簡單舉例說一下血塗片在臨床上的應用，也是結合血常規的分析。如下圖為一隻犬的血常規結果：

從結果上看，RBC(紅細胞)下降，HGB(血紅蛋白)下降，HCT（紅細胞壓積）下降。很明顯的可以判定為貧血。但是貧血也分很多種的，到底是否為再生性，又或者是否是出血或溶血造成的。然後根據血塗片可以知道：

從該血塗片我們可以看到，紅細胞中間淡然區明顯擴大，說明了這是正紅細胞低色素性貧血，也就是由於缺鐵性貧血，需要補充鐵元素，增強營養。一方面我們知道動物的具體情況，可以針對性的幫助解決問題。

當然，血塗片在臨床上的作用不僅僅如此，我們不僅可以用來來計數分類白細胞，還可以觀察紅細胞的形態來判斷如果出現異性紅細胞的原因，白細胞形態異常的原因，還可以看到血液寄生蟲如：巴貝斯焦蟲，血吸蟲的微絲蚴。而且對於血常規儀器還可以起到一種驗證的作用，就是說如果血常規的結果與你在顯微鏡下看到的結果出入較大的時候，如果你保證你血塗片的製作和觀察都沒問題的話，就要懷疑機器的判讀有問題了。比喻抽血過程比較慢，導致血凝的出現而使得機器讀書的血小板極低，以及由於貓的血小板和紅細胞體積較近而出現的判讀等都可以用血塗片來糾正和驗證。

⑥ 血塗片好壞的標准及影響因素

1) 玻片的清洗：新玻片常有游離鹼質,因此應用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時,然後再徹底清洗。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20分鍾,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來水反復沖洗,必要時再置95%乙醇中浸泡1小時,然後擦乾或烤乾備用。使用玻片時只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面;,以保持玻片清潔,乾燥,中性、無油膩。
2) 細胞染色對氫離子濃度十分敏感,在染色過程中玻片必須化學清潔,配製瑞氏染液必須用優質甲醇,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應近中性,否則各種細胞染色反應異常,致使細胞的識別困難,甚至造成錯誤。
3) 一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊,兩側留有空隙。血片制好後最好立即固定染色,以免細胞溶解和發生退行性變。
4) 血膜未乾透,細胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落,因此血膜必需充分乾燥.
5) 染色時間與染液濃度,室溫高低,細胞多少有關.染液越淡,室溫越低,細胞越多,所需染色時間越長或應適當增加染液量,因此染色時間應視具體情況而定.特別是更換新染料時必須經試染,摸索最佳染色條件.
6) 染液不可過少,以防蒸發乾燥染料沉著於血片上難沖洗干凈.
7) 沖洗時應用流水將染液沖去.不能先倒掉染液,以免染料沉著於血片上.
8) 染色過深可用甲醇或酒精適當脫色,最好不復染,必須復染時,可將染液先稀釋好再復染.
9) 染色時應注意保護血膜尾部細胞,不能劃掉.因為體積較大細胞常在此處出現.

⑦ 觀察血塗片時,我們會發現紅細胞周圍顏色深中間顏色淺,這是為什麼

因為紅細胞中間比較薄，周圍比較厚。是個碟子形狀。

⑧ 正常人的血塗片中可以見到哪種細胞

血塗片的顯微鏡檢查是血液細胞學檢查的基本方法，應用極廣。特別是對各種血液病的診斷有很大價值。但血片制備和染色不良，常使細胞鑒別發生困難，甚至導致錯誤結論。例如，血膜過厚細胞重疊縮小，血膜太薄白細胞多集中於邊緣；染色良好的血片是血液學檢查主要基本技術之一。

血塗片
瑞氏染色法原理
1. 瑞氏染料是由酸性染料伊紅和鹼性染料美藍組成的復合染料。
美藍(又名亞甲藍mehyleneblue)為四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結構,通常為氯鹽,即氯化美藍，美藍容易氧化為一,二,三甲基硫堇等次級染料(即天青)市售美藍中部份已被氧化為天青.伊紅(又名曙紅cosin)通常為鈉鹽即伊紅化鈉。美藍和伊紅水溶液混合後產生一種憎液性膠體伊紅化美藍中性沉澱,即瑞氏染料。瑞氏染料溶於甲醇後,又重新解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。2.細胞的染色既有物理的吸附作用又有化學的親和作用.各種細胞和細胞的各種成份化學性質不同對各種染色料的親和力也不一樣.因此用染色液染色後在同一血片上可以看到各種不同的色彩,例如血紅蛋白嗜酸性顆粒為鹼性蛋白質與酸性染料伊紅結合染粉紅色稱為酸性物質,細胞核蛋白和淋巴細胞漿為酸性,與鹼性染料美藍或天青結合,染藍色或紫色稱為嗜鹼性物質,中性顆粒成等電狀態與伊紅和美藍均可結合,染紫紅色稱中性物質.

血塗片
實驗材料
3.1實驗材料：醫用采血針、酒精棉球、載玻片、血推片、消毒牙簽
3.2實驗試劑：瑞氏染液、抗B血清、抗A血清、生理鹽水、蒸餾水
3.3儀器設備：Motic光學顯微鏡
實驗步驟
4.1ABO血型鑒定
4.1.1取一塊清潔玻片，用記號筆標上記號。
4.1.2用小滴管吸A型標准血清（抗B）一滴加入左側，用另一小滴管吸B型標准血清（抗A）一滴加入右側
4.1.3以穿刺法自左手無名指指尖取血，在玻片的每側各放入一小滴血，用牙簽攪拌，使每側抗血清和血液混和。每邊用一支牙簽，切勿混用。
4.1.4靜置室溫下10—15min後，觀察有無凝集現象，並據此判斷血型。
4.2血塗片的製作及血細胞觀察
4.2.1取末捎血一滴置於玻片的一端,左手持載玻片,右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方後移接觸血滴，血滴即沿推片散開。然後便推片與載片夾角保持30-45度平穩地向前移動,載片上保留下一薄層血膜
4.2.2血塗片製成後可手持玻片在空氣中揮動,使血膜迅速乾燥,以免血細胞皺縮.
4.2.3用蠟筆在血膜兩側劃線,以防染液溢出,然後將血膜平放在染色架上.加瑞氏染液2-3滴,使覆蓋整個血膜,固定0.5-1.0分鍾.滴加等量或稍多的新鮮蒸餾水,與染料混勻染色5-10分鍾.
4.2.4用清水沖去染液,待自然乾燥後或用吸水紙吸干,即可置血塗片於顯微鏡下進行鏡檢。
4.2.5白細胞分類計數。
選擇塗片的體尾交界處染色良好的區域,在油鏡下計數100個紅細胞,按其形態特徵進行分類計數,求出各類細胞所佔比值。
瑞氏染液:瑞氏染料1g加甲醇(AR)600ML。將瑞氏染料放在清潔乾燥乳缽中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解.將已完全溶解的部分倒入棕色試劑瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解於甲醇為止。新配製的染料偏鹼,須在室溫和37℃下一定時間待染料成熟,主要美藍逐漸增多為天青B後才能使用.貯存時間越久染色效果越好,因此,Deamgilliland等採用吸光度比值(rA)作為瑞氏染料的質量規格.rA測定方法如下:取瑞氏染液15-25ul(視染液濃度而定)加甲醇10ml稀釋,混勻後以甲醇為空白管分別以波長650nm,525nm比色,rA=A650/A525。
因為美藍吸收峰為波長650nm,伊紅吸收峰波長為525nm,天青B吸收峰也為650nm,但吸光度A約為美藍的一半.所以新配製染料的RA接近2,隨著美藍逐漸氧化為天青B,RA也相應下降,RA下降達1.3±0.1即可使用.瑞氏染料在貯存過程中必須塞嚴,以防甲醇揮發和氧化為甲酸.有人主張配方中加入30ml甘油,防止甲酸揮發,並可使細胞染色清晰.甲醇必須純凈,如甲醇中丙酮含量過多,染色偏酸,使細胞著色不良。磷酸鹽緩沖液(PH6.4-6.8)：磷酸二氫鉀0.3g加磷酸氫二鈉0.2g再加蒸餾水至1000ml,配製成磷酸鹽緩沖液調整PH,如無緩沖液可用新鮮蒸餾水代替。
正常參考值
細胞類別成人
桿狀核0.01-0.05
分葉核0.50-0.70
嗜酸性粒細胞0.005-0.05
嗜鹼性粒細胞0-0.01
淋巴細胞0.20-0.40
單核細胞0.03-0.08
附註
1要避免重復計數,玻片應由血膜邊緣向中央依次上下呈曲線移動.
2白細胞總數超過20×109/L,應分類計數200個細胞,白細胞數明顯減少的血片,可檢查多張血片。
注意事項
1) 玻片的清洗：新玻片常有游離鹼質,因此應用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時,然後再徹底清洗。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20分鍾,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來水反復沖洗,必要時再置95%乙醇中浸泡1小時,然後擦乾或烤乾備用。使用玻片時只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面;,以保持玻片清潔,乾燥,中性、無油膩。
2) 細胞染色對氫離子濃度十分敏感,在染色過程中玻片必須化學清潔,配製瑞氏染液必須用優質甲醇,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應近中性,否則各種細胞染色反應異常,致使細胞的識別困難,甚至造成錯誤。
3) 一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊,兩側留有空隙。血片制好後最好立即固定染色,以免細胞溶解和發生退行性變。
4) 血膜未乾透,細胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落,因此血膜必需充分乾燥.
5) 染色時間與染液濃度,室溫高低,細胞多少有關.染液越淡,室溫越低,細胞越多,所需染色時間越長或應適當增加染液量,因此染色時間應視具體情況而定.特別是更換新染料時必須經試染,摸索最佳染色條件.
6) 染液不可過少,以防蒸發乾燥染料沉著於血片上難沖洗干凈.
7) 沖洗時應用流水將染液沖去.不能先倒掉染液,以免染料沉著於血片上.
8) 染色過深可用甲醇或酒精適當脫色,最好不復染,必須復染時,可將染液先稀釋好再復染.
9) 染色時應注意保護血膜尾部細胞,不能劃掉.因為體積較大細胞常在此處出現.
染色結果
在正常情況下血膜外觀為粉紅色，在顯微鏡下紅細胞呈肉紅色；白細胞胞漿能顯示各種細胞的特有色彩，細胞核染紫紅色，染色質清楚，粗細松緊可辨。染色結果偏酸，則紅細胞和嗜酸性粒細胞顆粒偏紅，白細胞核呈淺藍色或不著色；染色結果偏鹼，則所有細胞染成灰藍色，顆粒深暗，嗜酸性顆粒可染成暗褐色，甚至紫黑色或藍色。嗜中性顆粒偏粗，偏鹼(紫黑色).血片原處呈綠色.

⑨ 為什麼顯微鏡觀察血細胞是要染色

染色的目的是使細胞的主要結構,如細胞質、細胞核、細胞器等染上不同的顏色,便於顯微鏡下觀察.
血細胞又稱「血球」,主要含下列三個部分：紅細胞、白細胞、血小板.
紅細胞呈雙凹圓盤狀,中央較薄,周緣較厚,故在血塗片標本中呈中央染色較淺、周緣較深,無細胞核.白細胞顯色各異,如中性粒細胞的胞質染成粉紅色,含有許多細小的淡紫色及淡紅色顆粒；嗜酸性粒細胞染成桔紅色；嗜鹼性粒細胞著色較淺.血小板是紅骨髓巨核細胞細胞質的脫落物,本身不是細胞.在血塗片中,血小板常呈多角形,聚集成群.血小板中央部分有著藍紫色的顆粒,稱顆粒區（granulomere）；周邊部呈均質淺藍色,稱透明區（hyalomere）.
【瑞氏染色結果】在正常情況下,血膜外觀染成淡紫紅色.顯微鏡下,紅細胞呈粉紅色,在厚薄均勻處,略有碟狀感；白細胞漿中顆粒清楚,並顯示出各種細胞特有的色彩.細胞核染紫紅色,核染色質結構清楚.
染色偏酸,則紅細胞和嗜酸性粒細胞顆粒偏紅,白細胞核呈淡藍色或不著色.染色偏鹼,則所有細胞呈灰藍色,顆粒深暗.嗜酸性顆粒可染成暗褐色,甚至紫黑或藍色.中性顆粒偏粗、偏鹼,染成紫黑色,血膜厚的部位呈綠色.

⑩ 血塗片中紅細胞大小不等以小細胞為多中央淡染區擴大是什麼病

這種情況多見於缺鐵性貧血或者營養不良性貧血，導致紅細胞發育不良，細胞內血紅蛋白減少。可以嘗試補充鐵劑和多吃蛋白質類食品進行治療。當然，貧血的原因有很多，如果通過鐵劑不能有效改善，那麼還需要進行詳細的貧血原因檢查。