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為什麼蛋白條帶顏色淺

發布時間: 2023-02-11 01:48:16

⑴ SDS-PAGE跑了4、5回了,條帶顏色總是特別淺看不清楚,連MARKER都看不清楚,是怎麼回事啊

1 上樣量太少,或者電泳時候loading buffer不行,導致蛋白跑了

2 脫色時間不夠,建議K-G染色後,脫色液在30min內換兩次

3 重新按標准配置電泳緩沖液。

⑵ 請問各位朋友,pcr產物條帶很淡,是什麼原因有哪些好的改良方法謝謝

  1. 引物、模板沒問題的話,就加cycle,多擴幾輪,就亮了。(一般pcr酶和buffer是沒有問題的,除非你反復凍融或者長時間放置室溫)

  2. 如果上一輪擴出來特異性好的話,可以適當降低退火溫度。

  3. 多擴了幾輪,,退火溫度也降低了,但是條帶仍然很淡,這時候,基本上就是引物和模板的問題了。你要好好看看引物特異性好不好,dimer亮不亮,(自身發夾一般不會有太大影響);模板的話,要看看GC含量高不高,模板質量好不好。

  4. 引物不好只能重新設計。模板不好可以加點DMSO(GC含量高),或者重新提取。

差不多就這幾個方面吧~

⑶ PCR電泳,加樣孔很亮,但目的條帶卻很淡,不知道怎麼回事

你的MARKER是對的,說明膠的問題不是很大(但也可能是影響因素)。
可能的原因是:(1)DNA不純,裡面蛋白質過多。
              (2)梳子非常不幹凈,有雜質在點樣孔里
              (3)膠的濃度(過大或過小)不適合你的PCR產物

⑷ 醋酸纖維薄膜上條帶的數目、位置、粗細和顏色深淺分別與哪些因素有關

數目與蛋白種類有關,位置與各蛋白等電點大小(電泳速度)有關,粗細與蛋白相對分子質量有關,顏色深淺與含量有關。

⑸ 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗電泳條帶為什麼有寬有窄有濃有淡

sds-page電泳泳道一般不會很寬的,因為用來形成泳道的梳子都是固定大小的,只有電泳時條帶可能會變的很寬這個是因為上樣體積比較大的時候,比如上滿整個泳道的時候,因為濃縮膠體積小,未能將樣品完全壓成一條線,在分離膠的時候條帶就容易擴散。

所以電泳時條帶可能會變的很寬另外就是電流電壓的影響,一般只需要降低電壓,條帶就不會變的很寬sds-page電泳跑出豎條帶多半是配膠的原因如果膠配製的時候沒有攪拌均勻,就有可能在膠濃度較高的地方出現條帶變成豎條帶,所以sds-page電泳跑出豎條帶應該會死配膠的原因,建議充分攪拌均勻。

(5)為什麼蛋白條帶顏色淺擴展閱讀:

注意事項:

在光滑面點樣。醋酸纖維薄膜有兩面,一面有光澤,一面無光澤,無光澤面才是實驗要求的點樣面,操作時必須認真加以區別(有光澤的一面發生的是鏡面反射,無光澤的一面發生的是漫反射,以此可以區別)。若點樣錯誤地點在有光澤面上,帶電的蛋白質就不可能在薄膜上移動,也就不可能有五條區帶。

點樣用力不均勻或樣品塗在玻片時不均勻。點樣用力不均勻的結果是,樣品有的點上去了,有的沒有,這與取樣塗在玻片不均勻相關。在血清中有的樣品的量比較少,沒點樣上去導致不能形成區帶。

⑹ 電泳圖譜中,蛋白條帶的顏色深淺和寬度表示什麼

你好,電泳圖譜中顏色深淺代表含量高低,寬度與蛋白樣品的不均一性有關,含有不同分子量的蛋白種類越多彌散寬度越大。希望採納哦

⑺ western blot條帶很淡是什麼原因

很多種可能~~有可能是抗體的問題,也有肯能是你顯色時候顯色劑的問題,也有可能是轉膜的時候沒轉過來或者電壓太大時間太長轉過了,露走很多。可以多做幾次,自己查找原因,祝你成功哦。

⑻ 電泳蛋白質條帶顏色淺,marke的顏色也很淺,那蛋白質樣液可以濃縮嗎!

M顏色也淺的話應該是膠的問題了,可以適當提高一下濃縮膠的濃度

⑼ SDS-GAPE實驗為什麼要先調整蛋白質濃度既然濃度相同,為什麼處理組的條帶和對照組相比會整體變淺

可能定量的過程不準。從圖中看對照組蛋白量明顯大於處理組。你再看看非預染marker的說明書,上面會標明各帶的濃度,一般是0.1mg/ml,相較而言處理組的蛋白濃度根本沒有達到 3mg/ml。

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