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elisa為什麼不顯顏色

發布時間: 2022-12-20 09:50:04

1. 為什麼elisa試驗雙抗體夾心法陽性對照沒有顯色

雙抗體夾心ELISA,陽性孔,樣品孔和陰性對照全部不顯色
已經單獨用二抗和顯色液加一起試過了,顯色很明顯的,二抗是新換的,二抗和顯色液沒有問題
根據你的實驗結果可以推斷,結果沒有顯色是因為包板的抗體失效,很明顯。另外,抗體在4度放幾個月沒有問題是因為無菌操作的情況下,而且保證冰箱沒有任何問題的情況下。另外,可以驗證一下你沒有包被的抗體,直接點膜做DOT-ELISA,一天肯定出結果。

2. ELISA法顯色原理是啥

正相反。一般酶和抗體是化學鍵連接的。陽性對照中,抗體和抗原結合導致抗體的固定化(也就是說結合到板子上了),與抗體連接的酶就一並固定化了,所以再往酶標板中加入底物,酶就發揮作用顯色了。陰性對照中,抗原沒有,所以抗體不能固定化,隨之沒有酶的固定化,所以加入底物不顯色。

3. ELISA實驗無效的幾種原因

原因:
1. 不同試劑盒或不同批號的試劑混用
2. 標准品稀釋方法錯誤/或標准品有
3.未加酶結合物而認為已加入
4.終止液誤作洗滌液稀釋或當底物液使用
5.顯色液變質
6.洗滌液配製有誤
方法:
1.建議使用同批次試劑盒。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑。
2.請按照說明書所示配置說明書,注意單位和稀釋倍數
3.注意不要漏加
4.每次加液前均應看清標簽。
5.更換新的顯色液。
6.請按說明書所示稀釋倍數配製
總結以上避免白板,ELISA操作應注意事項:
1、確認配製洗液的容器已洗干凈,不含酶抑制劑,如疊氮鈉等;
2、每次配製時都應看清標簽標明物質;
3、加完試劑後可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現象。

4. 各位大俠幫幫忙。我是個新手,在做萊克多巴胺ELISA試劑盒時,加入底物A、B後不顯色,這是為什麼愁啊

這個原因老多了。你裝酶標抗體,顯色液A和B,三種混一起看是否顯色,如果不顯色,那就是顯色液或者酶出問題了。換掉一種再試。
如果能顯色,那就是抗體系統出問題了。這個就比較麻煩。如你濃度太低,抗原與抗體不反應,包被出問題等等。

5. ELISA不顯色的原因有哪些

先做下排除實驗。1.直接加親和素標記的鹼性磷酸酶是否顯色?如果沒問題接著做下一步2.直接包被二抗是否顯色

6. ELISA為什麼所有孔都完全沒顏色

如果你確定是步驟沒有問題的話,不顯色的因素很多,要一一排除。假如是二抗或者顯色液的問題,可以用二抗和顯色液混合看是否顯色,每個因素逐一排除。我們的ELISA檢測抗原或者抗體的步驟是這樣的,你可以做個參考:包被好抗體的板條,加入待測樣品,孵育後洗滌拍干,加入酶標抗原孵育後洗滌拍干,加入顯色液顯色。

7. 連續做了兩邊ELISA,為什麼會不顯色

可能包被出現問題,可以包下抗原試試 或者將一抗生物素化,包親和素,再加生物素化一抗 抗原 二抗

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