測脯氨酸為什麼下層水相有顏色
1. 植物體內游離脯氨酸含量的測定注意事項
植物組織中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作為抗寒育種的生理指標。
一 實驗試劑：3%磺基水楊酸：1.5g定容到50ml；
2.5%酸性茚三酮（4℃下2到3天有效）：冰乙酸：6mol/LH3PO4=3：2
例：1.25g溶到30ml冰乙酸和20ml6mol/LH3PO4中。
6mol/LH3PO4 16ml H3PO4溶到50ml水中
脯氨酸標准溶液：稱取25mg脯氨酸，蒸餾水定容到250ml，其濃度為100μg/ml,再取此液10ml用水稀釋至100ml,即為10μg/ml的脯氨酸標准液。
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二 標准曲線的製作：
1，取7支具塞刻度試管，按下表加入各試劑，混勻後加玻璃球塞，在沸水中加熱 40分鍾；
2，取出冷卻後向各管加入5ml甲苯充分震盪，以萃取紅色物質，靜置待分層後，吸取甲苯層以「0」管為對照在波長520nm下比色；
3，以消光度為縱坐標，脯氨酸含量為橫坐標，繪制標准曲線，求線性回歸方程。
管號 0 1 2 3 4 5 6
標准脯氨酸量（ml） 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0
H2O 2 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0
冰乙酸（ml） 2 2 2 2 2 2 2
酸性茚三酮（ml) 3 3 3 3 3 3 3
脯氨酸含量（μg） 0 2 4 8 12 16 20
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三 樣品測定：
1，脯氨酸提取：取混勻剪碎葉片0.2到0.5g，分別置於大試管中，加入5ml 3%磺基水楊酸，加蓋，沸水浴中浸提10分鍾；
2，取出試管待冷卻至室溫後，吸取2ml上清液，加2ml冰乙酸和3ml 2.5%酸性茚三酮，於沸水浴中加熱40分鍾，接著按標准曲線製作方法進行甲苯萃取和比色。
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四 計算：
脯氨酸（μg/g）=XV/(W*A)
X——待提取液中脯氨酸含量（μg），由標准曲線求得；
V——提取液總體積（ml）；
W——樣品重（g）；
A——測量時吸取的體積（ml）
2. 為什麼脯氨酸與茚三酮反應生成黃色物質，而其他氨基酸卻是生成藍紫色物質
原因：與水合茚三酮反應時，所有氨基酸及具有游離α-氨基的肽都產生藍紫色，但脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應產生黃色物質，因其α-氨基被取代，所以產生不同的衍生物。
反應原理：α-氨基酸與水合茚三酮一起在水溶液中加熱，可發生反應生成藍紫色物質。氨基酸被氧化分解，放出氨和二氧化碳，氨基酸生成醛，水合茚三酮則生成還原型茚三酮。在弱酸性溶液中，還原型茚三酮、氨和另一分子茚三酮反應，縮合生成藍紫色物質。
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1、反應機理：除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應生成黃色物質外，所有的α-氨基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。該反應分兩步進行：
（1）氨基酸被氧化，產生二氧化碳 、氨氣和醛，而水合茚三酮被還原成還原型茚三酮。
（2）所生成之還原型茚三酮與另一個水合茚三酮分子和氨縮合生成有色物質。
反應的適宜pH為5～7，同一濃度的蛋白質或氨基酸在不同pH條件下的顏色深淺不同，酸度過大時甚至不顯色。
2、脯氨酸（Proline，縮寫為Pro 或P），α-亞氨基酸，水中溶解度比任何氨基酸都大，25℃時100g水中可溶162g左右。一旦進入肽鏈後，可發生羥基化作用，從而形成4-羥脯氨酸，是組成動物膠原蛋白的重要成分。
3. 為什麼脯氨酸會顯示不同的顏色
你好，因為在不同環境下，發生不同的反應，產生不同的物質
4. 測脯氨酸含量時用甲苯萃取的紅色物質應該在上層嗎
應該就說明主成分是水溶性的吧
5. 我羥脯氨酸標准曲線的時候，加顯色劑之後，有的試管有黃色油滴狀液體，怎麼辦呀！
我不太清楚 ，不過你可以到 《工標網》 到那查詢你的標准號和關鍵字，工標網的標准錄入量很大，聽說有十幾萬條標准，到工標網找標准也很方便，聽說是採用智能化搜索引擎，你只要輸入標准號就可以輕松找出相關的標准！
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6. 氨基酸和茚三酮的顯色反應 會有三種不同顏色的原因
是因為氨基酸的種類不同。反應成紫色的是亮氨酸，反應成黃色的是賴氨酸，亮氨酸和賴氨酸混合溶液與茚三酮反應為棕色。
7. 脯氨酸的理化性質
外觀與性狀：白色結晶或結晶性粉末或無色針狀結晶，含一個結晶水。微臭，味微甜。
熔點：210-220°C。
比旋度：-84.5°至-86.0°。
潮解性：有潮解性。
溶解性：該品在水中易溶，在乙醇中溶解，難溶於丙酮和氯仿在乙醚或正丁醇中不溶。
儲存：遮光，密封保存。
等電點（pI）：6.30 可從乙醇/乙醚中得到無色針狀結晶，從水中得到斜方晶，有強甜味，與水合茚三酮試液反應呈黃色，但被冰醋酸酸化後呈紅色，與硫氰酸銨反應產生難溶性鹽。
注*：其中N的化合價為+5。 S24/25Avoid contact with skin and eyes.
避免與皮膚和眼睛接觸。 R36/37/38Irritating to eyes, respiratory system and skin.
刺激眼睛、呼吸系統和皮膚。 方法名稱：脯氨酸的測定——電位滴定法
應用范圍：該方法採用滴定法測定脯氨酸的含量。該方法適用於脯氨酸。
方法原理：供試品加冰醋酸溶解後，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，記錄高氯酸滴定液的使用量，計算，即得。
試劑：
⒈ 水（新沸放置至室溫）
⒉ 高氯酸滴定液（0.1mol/L）
⒊ 冰醋酸
⒋ 基準鄰苯二甲酸氫鉀
⒌結晶紫指示液
⒍醋酐
⒎ 醋酸汞試液
試樣制備：
① 高氯酸滴定液（0.1mol/L）
配製：取無水冰醋酸（按含水量計算，每1g水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，搖勻，在室溫下緩緩滴加醋酐23mL，邊加邊搖，加完後再振搖均勻，放冷，加無水冰醋酸適量使成1000mL，搖勻，放置24小時。若所測供試品易乙醯化，則須用水份測定法測定本頁的含水量，再用水和醋酐調節至本液的含水量為0.01%-0.2%。
標定：取在105℃乾燥至恆重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g，精密稱定，加無水冰醋酸20mL使溶解，加結晶紫指示液1滴，用本液緩緩滴定至藍色，並將滴定的結果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當於20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，即可。
貯藏：置棕色玻璃瓶中，密閉保存。
②結晶紫指示液
取結晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解，即得。
操作步驟：精密稱取供試品0.1g，加冰醋酸50mL溶解後，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，並將滴定的結果用空白試驗校正，記錄消耗高氯酸滴定液的體積數（mL），每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當於11.51mg的脯氨酸（C5H9NO2)，即得。
注1：「精密稱取」系指稱取重量應准確至所稱取重量的千分之一，「精密量取」系指量取體積的准確度應符合國家標准中對該體積移液管的精度要求。
參考文獻：中華人民共和國葯典，國家葯典委員會編，化學工業出版社，2005年版，二部，p.657。 酸度測定：取該品2.0g，加水20ml溶解後，依法測定，pH值應為5.9～6.9。
溶液透光度測定：取該品1.0g，加水10ml溶解後，照分光光度法，在430nm的波長處測定透光率，不得低於98.0%。
氯化物檢驗：取該品0.25g，依法檢查，與標准氯化鈉溶液5.0ml製成的對照液比較，不得更濃（0.02%）。
硫酸鹽檢驗：取該品1.0g，依法檢查，與標准硫酸鉀溶液2.0ml製成的對照液比較，不得更濃（0.02%）。銨鹽取該品0.1g，依法檢查，與標准氯化銨溶液2.0ml製成的對照液比較，不得更深（0.02%）。
其他氨基酸檢驗：取該品，加水製成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加水稀釋成每1ml中含0.25mg的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－無水乙醇－濃氨溶液－水（8:8:1:3）為展開劑，展開後，晾乾，噴以茚三酮的丙酮溶液（1→50），在80℃乾燥約10分鍾，立即檢視，供試品溶液所顯雜質斑點的顏色，與對照溶液的主斑點比較，不得更深（0.5%）。乾燥失重取該品，在105℃乾燥3小時，減失重量不得過0.3%。
熾灼殘渣：不得過0.1%。
鐵鹽檢驗：取該品1.0g，依法檢查，與標准鐵溶液1.0ml製成的對照液比較，不得更深（0.001%）。重金屬取該品1.0g，加水23ml溶解後，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查，含重金屬不得過百萬分之十。
砷鹽檢驗：取該品2.0g，加鹽酸5ml與水23ml溶解後，依法檢查（附錄Ⅷ J第一法），應符合規定（0.0001%）。
熱原檢驗：取該品，加氯化鈉注射液製成每1ml中含45mg的溶液，依法檢查（附錄Ⅺ D），劑量按家兔體重每1kg注射10ml，應符合規定（供注射用）。
該品為吡咯烷-2-羧酸。按乾燥品計算，含C5H9NO2不得少於98.5%。
8. 測定植物體內脯氨酸含量
脯氨酸可以參與植物體內滲透調節，增大細胞內生物大分子對水的親和力，提高植物的抗旱性。抗旱性較強的植物往往積累較多的脯氨酸，如果在相同實驗條件下，小麥更容易萎蔫就是該植物抗旱性不足，所以脯氨酸含量低於正常小麥是有可能的。
至於 要用乾重計算是因為植物體內的脯氨酸與含水量有很大關系，實驗證明脯氨酸會在植物復水過程中含量迅速下降。
之前學習414農學類聯考的時候聽老師講過，學得不精希望能幫到你。知網上有很多關於脯氨酸與植物抗逆性的文章，想要詳細的可以去看看。