茚三酮反應為什麼蛋白質顏色深
① 茚三酮顯色機理是什麼
茚三酮是一種用於檢測氨或者一級胺和二級胺的試劑。當與這些游離胺反應時,能夠產生深藍色或者紫色的物質,叫做Ruhemann紫。
茚三酮常用來檢測指紋,這是由於指紋表面所蛻落的蛋白質和肽中含有的賴氨酸殘基,其上的一級胺被茚三酮檢測。在室溫條件下,它是一種白色的固體物質,溶於乙醇和丙酮。茚三酮可以看作是是二氫茚-1,2,3-三酮的水合物。
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應用領域
茚三酮可以用來監測固相肽合成中的脫保護作用(Kaiser測試)。肽鏈通過C端與固相基質連接,利用N端擴展肽鏈,當N脫保護後,茚三酮測試呈藍色。
氨基酸殘基是在N端被保護的情況下接入肽鏈的,因此如果下一個氨基酸殘基成功的連接到肽鏈上,茚三酮測試會給出無色或者黃色的結果。
茚三酮也可以用於蛋白質的氨基酸分析。除去脯氨酸之外的大多數氨基酸,水解之後可與茚三酮反應。水解中某些氨基酸的側鏈也會被降解。因此對於那些與茚三酮不反應或者發生其他反應的氨基酸需要另作分析。
其餘的氨基酸經過色譜分離後可以比色定量。在分析化學反應的薄層色譜(TLC)中,它可以用於檢測所有的胺類,氨基甲酸酯類,在經過充分熱處理後可以檢測醯胺類物質。
當茚三酮與氨基酸反應時可以釋放CO2。二氧化碳中的碳原子來源於氨基酸的羧基碳。在考古研究中,這個反應用於釋放古老骨骼中羧基碳用於穩定同位素分析,以幫助重現古代生物的食物結構。
② 茚三酮使氨基酸顯色原理是什麼麻煩告訴我
α氨基酸與茚三酮在弱酸性溶液中共熱,反應後經失水脫羧生成氨基茚三酮,再與水合茚三酮反應生成紫紅色,最終為藍色物質。脯氨酸等仲胺氨基酸與茚三酮反應生成黃色物質。該反應可廣泛用於各種氨基酸的定性或定量測定。
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茚三酮的化學性質如下:
茚三酮的特性反應
茚三酮是一種用於檢測氨或者一級胺和二級胺的試劑。當與這些游離胺反應時,能夠產生深藍色或者紫色的物質,叫做Ruhemann紫。
茚三酮常用來檢測指紋,這是由於指紋表面所蛻落的蛋白質和肽中含有的賴氨酸殘基,其上的一級胺被茚三酮檢測。在室溫條件下,是一種白色的固體物質,溶於乙醇和丙酮。茚三酮可以看作是是二氫茚-1,2,3-三酮的水合物。
反應活性
羰基的碳原子帶有部分正電荷,如果其連接的鄰位基團具有吸電子能力(比如羰基本身)那麼羰基碳的正電荷會進一步加強。因此1,2,3-三羰基化合物的中心碳原子比簡單的酮具有更強的親電性。
③ 蛋白質與茚三酮形成的是藍紫色溶液還是藍紫色沉澱
蛋白質與茚三酮形成的是藍紫色沉澱。
除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應生成黃色物質外,所有的α-氨基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。
該反應分兩步進行,首先是氨基酸被氧化,產生 CO2 、NH3和醛,而水合茚三酮被還原成還原型茚三酮;第二步是所生成之還原型茚三酮與另一個水合茚三酮分子和氨縮合生成有色物質。此反應的適宜pH為5~7,同一濃度的蛋白質或氨基酸在不同pH條件下的顏色深淺不同。
簡介:
1、蛋白質和硝酸反應,生成黃色的沉澱。
2、蛋白質和茚三酮反應生成藍紫色沉澱,這個顏色比較經典而且靈敏度也非常高,是經常用的試劑。
3、還有一種就是雙縮脲試劑,在蛋白質中有一種重要的化學鍵,就是肽鍵,肽鍵與二價銅離子又產生紅色沉澱,觀察顏色來判斷蛋白質是否水解完全。
4、色氨酸,它能夠和酚試劑反應成為藍色沉澱,也是一種經典顏色,但是由於它的局限性,通常不選用此種方法。
④ 反應條件相同時,丙氨酸茚三酮反應的顏色為什麼比蛋白質茚三酮反應的顏色深
蛋白質和氨基酸一樣,也能和茚三酮水合物試劑產生紫色的顏色反應,用這個反應可以鑒別蛋白質。
除了水會呈陰性反應,而無α—氨基的脯氨酸和羥脯胺酸呈黃色。因為他們沒有α—氨基酸可以與水合茚三酮反應生成藍紫色物質。 純手打,。。
⑤ 茚三酮反應實驗報告中為什麼丙氨酸溶液比雞蛋白溶液顏色深結果分析
茚三酮反應實驗報告中,丙氨酸溶液比雞蛋白溶液顏色深,是因為:
茚三酮是鑒定氨基酸的試劑,反應十分靈敏,鑒定方法簡便。茚三酮和氨基酸的氨基反應,形成深藍色或者紫色的席夫鹼。如圖:
丙氨酸是純的氨基酸。而雞蛋白的主要成分是蛋白質,游離氨基酸或者氨基殘基很少,與茚三酮形成的席夫鹼數量有限,顏色淺也就是顯而易見的了。
⑥ 茚三酮與甘氨酸反應,然後烘乾顏色變化的原因
氨基酸的α-NH2所引起的反應。α-氨基酸與水合茚三酮一起在水溶液中加熱,可發生反應生成藍紫色物質。首先是氨基酸被氧化分解,放出氨和二氧化碳,氨基酸生成醛,水合茚三酮則生成還原型茚三酮。在弱酸性溶液中,還原型茚三酮、氨和另一分子茚三酮反應,縮合生成藍紫色物質。
所有氨基酸及具有游離α-氨基的肽都產生藍紫色,但脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應產生黃色物質,因其α-氨基被取代,所以產生不同的衍生物。
此反應十分靈敏,根據反應所生成的藍紫色的深淺,在570nm波長下進行比色就可測定樣品中氨基酸的含量。也可在分離氨基酸時作為顯色劑定性、定量地測定氨基酸。
(6)茚三酮反應為什麼蛋白質顏色深擴展閱讀:
除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應生成黃色物質外,所有的α-氨基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。該反應分兩步進行,首先是氨基酸被氧化,產生 CO2 、NH3和醛,而水合茚三酮被還原成還原型茚三酮。
第二步是所生成之還原型茚三酮與另一個水合茚三酮分子和氨縮合生成有色物質。此反應的適宜pH為5~7,同一濃度的蛋白質或氨基酸在不同pH條件下的顏色深淺不同,酸度過大時甚至不顯色。
該反應十分靈敏,1:1 500 000濃度的氨基酸水溶液即能顯示反應,因此是一種常用的氨基酸定量方法。但也有些物質對茚三酮也呈類似的陽性反應,如β-丙氨酸、氨和許多一級胺化合物等。所以定性或定量測定中,應嚴防干擾物存在。
主要反應分為兩步 :
第一步 氨基酸 + 弱酸→ 水合茚三酮 + 二氧化碳 + 醛類 + 氨氣。
第二步 兩個水合茚三酮 + 氨→ 還原性茚三酮 (藍紫色)。