比色法顏色變淺是因為什麼
㈠ 重鉻酸鉀比色法比較油脂的色澤時色澤越淺越好嗎為什麼
油脂的顏色,只是代表它原有色素和它在加工中形成色素的一個值。
㈡ 比色法操作的注意事項是什麼
噻唑藍(MTT)比色法操作注意事項
噻唑藍(MTT):四唑鹽
原理:
MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法.活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶干水的藍紫色產物,並沉澱在細胞中,而死細胞沒有這種功能。二甲亞碸(DMSO)能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物,溶液顏色深淺與活細胞數成正比。
優點:簡單快速、靈敏、經濟
缺點:由於MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶於水,需被溶解後才能檢測。這不僅使工作量增加,也會對實驗結果的准確性產生影響,而且溶解甲的有機溶劑對實驗者也有損害。
應用:新葯篩選、細胞毒牲試驗、腫瘤放射敏感性實驗等
MTT主要有兩個用途
1)葯物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養的細胞毒性的測定;
2) 細胞增殖及細胞活性測定。
比色法操作注意事項
1) 選擇適當的細胞接種濃度,保證細胞培養結束時濃度不至於過滿。
2) 種板技術:均勻。
3) 實驗時應設置調零孔,溶媒孔,加葯孔。
調零孔:培養基、MTT、DMSO。(無細胞)
溶媒孔:培養液、MTT、DMSO、細胞、溶酶。
加葯孔:培養液、MTT、DMSO、細胞、不同濃度的葯物。
(一般5-7個梯度,設3-5個復孔)
4)避免血清干擾:一般選小於10%胎牛血清的培養液進行。
5)邊緣效應:周邊孔加入PBS。
6)MTT的配置: MTT 0.5克,溶於100 ml的磷酸緩沖液。4℃下避光保存2周。
7)孔板的重復利用(1.做完MTT後用大水流盡量將板沖凈,然後用洗衣粉水泡幾個小時(小心最好讓洗衣粉先化開)。2.用自來水沖凈洗衣粉水,倒扣晾
干.3.重鉻酸鉀加濃硫酸配成的酸液中浸泡過夜泡洗液(六小時以上即可)後自來水洗凈(20次左右)每個孔都要處理4.用去離子水沖洗3遍,雙蒸水沖洗3
遍,烤乾5.超凈台中紫外線照射2個小時左右,就可以用了,不可以高壓。或泡酸過夜,dd水沖洗干凈,烘乾或者晾乾後紫外照射30min以上即可使用。8)MTT法只能用來檢測細胞相對數和相對活力,但不能測定細胞絕對數。
9)在用酶標儀檢測結果的時候,為了保證實驗結果的線性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內。
10)MTT有致癌性,用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套。
11)配成的MTT需要無菌,MTT對菌很敏感;往96孔板加時不避光也沒有關系,畢竟時間較短,或者你不放心的時候可以操作台上的照明燈關掉。
㈢ 比色法做環氧乙烷殘留量實驗顏色淡是怎麼回事
說明樣品的含量低 也可能是你的顯色反應沒做好
㈣ 什麼叫比色法操作上應該注意什麼問題
比色法是通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。早在公元初古希臘人就曾用五倍子溶液測定醋中的鐵。原理是基於被測物質溶液的顏色或加入顯色劑後生成的有色溶液的顏色,顏色深度和物質含量成正比,則根據光被有色溶液吸收的強度,即可測定溶液中物質的含量。
操作注意事項:選擇適當的細胞接種濃度,保證細胞培養結束時濃度不至於過滿;實驗時應設置調零孔,溶媒孔,加葯孔;避免血清干擾:一般選小於10%胎牛血清的培養液進行。
比色法的原理:
利用有色物質對特定波長光的吸收特性來進行定性分析的一種方法,其原理是基於被測物質溶液的顏色或加入顯色劑後生成的有色溶液的顏色,顏色深度和物質含量成正比,則根據光被有色溶液吸收的強度,即可測定溶液中物質的含量。
如利用光電效應,將透過有色溶液後的光強度成正比例地變換為電流的強度來進行比色定量的方法。
以上內容參考:
網路-比色法
㈤ 比色測定的基本原理是什麼操作步驟有哪些
原理:
比色分析是基於溶液對光的選擇性吸收而建立起來的一種分析方法,又稱吸光亮度法。
有色物質溶液的顏色與其濃度有關,溶液的濃度越大,顏色越深,利用光學比較溶液顏色的深度,可以測定溶液的濃度。
根據吸收光的波長范圍不同以及所使用的儀器精密程度,可分為光電比色法和分光亮度法等。
步驟
1. 用相同型號的比色管。
2. 配製等體積的系列標准樣品。
3. 配製待測樣品(與標准樣品等體積)。
4. 對比,找出相同的濃度。
㈥ 比色測定的基本原理是什麼
比色分析是基於溶液對光的選擇性吸收而建立起來的一種分析方法,又稱吸光亮度法。
有色物質溶液的顏色與其濃度有關。溶液的濃度越大,顏色越深。利用光學比較溶液顏色的深度,可以測定溶液的濃度。
根據吸收光的波長范圍不同以及所使用的儀器精密程度,可分為光電比色法和分光亮度法等。
比色分析具有簡單、快速、靈敏度高等特點,廣泛應用於微量組分的測定。通常中測定含量在10-1~10-4mg·L-1的痕量組分。比色分析如同其他儀器分析一樣,也具有相對誤差較大(一般為1%~5%)的缺點。但對於微量組分測定來說,由於絕對誤差很小,測定結果也是令人滿意的。在現代儀器分析中,有60%左右採用或部分採用了這種分析方法。
㈦ 比色法原理是什麼
比色法的基本原理是朗伯(Lambert)定律,闡述為:光被透明介質吸收的比例與入射光的強度無關;在光程上每等厚層介質吸收相同比例值的光。
公式為:A=lg(1/T)=Kbc
(A為吸光度;T為透射比, 即透射光強度與入射光強度之比;c為吸光物質的濃度,單位mol/L;b為吸收層厚度,單位cm )