革蘭染色為什麼不同顏色
❶ 細菌進行革蘭染色後,為什麼有的呈紅色,有的呈紫色
紅色是結晶紫的紫色被酒精洗脫以後,番紅復染上去的顏色,表明該種菌是革蘭陰性菌。紫色或藍紫色是結晶紫的顏色,表明該種菌是革蘭陽性菌
❷ 細菌經革蘭氏染色法後,為什麼有的是呈紫色,有的卻是紅色
這是跟細菌的細胞壁的結構和它的成分有關。
對於革蘭氏陽性菌,它的細胞壁比較厚、肽聚糖含量高和其交聯較緊密,故遇乙醇時,肽聚糖的網孔因失水而收縮,再加上它不含類脂,不能在壁上溶出空隙,細胞壁里的結晶紫和碘的復合物不被溶解,所以呈現紫色;
而革蘭氏陰性菌的壁較薄,肽聚糖含量少,交聯鬆散,故遇乙醇後肽聚糖網孔不易收縮,加上含類脂物質較多,乙醇將類脂物質溶解,壁上出現較大的空隙,乙醇進入到細胞壁內溶解結晶紫與碘的結合物,細胞呈無色,再經番紅等紅色染料進行復染,細胞獲得了一層新的顏色——紅色。
所以經過革蘭氏染色法能夠分辨出那些是陽性菌,那些是陰性菌。
❸ 細菌的革蘭染色性不同是因為什麼
細菌的革蘭染色性不同是因為什麼
對於面試而言,更多的是考查面試者的表達,這也是和筆試的最大的區別,筆試更注重的是考查對知識的掌握情況。所以,在面試過程中,把一個知識點有邏輯、有層次感而又清晰流暢地表達出來,才是制勝的關鍵。對檢驗專業的面試而言,考查的題型較多,接下來以口述實操題型為例,給大家做了相關的歸納總結如下:
請簡述革蘭染色法的操作步驟。
那麼對於口述實操題型我們可以從操作前、中、後三個方面對該種題型進行完整全面的分析,如下:
(一)操作前(即為操作前的准備,准備好整個操作過程中所需要用到的東西)
干凈的載玻片,細菌標本,生理鹽水,膠頭吸管,接種環,酒精燈,革蘭染液(結晶紫、碘液、95%的乙醇、石碳酸復紅液),計時器。
(二)操作中(即為整個的操作步驟,分別用第一步第二步這種能體現思維邏輯性的詞)
第一步:製片
用膠頭吸管取一滴生理鹽水於干凈的載玻片上,再用接種環挑取細菌菌落,將其放到生理鹽水中進行研磨直至形成均勻的菌膜,自然乾燥後用酒精燈進行固定,固定時在酒精燈外焰高出快速過2~3次,冷卻後進行染色;
第二步:染色
1.初染:在細菌塗片上滴加結晶紫染液數滴(覆蓋菌膜為宜),染色時間1min,到時間後用細流水進行沖洗;
2.媒染:在細菌塗片上滴加碘液數滴(以染液覆蓋菌膜為宜),染色時間1min,到時間後用細流水進行沖洗;
3.脫色:在菌膜上滴加95%的乙醇液數滴,並輕搖玻片使其均勻脫色,脫色時間約30s,直至脫下的酒精無色為止,立即用細流水進行沖洗;
4.復染:在菌膜上滴加石碳酸復紅染液數滴,時間約30s,到時間後用細流水進行沖洗;
染色後,細菌塗片自然晾乾或用吸水紙吸干,再置於顯微鏡下進行觀察,顯示紫色的為革蘭陽性菌,紅色為革蘭陰性菌,(此為一張完整的細菌塗片顯示的結果,這部分內容在說完具體的染色的步驟後也要簡單的提到)。
(三)操作後(能影響到整個試驗結果的影響因素以及注意事項都可以答在操作後這一部分裡面)
1.在製作細菌塗片時,菌膜不易過後,否則影響染色的結果觀察;
2.在用酒精燈的火焰進行固定時,溫度不易過高,以不燙手為宜;
3.保證所用試劑位於有效期內,否則試劑失效不能用於染色;
4.染色時,染色時間要固定好,否則過長或過短的染色時間都會都會對最終的染色效果造成一定程度的影響。
針對該題,我們首先需要明確基本的答題思路為操作前、操作中、操作後,這樣在敘述答案的時候才不至於邏輯混亂、語言含糊不清;其次面試的初衷也不在於考察學員對專業知識的掌握情況,如果考察的是專業知識掌握情況,那麼通過筆試就能達到目的,所以在答題的過程中如果答案裡面的染色時間這種數字性的內容我們記的不是很清楚了,那麼我們可以用「染色一定的時間」等這種稍微模糊性的字眼替代,畢竟面試最重要的還是如何清晰流暢地把所知道的東西表述出來;最後在整體印象上給考官呈現出樂觀、積極、向上的精神風貌;如果上述幾點都能做到的話,那麼相信學員也會在面試中取得不錯的成績。
❹ 為什麼革蘭染色會行成兩種不同的顏色其機制是什麼
細菌的不同顯色反應是由於細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結構決定的。經結晶紫染色的細胞用碘液處理後形成不溶性復合物,乙醇能使它溶解,所以染色的前二步結果是一樣的,但在G+細胞中,乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水,導致孔隙變小,由於結晶紫和碘的復合物分子太大,不能通過細胞壁,保持著紫色。在Gˉ細胞中,乙醇處理不但破壞了胞壁外膜,還可能損傷肽聚糖層和細胞質膜,於是被乙醇溶解的結晶紫和碘的復合物從細胞中滲漏出來,當再用襯托的染色液復染時,顯現紅色。紅色染料雖然也能進入已染成紫色的G+細胞,但被紫色蓋沒,紅色顯示不出來。
原理:
①革蘭氏陽性細菌的細胞壁
G+細菌細胞壁具有較厚(20-80nm)而緻密的肽聚糖層,多達20層,占細胞壁成分的60%~90%,它同細胞膜的外層緊密相連(圖2-9)。有的G+細菌細胞壁中含有磷壁酸(teichoic-acid),也稱胞壁質(murein),它是甘油和核糖醇的聚合物,磷壁酸通常以糖或氨基酸的酯而存在。由於磷壁酸帶負電荷,它在細胞表面能調節陽離子濃度。磷壁酸與細胞生長有關,細胞生長中有自溶素(autolysins)酶類起作用,磷壁酸對自溶素有調節功能,阻止胞壁過度降解和壁溶。
如果細胞壁的肽聚糖層被消溶,G+細胞成為原生質體(protoplasts),細胞壁不復存在,而只存留細胞膜。除鏈球菌外,大多數G+細菌細胞壁中含極少蛋白質。
②革蘭氏陰性細菌的細胞壁 Gˉ細菌細胞壁比G+細菌細胞壁薄(15~20nm)而結構較復雜,分外膜(outer membrane)和肽聚糖層(2~3nm)。在細胞壁和細胞質膜之間有一個明顯的空間,稱為壁膜間隙(periplasmic space)。
外膜 Gˉ細菌細胞壁外膜的基本成分是脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),它同細胞質膜相同之處也是雙層類脂,但除磷脂外還含有多糖和蛋白質。
LPS的多糖部分包括核心多糖和O-特異多糖。O-特異多糖由重復分支的碳水化合物分子組成,含有已糖(葡萄糖、半乳糖和鼠李糖)和二脫氧已糖。由於糖的種類不同,使各種Gˉ細胞具有不同特性的LPS。核心多糖(core polysaccharide)的主要組分是酮脫氧辛酸(ketodeoxyoctonate, KDO)。
外膜中還含有幾種蛋白,如脂蛋白、通透蛋白。有些蛋白具有通孔作用(porin),調控外界分子進入細胞;有的蛋白分子可以作為噬菌體的受體;許多G-細菌對高等生物有致病性是由LPS的成分決定的,它的毒性組分常稱為內毒素(endotoxins)。
肽聚糖層 Gˉ細菌細胞壁的肽聚糖層很薄,在大腸桿菌和其它細菌中僅有單
層。肽聚糖層和外膜的內層之間通過脂蛋白連接起來。
壁膜間隙 Gˉ細菌細胞壁的外膜與細胞質膜之間存在明顯的壁膜間隙,一層薄的肽聚糖處於其間,肽聚糖層和細胞質膜之間的間隙較寬,肽聚糖層至外膜之間的間隙較窄。大腸桿菌的壁膜間隙寬度為12~15nm,呈膠腖態。其間含有三類蛋白質:水解酶,催化食物的初步降解;結合蛋白,啟動物質轉運過程;化學受體(chemoreceptors),在趨化性中起作用的蛋白。
❺ 為何通過革蘭氏染色可以呈現不同的顏色
因為不同細胞表面的結構不同。革蘭氏陰性菌有兩層細胞質膜,細胞壁在兩層膜之間;而革蘭氏陽性菌只有一層細胞質膜,細胞壁位於外表面。而且細胞質膜上的蛋白質,糖,脂肪的含量也不同,革蘭氏陰性菌細胞質膜表面含較多脂多糖。
❻ 為什麼革蘭染色後會形成兩種不同的顏色其機制是什麼三個學說
革蘭染色法的三個學說是
1通透性學說,革蘭陽性菌細胞壁結構較緻密,肽聚糖層厚,脂質含量少,乙醇不易透入,革蘭陰性菌細胞壁結構疏鬆,肽聚糖層薄,含大量脂質,乙醇易滲入
2等電點學說,革蘭陽性菌等電點比革蘭陰性菌低,在相同ph下,革蘭陽性菌所帶所帶負電荷比革蘭陰性菌多,故與帶正電荷的結晶紫染料結合牢固,不易脫色
3化學學說,革蘭陽性菌菌體含大量核糖核酸鎂鹽,可與碘、結晶紫牢固結合,使已著色的細菌不被乙醇脫色,革蘭陰性菌菌體含核糖核酸鎂鹽很少,故易被脫色
❼ 微生物 為什麼革蘭陽性菌染色成紫色,而革蘭陰性菌染色成紅色
因為第三步驟酒精脫色時間太短,革蘭氏陰性菌脫色不到位,導致在顯微鏡下革蘭氏陰性菌被判斷為革蘭氏陽性。酒精脫色是非常重要的一步,也是革蘭氏染色成功與否的關鍵。
革蘭陽性細菌的肽聚糖層較厚,經乙醇處理後使之發生脫水作用而使孔徑縮小,結晶紫與碘的復合物保留在細胞內而不被脫色,成為紫色;
而革蘭陰性細菌的肽聚糖層很薄,脂肪含量高,經乙醇處理後部份細胞壁可能被溶解並改變其組織狀態,細胞壁孔徑大,不能阻止溶劑透入,因而將結晶紫與碘的復合物洗去而被脫色。
(7)革蘭染色為什麼不同顏色擴展閱讀:
革蘭氏陽性細菌:金黃葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、利斯特菌等
革蘭氏陰性桿菌:克雷白桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、流感嗜血桿菌、沙門氏菌等
無論陽性菌還是陰性菌都有桿菌和球菌。葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌是臨床最為常見的病原菌,葡萄球菌屬於革蘭陽性球菌,大腸桿菌屬於革蘭陰性菌中的腸桿菌科,除大腸桿菌以外,臨床較常見的腸桿菌科細菌還有變形桿菌、沙門氏菌、克雷白桿菌;綠膿桿菌屬於假單胞菌,為非發酵菌,是臨床常見的較耐葯革蘭陰性桿菌。
❽ 革蘭氏染色的原理是什麼他是怎麼把革蘭氏陽性菌和陰性均染成不同顏色 的
革蘭氏染色原理是通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌遇乙醇或丙酮脫色處理時,不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌在遇脫色劑後,呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。其中,染色的差異主要是陰性與陽性細菌細胞壁的差異所引起的。
❾ 為什麼都是用革蘭染色法,卻產生不同的結果
你是說 分別是紅色和藍色嗎?
因為陽性它們細胞壁中含有較大量的肽聚糖,但經常缺乏革蘭氏陰性菌所擁有的第二層膜和脂多糖層。
用酒精可以溶解脂質層。
造成染料能否進去。
所以就有不同的顏色了。